培養(yǎng)細(xì)胞的你，是否經(jīng)常發(fā)現(xiàn)自己養(yǎng)的細(xì)胞怎么都不如文獻(xiàn)中的漂亮？

實(shí)驗(yàn)是科研的基礎(chǔ)，看似簡(jiǎn)單重復(fù)的實(shí)驗(yàn)操作，其中卻有很多技巧和細(xì)節(jié)。有的人可以快速掌握，并悟得先機(jī)，有的人則是日復(fù)一日的機(jī)械性操作。經(jīng)驗(yàn)藏著掖著不如分享出來(lái)，獨(dú)樂(lè)樂(lè)不如眾樂(lè)樂(lè)。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)中的高手，快來(lái)參加“如何把細(xì)胞養(yǎng)得更漂亮”經(jīng)驗(yàn)分享活動(dòng)吧，在分享經(jīng)驗(yàn)造福廣大科研汪的同時(shí)，還可以贏得心動(dòng)大獎(jiǎng)。

1.活動(dòng)規(guī)則

您在養(yǎng)細(xì)胞的路上總有或多或少的心得體會(huì)，分享一下如何把細(xì)胞養(yǎng)得更漂亮的小妙招，就有機(jī)會(huì)贏得心動(dòng)大獎(jiǎng)哦！您的分享將成為其他科研汪的指南針，加速細(xì)胞生物學(xué)研究進(jìn)展，造福全人類�？靵�(lái)參加這個(gè)偉大的活動(dòng)吧！

2.評(píng)選規(guī)則

賽業(yè)生物在干細(xì)胞領(lǐng)域已深耕13年，擁有國(guó)際一流的干細(xì)胞產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)。賽業(yè)生物的專家團(tuán)成員具備豐富的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，專家團(tuán)成員將根據(jù)參賽者提交內(nèi)容的詳細(xì)程度，價(jià)值高低評(píng)選出一二三等獎(jiǎng)。

3.大賽日程

投稿時(shí)間：2019年10月14日——2019年11月30日

評(píng)選時(shí)間：2019年12月1日——2019年12月6日

獲獎(jiǎng)公示：2019年12月12日

4.獎(jiǎng)項(xiàng)設(shè)置
5.主辦方聲明

1、本次大賽無(wú)參賽費(fèi)，不退稿，如參賽者所提供的作品違反任何中國(guó)現(xiàn)行法律法規(guī)或者侵犯第三方合法權(quán)益而導(dǎo)致任何爭(zhēng)議、索賠、訴訟等后果，由選手本人承擔(dān)全部法律責(zé)任，大賽主辦方賽業(yè)（廣州）生物科技有限公司不承擔(dān)任何法律責(zé)任。

2、所有參賽作品都將被視為授權(quán)大賽主辦方無(wú)償用于大賽及相關(guān)活動(dòng)的宣傳和推廣。但賽業(yè)承諾：不會(huì)私自發(fā)表文章/出售參賽作品。

3、本次大賽的最終解釋權(quán)歸賽業(yè)（廣州）生物科技有限公司，主辦方有權(quán)對(duì)參賽規(guī)則進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整結(jié)果將第一時(shí)間在大賽專題網(wǎng)站進(jìn)行通知。

6.拋轉(zhuǎn)引玉

（1）文獻(xiàn)案例尋找啟發(fā)

想要做好實(shí)驗(yàn)，好用的產(chǎn)品必不可少。賽業(yè)生物專注干細(xì)胞領(lǐng)域13年，干細(xì)胞系列產(chǎn)品因優(yōu)良的增殖和分化潛能已助力廣大科研工作者取得豐碩的科研成果，產(chǎn)品也競(jìng)相見(jiàn)諸于各大期刊，累積超過(guò)3000多篇論文引用。如何把細(xì)胞養(yǎng)得更漂亮？希望賽業(yè)客戶發(fā)表的文獻(xiàn)案例能給你一些啟發(fā)。
Sihan Lin, Wenjie Zhang, Xinquan Jiang. et al. A Magnesium-Enriched 3D Culture System that Mimics the Bone Development Microenvironment for Vascularized Bone Regeneration. Advanced Science. 2019 DOI: 10.1002/advs.201900209
Immihan Ceren Yasa, Ahmet Fatih Tabak, Oncay Yasa, Hakan Ceylan, Metin Sitti. 3D-Printed Microrobotic Transporters with Recapitulated Stem Cell Niche for Programmable and Active Cell Delivery. Advanced Functional Materials 2019, 148, 1808992. DOI: 10.1002/adfm.201808992.
Ren Xu, Alisha Yallowitz, An Qin. et al. Targeting skeletal endothelium to ameliorate bone loss. Nature Medicine 2018 DOI: 10.1038/s41591-018-0020-z

