第二屆徠卡南方科技大學(xué)

冷凍電鏡制樣培訓(xùn)班

成功舉辦

5月9-11日，由南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心與徠卡顯微系統(tǒng)（上海）貿(mào)易有限公司聯(lián)合舉辦的第二屆冷凍電鏡制樣培訓(xùn)班在南方科技大學(xué)成功舉行。來自南方科大、北大、南通大學(xué)、中科院生物物理所等單位的8名專家進(jìn)行報(bào)告交流，來自全國(guó)20余家高校、科研院所、企事業(yè)單位的技術(shù)代表參加了本次培訓(xùn)班。徠卡顯微系統(tǒng)的產(chǎn)品經(jīng)理王仁姚主持會(huì)議。

▶ 徠卡顯微系統(tǒng)中國(guó)區(qū)總監(jiān)吳長(zhǎng)發(fā)先生致辭，對(duì)南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心對(duì)本次活動(dòng)的大力協(xié)助與支持表示衷心感謝！徠卡170多年來始終致力于推動(dòng)顯微成像的技術(shù)進(jìn)步與創(chuàng)新，突破視覺極限，發(fā)現(xiàn)真相。吳長(zhǎng)發(fā)先生還對(duì)徠卡助力中國(guó)基礎(chǔ)科學(xué)與生命科學(xué)研究寄語，希望徠卡與南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心合作共贏，希望通過培訓(xùn)班交流會(huì)使電鏡技術(shù)得到進(jìn)一步提升，對(duì)未來技術(shù)發(fā)展持續(xù)貢獻(xiàn)力量。

▶ 南方科技大學(xué)/同濟(jì)大學(xué)的祝建教授介紹和舉例高壓冷凍及冷凍替代技術(shù)在電鏡制樣中的應(yīng)用。高壓冷凍可以迅速轉(zhuǎn)移樣品的熱量，降低水的冰點(diǎn)，抑制冰晶成核和冰晶生長(zhǎng)，固定較大的（200 µ）含有水分的組織樣品，保證樣品中的水分以玻璃化狀態(tài)存在的，較好地保存了細(xì)胞、組織真實(shí)的超微結(jié)構(gòu)。冷凍替代技術(shù)是高壓冷凍固定后向常溫技術(shù)過度的一種必不可少的脫水技術(shù)。其優(yōu)點(diǎn)是脫水慢，減少細(xì)胞變形和膜結(jié)構(gòu)的抽提等，在低溫—常溫的脫水過程中對(duì)樣品進(jìn)行二次固定（在常溫下維持高壓冷凍固定的結(jié)構(gòu)），最大限度地保持細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的真實(shí)性。二種技術(shù)可以很好地與常規(guī)電鏡生物樣品制備相結(jié)合，具有廣泛的應(yīng)用前景。還簡(jiǎn)要報(bào)告了高冷冷凍技術(shù)與Tokuyasu、冷凍超薄切片技術(shù)結(jié)合的優(yōu)勢(shì)。

▶ 中科院生物物理所成像中心的高級(jí)工程師孫磊介紹了原位電鏡冷凍制樣。報(bào)告了高壓冷凍、冷凍含水切片等技術(shù)原理、操作和實(shí)驗(yàn)技巧，還與大家分享了自己的制樣經(jīng)驗(yàn)和注意事項(xiàng)。

▶ 北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院公共儀器中心的高級(jí)工程師胡迎春根據(jù)自己開展Tokuyasu冷凍超薄切片免疫標(biāo)記技術(shù)的經(jīng)歷，結(jié)合實(shí)例，從原理、制樣方法、標(biāo)記步驟等方面為我們?cè)敿?xì)介紹了此技術(shù)。

▶ 來自徠卡的南希為我們報(bào)告了基于人工智能的Aivia軟件，通過構(gòu)建一個(gè)二維至五維的圖像可視化、分析與數(shù)據(jù)詮釋完整平臺(tái)，使之能夠在幾分鐘內(nèi)可靠地處理和重建高度復(fù)雜的圖像。對(duì)于深入挖掘電鏡數(shù)據(jù)有著重要的意義。

▶ 南通大學(xué)特種醫(yī)學(xué)研究院的李霞教授為我們介紹了通過冷凍電子斷層掃描對(duì)哺乳動(dòng)物完整細(xì)胞進(jìn)行高分辨率成像。報(bào)告提出了基于神經(jīng)生長(zhǎng)因子分化適合于細(xì)胞器和分子的高分辨率原位成像的PC12+的模型系統(tǒng)，還詳細(xì)介紹了一種優(yōu)化的成像系統(tǒng)，該系統(tǒng)有效地結(jié)合了CLEM、Cryo-FBI、Cryo-ET等，以接近天然細(xì)胞環(huán)境中確定細(xì)胞三維結(jié)構(gòu)。研究表明，PC12+系統(tǒng)的Cryo-ET成像為以高分辨率解剖哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的特定細(xì)胞過程提供了一種可及且高效的途徑。

▶ 南方科技大學(xué)冷凍電鏡中心技術(shù)主管馬曉旻為我們介紹了沖入式冷凍制樣技術(shù)的原理、操作注意要點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)技巧，為我們利用單顆粒冷凍電鏡技術(shù)以解析大型動(dòng)態(tài)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解決了基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)行了解疑。

▶ 徠卡共聚焦顯微鏡產(chǎn)品專家Jan Debock為我們報(bào)告了冷凍共聚焦光電聯(lián)用技術(shù)，在會(huì)上向我們展示了利用冷凍共聚焦光電聯(lián)用技術(shù)用于評(píng)估樣品質(zhì)量、安全的樣品轉(zhuǎn)移和低溫條件下的超分辨率成像，為精準(zhǔn)靶向提供了基礎(chǔ)。

▶ 徠卡的應(yīng)用專家鄧廣杰為我們介紹了激光掃描共聚焦顯微系統(tǒng)，簡(jiǎn)要介紹了一個(gè)基于模塊化設(shè)計(jì)的激光共聚焦平臺(tái)，集成多種功能，提供精確的三維成像及準(zhǔn)確的細(xì)胞結(jié)構(gòu)及動(dòng)態(tài)過程的成像，是尖端醫(yī)藥研究的理想伙伴。

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