技術(shù)原理與實(shí)驗(yàn)步驟

采用噬菌體介導(dǎo)的同源重組進(jìn)行基因敲除：首先構(gòu)建同源交換位點(diǎn)（AES），隨后將其整合到結(jié)核分枝桿菌噬菌體基因組中，獲得噬菌粒（phasmid）；將噬菌粒導(dǎo)入恥垢分枝桿菌，獲得整合有同源交換位點(diǎn)的重組噬菌體，經(jīng)體外擴(kuò)增獲得高滴度的重組噬菌體，對(duì)結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)染；將轉(zhuǎn)染后的結(jié)核分枝桿菌涂布到含潮霉素抗性的固體培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)4-5周，挑取單克隆，通過PCR等方式進(jìn)行驗(yàn)證。

服務(wù)流程

• 客戶提供結(jié)核菌敲除基因編號(hào)
• 收到客戶信息后構(gòu)建同源臂及包裝噬菌體
• 噬菌體感染結(jié)核菌并驗(yàn)證陽性克隆
• 提交結(jié)核基因敲除菌菌液及實(shí)驗(yàn)相關(guān)的引物、測(cè)序結(jié)果等信息

服務(wù)周期: 4-6個(gè)月

參考文獻(xiàn)

1. Specialized transduction: an efficient method for generating marked and unmarked targeted gene disruptions in Mycobacterium tuberculosis, M. bovis BCG and M. smegmatis. Stoyan Bardarov et al., Microbiology, 2002, 148: p3007-3017.

2. Specialized transduction designed for precise high-throughput unmarked deletions in Mycobacterium tuberculosis. Jain P, Hsu T et al., mBio, 2014, 5(3): e01245-14.

晶諾生物圍繞國際新銳的細(xì)胞因子/趨化因子、微生物基因突變體文庫和微生物基因突變技術(shù)三方面布展公司的業(yè)務(wù)。

在當(dāng)代生物藥物領(lǐng)域中，細(xì)胞因子類藥物對(duì)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要的影響。隨著生物醫(yī)學(xué)科技的發(fā)展，新的生物藥的研發(fā)以及原有藥物的改良都是相關(guān)領(lǐng)域的競爭熱點(diǎn)和重點(diǎn)。我們團(tuán)隊(duì)具有國際領(lǐng)先的研發(fā)生產(chǎn)技術(shù)，將完善細(xì)胞因子和趨化因子產(chǎn)品系列，對(duì)科研市場、診斷試劑和臨床藥物三大方向的產(chǎn)品研發(fā)和銷售。

抗生素的誕生為改善人類的生存能力和健康狀況做出了不可估量的貢獻(xiàn)。然而隨著抗生素的普遍使用，一些臨床致病微生物逐漸產(chǎn)生了對(duì)藥物的耐/抗藥性。研究致病微生物耐/抗藥性的分子機(jī)理、進(jìn)行新型藥物的研發(fā)和篩選仍將是傳染病控制和治療的核心工作。我們團(tuán)隊(duì)掌握當(dāng)前國際微生物突變體構(gòu)建的先進(jìn)技術(shù)，針對(duì)我國臨床致病微生物耐藥性嚴(yán)重的問題，構(gòu)建重要病原菌的突變體文庫；進(jìn)而進(jìn)行大規(guī)模的新型藥物篩選服務(wù)。

在解決一切生物學(xué)問題的研究中，基于現(xiàn)代遺傳學(xué)的科研項(xiàng)目和需求越來越大。受困于專業(yè)精深和人才稀少，國內(nèi)多數(shù)的研究機(jī)構(gòu)仍無法開展重要病原體的基因突變研究。我們將以公司成熟的技術(shù)和平臺(tái)，為國內(nèi)的科研機(jī)構(gòu)和人員提供國際水準(zhǔn)的微生物基因突變定制服務(wù)。

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