7.賽業(yè)專家們的小建議

A.復(fù)蘇小妙招

復(fù)蘇過(guò)程非常關(guān)鍵，直接影響這一株細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和傳代能力。一般而言，復(fù)蘇就是將細(xì)胞株從液氮中拿出來(lái)后立刻放入-80°C冰箱數(shù)分鐘，待液氮揮發(fā)后迅速放入37振蕩水浴，俗稱“快融”過(guò)程，這一過(guò)程就是盡快融解細(xì)胞內(nèi)的冰晶，減少對(duì)細(xì)胞的損傷。下一步就是將細(xì)胞放入培養(yǎng)基，一種方法是直接加入到培養(yǎng)基，待第二天細(xì)胞貼壁后更換新鮮的培養(yǎng)基；第二種方法是加入數(shù)倍體積的培養(yǎng)基混勻后，低速離心去掉對(duì)細(xì)胞有毒害作用的DMSO，然后把細(xì)胞接種到培養(yǎng)皿中。

B. 消化過(guò)程注意事項(xiàng)

消化過(guò)程會(huì)破壞細(xì)胞表面蛋白，從而影響細(xì)胞狀態(tài)。目前使用較多的操作是，吸走培養(yǎng)基后先用PBS洗1-2遍，然后加入胰酶進(jìn)行消化，消化到細(xì)胞變圓、少量細(xì)胞脫落即可加入培養(yǎng)基進(jìn)行終止。接下來(lái)是離心，除去上清。加入適量培養(yǎng)基將細(xì)胞吹勻，再轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿的過(guò)程也很關(guān)鍵。吹打過(guò)程中用力要適度，既要避免用力過(guò)小細(xì)胞未分散，又要避免用力過(guò)大細(xì)胞懸液沾黏管壁造成損失，還要避免吹打過(guò)多機(jī)械剪切力傷害細(xì)胞。接種細(xì)胞后要適度搖晃培養(yǎng)容器，讓細(xì)胞分布均勻。對(duì)于接種的細(xì)胞，在空間允許的條件下，盡量平放不要堆著放。此外，關(guān)培養(yǎng)箱時(shí)需盡量輕柔，有時(shí)候細(xì)胞出現(xiàn)同心圓分布的情況，就是由于關(guān)門(mén)太用力，導(dǎo)致培養(yǎng)基晃動(dòng)，形成紋路。

C. 凍存注意事項(xiàng)

一般情況下，凍存的細(xì)胞越多越好。培養(yǎng)中的細(xì)胞，建議在細(xì)胞狀態(tài)好、增殖迅速時(shí)就凍存一些，而不是養(yǎng)過(guò)很多代用不完再凍存。細(xì)胞消化離心去上清后加入細(xì)胞無(wú)蛋白非程序凍存液調(diào)整密度到1×106cell/mL，然后轉(zhuǎn)入凍存管，直接放入-80冷凍過(guò)夜，注意凍存管擺放不能過(guò)于密集，以免處于內(nèi)部位置的細(xì)胞凍存效果差。凍存完成后轉(zhuǎn)入液氮中長(zhǎng)期保存。細(xì)胞不要長(zhǎng)期保存在-80冰箱，以免活力下降。

D. 其他注意事項(xiàng)

除上述的主要操作步驟以外，常用的試劑存儲(chǔ)也很重要。FBS正常存儲(chǔ)溫度是-20，在要使用之前先放到4融化，如果放到室溫或者水浴鍋中融解，血清中的蛋白會(huì)大量析出從而影響培養(yǎng)效果。另外胰酶需盡量分裝保存，胰酶在室溫下失活很快，近期用的放在4，其他就存儲(chǔ)在-20。最后就是細(xì)胞需要及時(shí)傳代和換液，通常為2-3天一次。過(guò)于頻繁會(huì)影響細(xì)胞生成長(zhǎng)微環(huán)境，間隔過(guò)長(zhǎng)則會(huì)有營(yíng)養(yǎng)匱乏、酸堿度失衡等問(wèn)題。

8.經(jīng)驗(yàn)分享展示

2019年12月12日公布經(jīng)驗(yàn)分享及獲獎(jiǎng)名單，敬請(qǐng)期待哦