直播預告:激光顯微切割技術(shù)與組織微區(qū)組學研究
瀏覽次數(shù):3119 發(fā)布日期:2021-11-18
來源:徠卡顯微鏡
細胞分子生物學的關(guān)鍵是制備用于生物大分子和生化學分析的細胞。在進行復雜的分子雜交等分子生物學研究中,由于非目的細胞的污染而嚴重影響了實驗結(jié)果。從新鮮組織獲得的細胞進行培養(yǎng),雖可減少污染,但由于培養(yǎng)環(huán)境不同于組織自然生長狀態(tài),培養(yǎng)細胞并不能反映它們原生的基因表達方式和分子事件。激光顯微切割技術(shù)是為了從多種細胞構(gòu)成的組織中獲得純一細胞而逐漸發(fā)展起來的。它是20世紀90年代后期,由現(xiàn)代物理學和生物學相結(jié)合的精確取材技術(shù)。激光顯微切割技術(shù)(Laser Microdissection,LMD)是一項借助激光顯微切割儀,在顯微鏡下從組織切片或涂片中分離、純化單一類型細胞群體或單個細胞的技術(shù),具有快速、準確且操作簡便的特點,該技術(shù)成功地解決了大塊分離組織中的細胞功能異質(zhì)性問題
11月24日15:00,徠卡顯微系統(tǒng)舉辦
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TIPS
激光顯微切割的應用領(lǐng)域非常廣泛,主要用于醫(yī)院病理科、腫瘤研究、疾病病理研究、植物學、細胞生物學、中藥研究、法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域。
1、
腫瘤研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學特異性的獲取腫瘤組織,制備高度單一的腫瘤樣品,后期提取DNA、RNA、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì),分別分析如基因突變(測序)、基因的表達譜(熒光定量)蛋白標志物(2D電泳、質(zhì)譜、蛋白測序等)。
2、
病理研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學特異性的獲取特定組織或細胞,分析特定組織類型的基因表達等。如腦片的海馬與皮層研究、糖尿病的病理研究、疾病的病理研究、還有一些病理診斷等。
3、
細胞生物學:特定的轉(zhuǎn)基因動物或轉(zhuǎn)基因細胞,通過熒光蛋白,特異性的識別轉(zhuǎn)基因陽性的細胞,特定獲取進行分析。
4、
植物學:利用很多植物組織有自發(fā)熒光的特性,不同的組織的自發(fā)熒光不同,分析特定組織類型的基因表達或蛋白、特定活性物質(zhì)的表達。主要應用于植物病理以及生理病理機制方面的研究,如白云杉的防御機制研究、水稻共生菌研究、柑橘病理過程研究、植物染色體研究等等。
5、
法醫(yī)學:獲取犯罪分子的體液標本,通過細胞涂片的方式,特異性的常規(guī)染色,特定的獲取精子細胞、血細胞、上皮細胞等進行DNA指紋的比對。
6、
活細胞研究:通過特定的帶膜培養(yǎng)皿,特異性的分離單細胞或細胞克隆,獲取后的細胞可以進行進一步的后續(xù)培養(yǎng)或直接分析。
7、
中藥學研究:通過激光顯微切割聯(lián)合液質(zhì)聯(lián)用進行中藥質(zhì)量的評價或特定組織生物活性物質(zhì)的評價。評價特定組織類型的基因表達。
染色體研究:利用激光顯微切割獲取單條的染色體,分析單條染色體上的基因定位或單條染色體測序等。