截止2020年1月28日20時05分，新型冠狀病毒肺炎國內(nèi)確診病例為4629例，疑似6973例，治愈71例，死亡106例，死亡率低于SARS，但傳播能力可能更強，導(dǎo)致疫情傳播速度較快，給疾病防控工作帶來極大的挑戰(zhàn)。新型冠狀病毒疫情日益嚴(yán)峻，此刻的棘手問題之一就是檢測新型冠狀病毒的試劑稀缺，使得很多患者不能被第一時間確診和收治，導(dǎo)致后續(xù)治療工作推進緩慢。

1月28日晚，六家公司的新型冠狀病毒熒光PCR檢測試劑盒或基因測序系統(tǒng)獲國家藥品監(jiān)督管理局應(yīng)急審批通過，這也意味著針對本次疫情在病原檢測和確認(rèn)方面取得了重大突破，可以有力推動對疑似疫情感染患者的甄別工作。

在新型冠狀病毒肺炎診斷過程中，需要進一步解決的問題：

1、有接觸史尚無癥狀者，需要排查是否被感染；

2、熒光PCR的Ct值在37-40之間的可疑樣本，如何判定陰性還是陽性；

3、患者治療過程中監(jiān)測病毒載量的變化，用于指導(dǎo)治療；

4、病人體內(nèi)病毒轉(zhuǎn)陰的復(fù)核，用于指導(dǎo)出院。

同時，對于熒光PCR檢測試劑盒開發(fā)來說，提供準(zhǔn)確定量的參考品可以為試劑盒質(zhì)量保駕護航。

1、用于有接觸史尚無癥狀者排查：基于數(shù)字PCR的高靈敏度，檢測病毒攜帶狀況；

2、用于新型冠狀病毒疑似患者診斷復(fù)核：基于數(shù)字PCR的高靈敏度和高準(zhǔn)確性，可用于熒光PCR的Ct值在37-40之間的可疑樣本判定。

3、用于新型冠狀病毒感染患者病毒載量動態(tài)觀察：基于數(shù)字PCR的絕對定量能力，可為臨床醫(yī)生提供更為準(zhǔn)確的病原體載量信息，協(xié)助判斷病情并及時調(diào)整治療策略。

4、可用于治療后患者體內(nèi)病毒轉(zhuǎn)陰的復(fù)核，用于指導(dǎo)出院。

5、標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的制備：數(shù)字PCR是制備標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)定量的重要方法，為熒光PCR試劑盒提供可靠的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

新羿生物在國家CDC的指導(dǎo)下與清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系等單位協(xié)力合作，針對公布的新型冠狀病毒序列，正在開發(fā)數(shù)字PCR法2019-nCoV核酸檢測試劑盒，該試劑盒采用創(chuàng)新的RNA一步法逆轉(zhuǎn)錄數(shù)字PCR技術(shù)，可對樣本中的2019-nCoV進行高靈敏與準(zhǔn)確定量檢測。參考國家CDC和WHO的指南，針對2019-nCoV的多個區(qū)域進行檢測，增加檢測的特異性并減少漏檢錯檢。試劑盒內(nèi)設(shè)有內(nèi)參基因，可對采樣、提取和PCR擴增等步驟進行質(zhì)控，確保檢測過程的精準(zhǔn)可靠。

1、合規(guī)性：TD-1系統(tǒng)已取得國家醫(yī)療器械上市許可；

2、通量高：一次PCR可以完成96樣本；

3、方便性：液滴直接于8聯(lián)排管中生成，生成之后無須手工移液；PCR擴增完成后，直接放入生物芯片分析儀中，即可進行信號讀取與分析；

4、安全性：液滴擴增與檢測流程無開蓋操作，且檢測后液滴儲存于芯片內(nèi)置廢液槽中，不流經(jīng)儀器內(nèi)部，完全避免氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性結(jié)果，符合臨床對檢測安全性的要求。

新型冠狀病毒簡介

數(shù)字PCR技術(shù)是第三代PCR技術(shù)，是一種新的核酸檢測與定量方法，其將模板分子稀釋并平均分配到數(shù)萬個獨立反應(yīng)腔室后進行PCR擴增，通過PCR終點信號的“有或無”來實現(xiàn)檢測與絕對定量。

具有如下特性：

1、高靈敏度，可實現(xiàn)單分子級檢測；

2、定量準(zhǔn)確，不依賴標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)曲線；

3、高穩(wěn)定性，善于在復(fù)雜背景模板的干擾下對罕見的靶標(biāo)進行檢測，且對擴增抑制劑的耐受性好。

數(shù)字PCR的特性還體現(xiàn)在：數(shù)字PCR的檢測與定量過程受擴增效率的影響較小，因此對于新型病毒在靶標(biāo)位置可能出現(xiàn)的變異有一定耐受性，可確保檢出的穩(wěn)定性與定量的精準(zhǔn)性。同時，通過數(shù)字PCR檢測圖像的變化，提示引物探針靶標(biāo)區(qū)域可能出現(xiàn)的變異并保留樣本，會有助于后續(xù)的病毒變異研究。