氨基糖苷類抗生素(AGs)方法包發(fā)布,攻克行業(yè)檢測(cè)難題!
你知道嗎?
我國(guó)每年約有30000兒童因藥物性致聾陷入無(wú)聲世界,其中因抗生素使用不當(dāng)致聾占了約一半。近年研究還發(fā)現(xiàn),我國(guó)藥源性耳聾患者中50%與遺傳因素有關(guān),而且屬“母系遺傳”,有家族史的患者應(yīng)禁用氨基糖苷類藥物。
氨基糖苷類抗生素藥
因價(jià)格低廉、抗菌譜廣等特點(diǎn),也應(yīng)用于獸用藥殺菌以促進(jìn)家畜生長(zhǎng)。此類抗生素由2個(gè)或多個(gè)氨基糖基團(tuán)通過(guò)糖苷和氨基環(huán)多醇鍵合而成,極性大,易溶于水,脂溶性差,人體和禽畜的胃腸道不易吸收,通過(guò)肌肉注射后大部分以原藥經(jīng)腎排泄,通過(guò)糞肥可能遷移至土壤及周圍水體中,最終進(jìn)入食物鏈,對(duì)動(dòng)物和人體健康及生態(tài)系統(tǒng)構(gòu)成潛在威脅。
氨基糖苷類抗生素藥分析檢測(cè)中的挑戰(zhàn)
由于此類化合物極性極大,常規(guī)色譜保留弱或無(wú)保留,無(wú)紫外吸收或紫外吸收弱,業(yè)內(nèi)目前也沒(méi)有特別成熟穩(wěn)定且靈敏的檢測(cè)方法。
Idea 1
對(duì)于極性化合物的檢測(cè),一般會(huì)首先想到選用親水作用液相色譜-HILIC,理論上親水性越強(qiáng)的化合物,在Hilic柱上被保留的時(shí)間越長(zhǎng)。市面上有兩款Hilic柱在極性化合物的保留能力方面頗受廣大科研工作者的青睞,但在進(jìn)行氨基糖苷類抗生素化合物分析檢測(cè)時(shí),因基質(zhì)殘留大、穩(wěn)定性差、重現(xiàn)性不好、靈敏度不高等原因而未受認(rèn)可。
Idea 2
另外一個(gè)思路是在流動(dòng)相中添加七氟丁酸(HFBA)、三氟乙酸(TFA)等離子對(duì)試劑來(lái)增強(qiáng)極性化合物的保留,GBT21323-2007《動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測(cè)定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》中,使用100mM HFBA作為流動(dòng)相,結(jié)合常規(guī)的C18柱,對(duì)這類化合物保留良好。
但是,TFA、HFBA等離子對(duì)試劑,負(fù)離子響應(yīng)極強(qiáng),進(jìn)到質(zhì)譜中極易殘留且不容易洗掉,極大地影響其他負(fù)離子化合物的檢測(cè)靈敏度,質(zhì)譜分析中是不建議使用離子對(duì)試劑的。另外,國(guó)標(biāo)方法中,進(jìn)樣量大(30μL),基質(zhì)效應(yīng)明顯,其檢測(cè)的10種氨基糖類抗生素LOQ分別為50ppb、300ppb,靈敏度不高。
檢測(cè)氨基糖苷,賽默飛有妙招!
賽默飛氨基糖苷類抗生素(AGs)檢測(cè)方法包
賽默飛采用Thermo Scientific™ Vanquish™ Binary Horizon液相系統(tǒng)與Thermo Scientific™ TSQ Fortis™三重四極桿質(zhì)譜儀聯(lián)用平臺(tái),通過(guò)在流動(dòng)相中添加TFA和HFBA等離子對(duì)試劑,搭配Thermo Scientific™ Acclaim™ AmG C18 氨基糖苷類抗生素檢測(cè)的專用柱(可耐pH范圍0.5~10),來(lái)增強(qiáng)這些極性化合物的保留,再結(jié)合賽默飛離子色譜專利的電解再生膜抑制器技術(shù),去掉TFA和HFBA離子,避免污染質(zhì)譜。
Vanquish™ Binary Horizon液相系統(tǒng)與TSQ Fortis™三重四極桿質(zhì)譜儀聯(lián)用平臺(tái)
基于這樣的理念和賽默飛獨(dú)有的技術(shù)平臺(tái),成功建立了快速檢測(cè)動(dòng)物源食品中14種氨基糖苷類抗生素殘留的方法(潮霉素、阿米卡星、安普霉素、巴龍霉素、卡那霉素、鏈霉素、奈替米星、慶大霉素、大觀霉素、雙氫鏈霉素、妥布霉素、新霉素、西索米星、依替米星)。
Acclaim™ AmG C18 氨基糖苷類抗生素檢測(cè)的專用柱
樣品前處理方式與國(guó)標(biāo)GBT21323-2007一致,21min內(nèi)獲得良好的分離(國(guó)標(biāo)35 min),靈敏度滿足國(guó)標(biāo)要求,LOQ均≤20ppb(進(jìn)樣量5μL)且連續(xù)6針的RSD均<14%,連續(xù)進(jìn)50針豬肉基質(zhì)樣品后,保留時(shí)間精密度和峰面積重復(fù)性良好,RTs偏差≤±0.03min,各化合物50ppb的峰面積重復(fù)性均<11%,本方案快速靈敏、可靠穩(wěn)定。
電解再生膜抑制器
部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)展示
14種氨基糖苷類抗生素在21min內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好保留和分離。
抑制器原理小貼士
在下圖抑制器原理圖中,兩邊是選擇性透過(guò)膜,中間為流動(dòng)相通道,通過(guò)電解水作用,在陰極產(chǎn)生OH⁻置換出流動(dòng)相中的TFA⁻和HFBA⁻,直接從陽(yáng)極排到廢液。
參考文獻(xiàn)
徐媛,陳達(dá),鐘新林,徐牛生,LC-MSMS結(jié)合離子色譜電解再生膜抑制器技術(shù)快速檢測(cè)動(dòng)物源食品中14種氨基糖苷類抗生素殘留
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