細(xì)胞凋亡(apoptosis)是一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡,在多細(xì)胞生物去除不需要的或異常的細(xì)胞中起著必要的作用。在正;罴(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。膜聯(lián)蛋白V(Annexin V) 是一種分子量為35~36KDa的鈣離子依賴型磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力特異性結(jié)合。通過熒光素或者生物素標(biāo)記Annexin V即可簡(jiǎn)單快速地直接檢測(cè)出細(xì)胞早期凋亡情況。
碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,而早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完好的,對(duì)PI有拒染性。但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI能透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染上。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。PI可以被488,532或546nm激光線激發(fā),并發(fā)出紅色熒光。
基于Abbkine強(qiáng)大的細(xì)胞平臺(tái)和先進(jìn)偶聯(lián)的技,Abbkine正式推出Annexin V細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。 Abbkine的Annexin V細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒含有Abbkine專有的AbFluor™染料標(biāo)記的Annexin V,可通過流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行鑒定和定量。同時(shí)使用AbFluorTM染料和碘化丙啶(PI)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色可以區(qū)分完整細(xì)胞,早期凋亡和晚期凋亡或壞死細(xì)胞。有關(guān)詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱下面的列表。
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 激發(fā)光與發(fā)射光 |
Annexin V-AbFluor™ 405 Apoptosis Detection kit | KTA0001 | Ex/Em = 404/431 nm |
Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection kit | KTA0002 | Ex/Em = 491/517 nm |
Annexin V-AbFluor™ 555 Apoptosis Detection kit | KTA0003 | Ex/Em = 555/565 nm |
Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection kit | KTA0004 | Ex/Em = 650/665 n |
* PI:Ex/Em = 535/617 nm (with DNA)
Abbkine使用卓越的AbFluor™ 染料,針對(duì)Annexin V研發(fā)了多種偶聯(lián)產(chǎn)物。 AbFluor™染料與其它熒光標(biāo)記染料相比,如FITC,TRITC,Cy®染料,AlexaFluor®和Dylight®標(biāo)記染料,具有相同或更好的標(biāo)記性能和熒光表現(xiàn)(熒光亮度,耐光性),特別適用于體內(nèi)成像和流式細(xì)胞術(shù)。
以Annexin V-AbFluor™ 488 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒為例:
使用喜樹堿(camptothecin)誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡(24h)。 使用Annexin V- AbFluor™ 488 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒進(jìn)行染色,可以區(qū)分早期凋亡細(xì)胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 陽性), 晚期凋亡或壞死細(xì)胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 與PI 均為陽性), 和活細(xì)胞 (未染色). |