PROCLIN系列防腐劑 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
為解決生物樣本處理過程中保存期短的問題,SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐劑ProClin150,200,300,5000,可以有效地控制體外診斷試劑中微生物的生長。當濃度達到0.02%條件下,ProClinâ 系列防腐劑具有廣譜抗菌活性,能在比較長的時間內抑制細菌、真菌和酵母菌等微生物的生長;同時,它又能保持體系中酶的活性,因此它是一種理想的可替代硫汞撒、疊氮化鈉和慶大霉素等生物防腐劑。 ProClinâ 系列防腐劑的優(yōu)點:
ProClin5000使用范圍pH 2-12 ProClinâ 系列防腐劑作用原理: ProClinâ 系列防腐劑的活性成分主要是2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)。這兩種成分抑制細胞的生長以及促使細胞凋亡的原理相同;钚猿煞衷谂c細胞膜接觸幾分鐘后,立即可以滲透到膜內并抑制細胞內酶的活性(見圖1)。目標酶處于細胞代謝KREBS循環(huán)的中心位置,ProClinâ 系列防腐劑作用KREBS循環(huán)的四個不同位置(見圖2):丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脫氫酶(ketoglutarate dehydrogenase),琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)和NADH脫氫酶(NADH dehydrogenase)。從而抑制細胞生長代謝,大分子的合成,引起細胞內能量水平迅速下降。由于能量體系的崩潰,細胞不能合成日常代謝所需要的化合物。 所有的細菌及真菌至少擁有部分KREBS循環(huán),所以ProClinâ 系列防腐劑的適用的范圍非常廣泛。其次,ProClinâ 系列防腐劑具有多標靶作用位點,因此大大降低了因變異產生的微生物的耐藥性。隨著KREBS循環(huán)被阻斷,細胞產生能量(以合成ATP為標志,見圖3)和合成酶等生物活性物質的能力迅速下降,但其使用劑量卻保持比較低的水平對人畜無害。
ProClin 系列防腐劑性能:
實 驗數(shù)據(jù)表明,ProClin 系列防腐劑不會對診斷試劑中的關鍵酶與底物的結合速率產生影響,比如:辣根過氧化酶(HRP),堿性磷酸酶(AP)。圖4. 250ppmProClin300對HRP(AP)與底物結合速率的影響 短期效應 即使ProClin300的使用濃度超過推薦濃度15倍時,其短期內對于HRP和AP的Km和Vmax 無影響(見表1)。
表1.ProClin300對HRP和AP的Vmax的影響
長期效應 長期使用ProClin 300同樣不會對酶(例如:HRP和AP,見圖5)的活性產生影響。 圖5. 4度(37度)下ProClin對AP (HRP)活性的影響
在推薦使用濃度下,ProClin â 系列防腐劑不會對抗體的結合產生影響。通過研究ProClin 300對經純化過小鼠IgM抗原與聯(lián)結HRP的抗-小鼠IgM抗體之間結合的影響,表明濃度在300ppm以下,ProClin 300不會對其產生影響(見圖6)。50ppm的ProClin 300保存上述抗體35天同樣無影響。 圖6. ProClin300對連接HRP的抗體影響 ProClin系列防腐劑的參數(shù)
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