目前新冠狀病毒核酸檢測主要通過PCR檢測的方法,其對試驗場地、檢驗儀器及操作人員的要求都非常高,輕微的污染就可能對結果造成偏差。另外,對檢測樣本保存條件和設備也有很嚴苛的要求。并且,由于新冠狀病毒的傳染危險性,防護準備和后續(xù)的消毒處理對整個檢測實驗來說也異常重要。Cole-Parmer作為一家專業(yè)的科研儀器、設備、耗材供應商,可以為新冠狀病毒核酸檢測提供從防護,采樣,樣本保存,檢測,消毒處理等各環(huán)節(jié)支持。相信可靠的儀器設備及防護消毒產品一定能為這場戰(zhàn)役中的檢測工作添磚加瓦。Cole-Parmer與你們一起并肩作戰(zhàn)!
Cole-Parmer相關儀器配置單
以下是新冠病毒核酸檢測實驗的具體標準介紹,可供各位老師參考,其中涉及的儀器設備和耗材,疫情期間歡迎在微信平臺直接聯(lián)系我們,或者直接聯(lián)系您當地的銷售或經銷商。
新冠病毒核酸檢測實驗
一、樣本采集
通常是在采集地——定點發(fā)熱門診進行樣本選取。樣本一般為鼻咽或口咽拭子、氣管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多(其陽性率非常高)
在采集過程中,Cole-Parmer可為您提供防護服,護目鏡,鞋套,以及手套等防護用品。
二、樣本的包裝、保存與運輸
通常采樣管需經過3層包裝,即:自封袋+運輸罐+專用運輸箱。在2-4℃進行保存,(通常保存不能超過72小時),再通過UN2814感染性物質專用運輸箱,由經過生物安全培訓的專人,全身著防護用品運送轉運箱。
三、樣本的核酸檢測
實驗地點:基因擴增實驗室
實驗條件:二級生物安全實驗室(P2負壓實驗室)
1.準備工作
實驗儀器設備:二級生物安全柜,水浴或烘箱,移液器
首先檢查運輸罐是否嚴格密閉,然后取出罐內的密封袋進行56℃下30分鐘的消毒滅活,滅活后可從密封袋內取出采樣管對采集的樣品進行分裝、混勻。
整個過程應在二級生物安全柜內進行,滅活設備應盡量選擇可放置于生物安全柜內的小型設備以減少樣品進出安全柜內的次數。
2.核酸提。ㄊ謩樱
實驗儀器設備:二級生物安全柜,移液器,振蕩器,金屬加熱器,微型離心機
首先需要依據不同品牌試劑盒的要求進行裂解液的配置。然后,采用化學試劑法對核酸樣本進行裂解,樣品裂解前需經過充分的振蕩混勻,如有必要可采用金屬加熱器于56℃下充分裂解病毒所釋放出的核酸。通過多次離心完成裂解產物的過濾收集。并且利用離心純化法對裂解后的核酸進行洗滌與回收。
3.基因擴增與檢測
實驗儀器設備:生物安全柜,PCR板離心機,實時熒光定量PCR儀
首先,需根據不同品牌試劑盒的要求將試劑盒內的不同組分(引物,dNTP,聚合酶等)按各自所需的體積量進行配置,并充分離心混勻。然后將核酸樣本依次加入至每個PCR反應管中,加蓋密閉后進行充分的混勻、離心。其次,將PCR反應管置于實時熒光定量PCR儀中,按照試劑盒說明書的要求進行擴增參數的設置后即開始檢測。
4.結果分析
通過計算出的CT值,依據檢測試劑盒廠家說明書的判斷標準進行判定,陽性、陰性或者不確定。
四、未測樣品的保存
如樣本未能及時檢測,需將樣本于-70℃或以下進行保存。Cole-parmer專為您提供保存樣品的Cole-parmer超低溫冰箱。
五、消毒處理
生物安全柜內:對臺面、儀器、外層手套進行消毒,相關垃圾投入專用醫(yī)療垃圾桶中。并開啟紫外燈照射生物安全柜,時長應不低于30分鐘。
核酸檢測實驗室內:對實驗室臺面、地面進行消毒,并開啟紫外照射燈進行空間消毒,時長應不低于30分鐘。
實驗人員:按自上而下、由內而外的順序依次摘脫三級防護穿戴,并置于專用醫(yī)療垃圾桶內。
醫(yī)療垃圾:所有與新型冠狀病毒相關的醫(yī)療垃圾需經過濕熱高壓滅菌(121℃,30分鐘)后再作為普通的醫(yī)療垃圾處理,且垃圾袋上應標注新型冠狀病毒醫(yī)療垃圾的相關信息。
注意:實驗試劑、設備等需取得醫(yī)療器械注冊證,科學研究除外。