細胞制備污染控制,以免導致藥物開發(fā)項目終止
細胞制備是藥物開發(fā)高效和一致性的重要基礎和初始環(huán)節(jié)。大規(guī)模細胞培養(yǎng),以及擴大培養(yǎng)中的細胞傳代,其中一大核心技術便是污染的控制。賽多利斯創(chuàng)新的細胞傳代解決方案,助您切實消除污染,簡化工藝流程并提升效率。
為加速藥物開發(fā)進程,我們優(yōu)化的產品組合可提高生產力,確保您選擇合適的候選化合物,并縮短進入臨床試驗的時間。
控制污染,以免導致藥物開發(fā)項目終止
污染源可能是細菌、酵母、霉菌、化學物質、其它生物制劑和/或細胞系交叉污染。它會影響細胞的生長、形態(tài)和行為,從而延緩您的項目進度。對任何涉及細胞培養(yǎng)的項目來說,污染是其面對的一大主要挑戰(zhàn)。
· 細菌污染
細菌是最常見的污染物。通常,自來水的細菌污染物含量是100-1000 CFU/100 mL,但美國材料與試驗協(xié)會(ASTM International)設定的標準是,在細胞培養(yǎng)時細菌污染物含量<10 CFU/100 mL。與其它污染物不同,細菌污染通常很容易檢測到,因為培養(yǎng)物會不清澈或變混濁,且/或培養(yǎng)基的顏色會發(fā)生變化,提示pH值下降。細菌在顯微鏡下也很容易看見。
盡管很容易檢測到大多數細菌污染,但它仍然會降低您的效率,畢竟您未必會第一時間注意到污染,可能還準備使用該培養(yǎng)物進行后續(xù)的化驗分析。另外,去污也是成本高昂且非常耗時的。
為了避免受到細菌污染:
水是您最重要的試劑,所以請務必使用新生成的超純水
悉心看管您的其它試劑,進行無菌過濾以消除任何污染的可能性
盡可能采用無菌技術,且僅使用無菌試劑
留意一般實驗室?guī)齑,對其進行污染監(jiān)測往往是一大挑戰(zhàn)
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· 支原體污染
支原體污染非常難以防范,因為具有柔性細胞膜的支原體較。0.15 µm-0.3 µm),且無細胞壁,因此很難通過顯微鏡檢測到。此外由于支原體尺寸較小,即使在哺乳動物細胞培養(yǎng)物內增殖到較高濃度,細胞培養(yǎng)物表面也看不到任何明顯渾濁跡象或其它變化。
在細胞系消失前,支原體對培養(yǎng)物的污染可能并不明顯。
已污染細胞的交叉污染是支原體污染的主要來源之一。消除培養(yǎng)物中的支原體污染幾乎不可能;它對大多數抗生素有抵抗力,可以在未經凍存技術處理的液氮中存活,污染儲存在同一液氮杜瓦瓶中的其它細胞。
在細胞培養(yǎng)時使用特異的支原體檢測可以提高您的效率,便于您即刻了解細胞是否受到污染,以免浪費時間、試劑和精力。使用無支原體的培養(yǎng)物可以增大您的實驗結果轉化為臨床的幾率。
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