充分發(fā)掘微孔板讀板機(jī)特點(diǎn)及優(yōu)勢
——進(jìn)行更高水平的細(xì)胞因子檢測

眾所周知，目前人類許多疾病的發(fā)生過程都或多或少與細(xì)胞因子變化有關(guān)系，如腫瘤、糖尿病、神經(jīng)退行性疾病等等。細(xì)胞因子（Cytokine,CK）其實(shí)就是一類能在細(xì)胞間傳遞信息，可分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、生長因子和趨化性細(xì)胞因子等六類。

正常情況下，細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌受機(jī)體嚴(yán)格的調(diào)控，但在病理狀態(tài)下，細(xì)胞因子會(huì)出現(xiàn)異常性表達(dá)。例如細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的變化，其發(fā)生過程涉及到細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)受體接受細(xì)胞外的分子信號(hào)刺激，這些細(xì)胞外的分子信號(hào)就包括細(xì)胞因子、激素、生長因子等等，我們可以通過細(xì)胞因子的檢測來診斷某種疾病的發(fā)生。

細(xì)胞因子檢測主要基于免疫學(xué)檢測方法、生物學(xué)檢測方法和分子生物學(xué)檢測方法，三種檢測方法各有優(yōu)劣，如生物學(xué)檢測方法中利用動(dòng)物模型來檢測細(xì)胞因子的含量變化，可反映動(dòng)物體內(nèi)生物活性、參考價(jià)值大，不足之處在于成本較高、步驟繁瑣等，所以應(yīng)用較少。

目前較為被大家所常用的方法是免疫學(xué)檢測法和分子檢測法，而免疫學(xué)檢測方法更為常用。包括ELISA法、免疫斑點(diǎn)法、免疫熒光法、RIA檢測方法等，其中廣泛使用的就是ELISA法。與之配套檢測的多功能酶標(biāo)儀/檢測系統(tǒng)，因其具有光吸收、熒光、發(fā)光、熒光偏振和時(shí)間分辨熒光等多種檢測功能，我們不僅可以利用其光吸收功能針對細(xì)胞因子進(jìn)行ELISA，也可借助其熒光功能或熒光偏振功能針對微量表達(dá)的細(xì)胞因子進(jìn)行高通量、高靈敏度的檢測。市面上已相繼開發(fā)出針對不同需求不同目的應(yīng)用的ELISA試劑盒。

如Sword ELISA Boosters，是由Sword Diagnostics 公司開發(fā)出的新一代熒光ELISA 檢測技術(shù)，它可直接替代傳統(tǒng)光吸收ELISA 檢測試劑，將靈敏度提升30倍。原理是基于Sword 分子在辣根過氧化物酶 (HRP) 存在下轉(zhuǎn)化為共振拉曼活性底物，共振拉曼信號(hào)則在微孔讀板機(jī)上檢測。由于在低濃度下有著極高水平的酶/底物相互作用，產(chǎn)生出更多的共振拉曼活性分子，從而增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的性能表現(xiàn)。

傳統(tǒng)的ELISA技術(shù)雖然在靈敏度上不及熒光及熒光偏振等方法，但是新的技術(shù)的加入使得較傳統(tǒng)檢測的時(shí)間大大縮短，如Abcam公司的 SimpleStep ELISA 試劑盒，它可將 ELISA 實(shí)驗(yàn)時(shí)間從 260 分鐘減少到 90 分鐘，保證實(shí)驗(yàn)的靈敏度和重復(fù)性。

以上可見，多重檢測手段結(jié)合全新檢測技術(shù)，能讓我們在經(jīng)典方法的基礎(chǔ)上持續(xù)發(fā)掘出更靈敏、更快捷的方式，以滿足我們更高的檢測需求。