基于細(xì)胞的分析(cell-based assay)測量活細(xì)胞或固定化細(xì)胞中的各種參數(shù),用于研究基因、蛋白質(zhì)或全細(xì)胞功能以及控制這些功能的調(diào)節(jié)機(jī)制,篩選藥物開發(fā)中生物過程的潛在抑制劑或誘導(dǎo)劑,或發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)或反應(yīng)發(fā)生的位置(圖1)。
圖1:基于細(xì)胞的檢測可分析的細(xì)胞過程
使用基于細(xì)胞的分析的最大好處是,與簡單的生化分析相比,可更好地反映生物系統(tǒng)的復(fù)雜性,因為不是針對分離的受體或酶進(jìn)行分析,一個功能性細(xì)胞單元中包含所有細(xì)胞器都在檢測范圍內(nèi)。這種復(fù)雜性是準(zhǔn)確模擬活體中的細(xì)胞行為的基礎(chǔ),為體外分析帶來更高的生理相關(guān)性和可靠性。
基于細(xì)胞的分析有哪些應(yīng)用?
基于細(xì)胞的測定可用于基礎(chǔ)生命科學(xué)研究和藥物篩選。前者主要使用低通量樣品,后者通常采用高通量流程。
在基礎(chǔ)生命科學(xué)研究中,基于細(xì)胞的分析旨在探究生理和病理狀態(tài)下,各種過程的生化機(jī)制。在生物制造中,用于檢測盡可能模擬體內(nèi)條件的復(fù)雜細(xì)胞構(gòu)建體。
藥物開發(fā)的各個階段都會用到基于細(xì)胞的分析。在進(jìn)行活體動物或后期臨床試驗之前,首先要在基于細(xì)胞的體外實驗中測試候選藥物。在藥物開發(fā)過程中,藥物產(chǎn)品的“效力”也可以用基于細(xì)胞的分析進(jìn)行測試。還可用于識別對生物靶標(biāo)具有確認(rèn)活性的藥物,以及在藥物開發(fā)的早期識別有問題的藥物。因此,在藥物發(fā)現(xiàn)過程中,藥物靶標(biāo)在第二輪與疾病相關(guān)的基于細(xì)胞的分析中進(jìn)行驗證。
基于細(xì)胞的分析有哪些種類?
最常見的基于細(xì)胞的分析可分為以下主要類別:
細(xì)胞活性檢測
增殖檢測
細(xì)胞毒性檢測
活性氧檢測
細(xì)胞信號通路
細(xì)胞遷移檢測
報告基因
蛋白質(zhì)相互作用和運(yùn)輸
氧合檢測
使用酶標(biāo)儀進(jìn)行基于細(xì)胞的分析
隨著此類分析的需求越來越大,同時檢查多個參數(shù)、優(yōu)化高通量工作流程、控制大氣條件,以及降低成本和可變性的需求也在增加。酶標(biāo)儀可提供客觀和可重復(fù)的數(shù)據(jù),為復(fù)雜的分析帶來了理想的解決方案。
圖2. BMG LABTECH酶標(biāo)儀具有用于檢測基于細(xì)胞的測定的專用功能
電子書《基于微孔板的細(xì)胞分析》探討了基于細(xì)胞的分析的重要性,現(xiàn)有的各類測定方法,以及研究人員如何使用基于微孔板的細(xì)胞分析來推進(jìn)他們的研究。
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