在建立基因敲除(KO)細(xì)胞株后,我們必須對細(xì)胞株進(jìn)行充分的驗證,以確保細(xì)胞株構(gòu)建成功。除了采用常規(guī)的PCR、測序等方法外,蛋白水平的Western blot(WB)驗證也尤為重要。你有沒有經(jīng)歷過,WB鑒定蛋白與PCR測序結(jié)果不一致?WB結(jié)果中無信號或顯示信號弱?
在WB驗證中,偶爾會出現(xiàn)測序鑒定為KO純合子但WB檢測卻顯示有蛋白殘留。出現(xiàn)這種情況的原因眾多,其中由外顯子的可變剪切引起的蛋白殘留是最為復(fù)雜的,其影響因素包括細(xì)胞系的類型,靶基因和細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境等?偟膩碚f,蛋白殘留跟gRNA的設(shè)計、基因(或mRNA)的可變剪切、WB抗體的選擇等因素都密切相關(guān)。
不過無需擔(dān)心!針對這些疑難雜癥,11月9日(周四)晚7點(diǎn),賽業(yè)生物細(xì)胞基因編輯生產(chǎn)經(jīng)理范麗莉?qū)?strong>「基因敲除細(xì)胞蛋白水平驗證的挑戰(zhàn)和解決方案」線上課程,從基因敲除細(xì)胞系構(gòu)建、細(xì)胞株驗證等多個應(yīng)用場景展開,為大家詳細(xì)講解基因敲除細(xì)胞系鑒定方法與技術(shù)特點(diǎn),以及優(yōu)化gRNA設(shè)計、提高編輯效率的實驗技巧,通過具體操作案例分析實現(xiàn)體外疾病模型構(gòu)建的創(chuàng)新策略。
賽業(yè)生物自主開發(fā)的細(xì)胞基因編輯系統(tǒng)Smart-CRISPR™,是基于人工智能技術(shù)所建立的綜合算法,通過最優(yōu)的gRNA設(shè)計,結(jié)合抗體分析,及階段性WB測試等策略,為您提供科學(xué)的解決方案,讓您不再為KO細(xì)胞蛋白殘留問題而發(fā)愁。“碼”上報名,相約云端,參與課程將有機(jī)會獲得藍(lán)牙耳機(jī)、數(shù)據(jù)線、小鼠公仔等驚喜好禮!
1.基因敲除細(xì)胞系相關(guān)研究及應(yīng)用場景
2.基因敲除細(xì)胞系構(gòu)建策略及課題解決方案
3.基因敲除細(xì)胞系鑒定方法與技術(shù)特點(diǎn)
4.基因敲除細(xì)胞系的使用及其常見問題解析
02 講師簡介
華南農(nóng)業(yè)大學(xué)畢業(yè),從事細(xì)胞基因編輯相關(guān)研究超7年,具有多年分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)實驗技術(shù)的研究經(jīng)驗。
03 課程指南
針對基因敲除細(xì)胞株存在的構(gòu)建技術(shù)難點(diǎn),以及iPSC細(xì)胞單克隆制備復(fù)雜等問題,賽業(yè)生物逐一給出了應(yīng)對措施及解決方案,并向大家提供具備參考價值的案例展示。如您想要了解相關(guān)內(nèi)容,或是查詢我們已有的客戶文獻(xiàn)發(fā)表,可掃碼下載這份《體外細(xì)胞模型解決方案》獲取更多信息。