眾所周知,細(xì)胞復(fù)蘇是細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵步驟之一,對(duì)細(xì)胞活性和功能有重大影響。
近日,原能細(xì)胞聯(lián)合美國(guó)華盛頓大學(xué)國(guó)際醫(yī)學(xué)與生物工程院院士、國(guó)際冷凍生物學(xué)協(xié)會(huì)主席高大勇教授團(tuán)隊(duì),以人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)為研究重點(diǎn),解讀不同溫度復(fù)蘇對(duì)PBMCs活率、回收率、增殖能力和T細(xì)胞應(yīng)答能力等的影響。
其研究成果文章:“Effect of Warming Process on the Survival ofCryopreserved Human Peripheral Blood Mononuclear Cells”,發(fā)表在國(guó)際生物樣本庫(kù)協(xié)會(huì)官方雜志《Biopreservation and Biobanking》雜志上。
復(fù)蘇溫度對(duì)PBMCs活性的影響
PBMCs(人外周血單個(gè)核細(xì)胞),是目前免疫治療領(lǐng)域的高熱度細(xì)胞,也是基礎(chǔ)研究和臨床研究中非常重要的生物樣本。雖然各大細(xì)胞庫(kù)和機(jī)構(gòu)建立了完善的深低溫存儲(chǔ)體系,但對(duì)低溫保存的PBMCs復(fù)蘇的升溫過(guò)程缺乏了解和優(yōu)化,而這是全球細(xì)胞/免疫療法所亟需解決的問(wèn)題。
該研究考察了不同溫度復(fù)蘇對(duì)PBMCs活性和功能的影響。PBMCs樣本經(jīng)過(guò)慢速冷凍后,存儲(chǔ)在液氮罐中,分別在不同溫度(37℃、42℃和65℃)下復(fù)蘇。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):PBMCs樣本在65℃下進(jìn)行水浴復(fù)蘇,相比于37℃和42℃復(fù)蘇,可以顯著降低復(fù)蘇所需要的時(shí)間,從而減少其在復(fù)溫過(guò)程中因重結(jié)晶和潛在的玻璃化造成的低溫?fù)p傷,保持了PBMCs各亞群的比例不變,維持了T細(xì)胞的活化和增殖能力,縮短了復(fù)蘇時(shí)間,提高了細(xì)胞的活率和回收率以及T細(xì)胞在抗原刺激后細(xì)胞因子的分泌能力。
65℃下復(fù)蘇可顯著提高PBMCs的活率和回收率
65℃下復(fù)蘇可顯著提高PBMCs的活率和回收率
不同溫度復(fù)蘇可維持T細(xì)胞活化能力不變
65℃下復(fù)蘇可顯著提高在抗原刺激下T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的能力
靠譜的“CR-200細(xì)胞復(fù)蘇儀”
四大優(yōu)勢(shì),細(xì)胞復(fù)蘇的好幫手
智能精準(zhǔn)控溫,可靠穩(wěn)定
內(nèi)置水溫加熱程序,保障水溫精準(zhǔn)可控,為樣本提供可靠、穩(wěn)定的復(fù)蘇環(huán)境。
自動(dòng)機(jī)械作業(yè),均衡可控
自動(dòng)化純機(jī)械振動(dòng)實(shí)現(xiàn)對(duì)低溫樣本的穩(wěn)定復(fù)蘇,轉(zhuǎn)速精準(zhǔn)可控且均衡。
自動(dòng)加水,精準(zhǔn)設(shè)置不同水位
精準(zhǔn)設(shè)置不同水位,水位調(diào)節(jié)范圍:0-70mm(以底部擋板為零位)。具有自動(dòng)加水功能。當(dāng)水位低于設(shè)定值時(shí),系統(tǒng)自動(dòng)加水;反之則自動(dòng)排水。
預(yù)設(shè)+自定義,一鍵復(fù)蘇,數(shù)據(jù)可追溯
可系統(tǒng)預(yù)設(shè)+自定義各種參數(shù), 一鍵即可下達(dá)復(fù)蘇指令,操作便捷高效;且復(fù)蘇參數(shù)與樣本信息有效綁定,數(shù)據(jù)可溯源。
CR-200細(xì)胞復(fù)蘇儀,即成為本次研究中的核心角色。據(jù)團(tuán)隊(duì)人員介紹,在進(jìn)行樣本復(fù)溫實(shí)驗(yàn)中,難度最大的即是復(fù)蘇溫度精度的控制。傳統(tǒng)的手工復(fù)蘇模式,不但費(fèi)時(shí)費(fèi)力,且精確度難以保證。