傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加胎牛或小牛血清組成。血清是一種含有細胞生長所需生長因子的補充劑。而血清制品的定義不明確的性質(zhì)對于下游研究和治療應用是不可取的,并且存在批次間差異。同時,血清可能含有細胞生長抑制因子和毒性因子,存在潛在毒性,血清的獲取成本高。血清由于成分不完全明確,給細胞培養(yǎng)的標準化帶來困難,同時也給細胞表達目的產(chǎn)物純化等下游操作帶來困難。為了克服與血清相關(guān)的不一致性能,無血清培養(yǎng)基是絕對必要的。
細胞無血清培養(yǎng)基通常含有多種維生素、氨基酸、無機鹽、微量元素、激素、生長因子以及結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白等,部分培養(yǎng)基包含動物來源或微生物重組表達的細胞外基質(zhì)。
轉(zhuǎn)鐵蛋白對于確保足夠的細胞增殖和功能至關(guān)重要,對于絕大部分細胞系在無血清培養(yǎng)基中生長是必需的,為絕大多數(shù)無血清培養(yǎng)基必需添加物組分,通過與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TFR) 相互作用,在無血清細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮重要功能。轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三價鐵離子可逆性結(jié)合,調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)運及代謝,維持細胞內(nèi)的鐵以及鉻、錳、鎘、鎳等多種金屬離子的平衡穩(wěn)態(tài)?删S持細胞的生長和增殖,有類似于生長因子的功能。而且,轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑,可以避免細胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細胞受到傷害。
總而言之,轉(zhuǎn)鐵蛋白是無血清培養(yǎng)體系中的重要成分,研究表明飽和鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)鐵蛋白對于促進細胞生長是最有效的形態(tài)。對于雜交瘤,黏連細胞和懸浮細胞系,在細胞培養(yǎng)過程中,應保持培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針對不同的細胞系,需要選擇最合適的濃度。
近日,禾元生物推出了新品——水稻重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白。禾創(chuàng)TMOsrhTF是一種來源于水稻胚乳細胞的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白,主要用于細胞培養(yǎng)。與天然提取來源的轉(zhuǎn)鐵蛋白相比,禾創(chuàng)TMOsrhTF避免了來自于人源或動物源病毒及支原體污染的風險。
規(guī)格參數(shù)
來源:水稻種子
外觀:粉紅色至紅褐色或橘紅色粉末或晶體粉末
純度:≥95%(RP-HPLC)
pH值:6.0~8.0
內(nèi)毒素:≤1EU/mg
分子量:75kD
鐵飽和度:70%
主要優(yōu)勢
應用案例
圖1:與其他市售rhTF相比,在低血清測試體系下,禾創(chuàng)具有更佳的生物學活性
圖2:禾創(chuàng)(右)和其他市售rhTF(左)在MSC細胞無血清培養(yǎng)的細胞形態(tài)對比
圖3:與未添加TF相比,禾創(chuàng)能明顯促進細胞增殖,并且與其他市售rhTF相比,增殖效果相當。
無血清細胞培養(yǎng)系列產(chǎn)品
OsrHSA——水稻重組人血清白蛋白
OsrhFN——水稻重組人纖維連接蛋白
OsrhbFGF——水稻重組人堿性成纖維細胞生長因子
OsrhVEGF——水稻重組人血管內(nèi)皮生長因子
OsrhKGF——水稻重組人角質(zhì)細胞生長因子
rhIGF-1 LR3——重組人類胰島素生長因子-1 LR3
rhEGF——重組人表皮生長因子
如您正在進行無血清細胞培養(yǎng)相關(guān)的研究并遇到相關(guān)困擾,歡迎與禾元生物聯(lián)系。