在食品衛(wèi)生行業(yè)，大腸桿菌早已成為國(guó)際公認(rèn)的衛(wèi)生監(jiān)測(cè)指示菌。近年來(lái)，由于大腸桿菌O157:H7引起的食源性疾病疫情頻發(fā)，給人類(lèi)健康帶來(lái)嚴(yán)重危害，大腸桿菌快速檢測(cè)技術(shù)亟待發(fā)展。一般來(lái)說(shuō)， O157:H7感染劑量10個(gè)細(xì)胞就夠了，對(duì)于易感人群來(lái)說(shuō)，O157:H7感染劑量細(xì)胞數(shù)可能會(huì)更少。傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)法，通常需要花費(fèi)幾天的時(shí)間來(lái)檢定O157:H7。污染情況。例如，通過(guò)使用選擇性培養(yǎng)基，抑制背景微生物生長(zhǎng)，選擇性擴(kuò)大培養(yǎng)目標(biāo)菌株，然后通過(guò)形態(tài)學(xué)加以觀察檢定，檢測(cè)過(guò)程不僅耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，靈敏度也難以保證，并通常伴有較高的假陰性結(jié)果。對(duì)此，新的檢測(cè)技術(shù)，如ELISA，PCR，微陣列探針以及流式細(xì)胞儀檢測(cè)法等不斷更新改進(jìn)，特別是流式細(xì)胞儀檢測(cè)法因其操作簡(jiǎn)單，容易進(jìn)行快速，多參數(shù)的高通量檢測(cè)，日益?zhèn)涫荜P(guān)注。近日，美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）刊發(fā)新文，采用Apogee超靈敏納米流式分析系統(tǒng)，完善出大腸桿菌單細(xì)胞快速精準(zhǔn)檢測(cè)新方案。

    實(shí)驗(yàn)方案采用Apogee超靈敏納米流式分析系統(tǒng)，使得通常需要幾天完成的實(shí)驗(yàn)，縮短至9個(gè)小時(shí)便可完成25個(gè)菠菜基質(zhì)樣品的大腸桿菌O157:H7污染情況檢測(cè)，很好的解決了以往分析耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題；同時(shí)，文章對(duì)比實(shí)驗(yàn)顯示：納米流式分析法可明顯提高檢測(cè)靈敏度：完成大腸桿菌單細(xì)胞污染的樣品檢測(cè)，納米流式分析法比傳統(tǒng)檢測(cè)法靈敏度高出三倍以上（65% vs 20% 陽(yáng)性復(fù)檢率）。實(shí)驗(yàn)方案列有納米流式分析的所有準(zhǔn)備工作，特別指出如何通過(guò)優(yōu)化過(guò)程，省卻大量離心和濃縮過(guò)程，提高檢測(cè)效率和分析靈敏度，并且樣品制備相關(guān)優(yōu)化過(guò)程，均已得到美國(guó)FDA專(zhuān)家顧問(wèn)Thomas Hammack的認(rèn)可。而整個(gè)實(shí)驗(yàn)方案的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)在于，較好地利用Apogee納米流式分析系統(tǒng)較寬的檢測(cè)通道避免了背景大顆粒堵塞，省去了樣品離心，分離及濃縮的過(guò)程，然后結(jié)合超高信噪比的散射光和熒光檢測(cè)靈敏度，以及出廠(chǎng)優(yōu)化的細(xì)菌分析用儀器設(shè)定參數(shù)，獲得對(duì)O157:H7單細(xì)胞散射光和熒光信號(hào)的最佳檢測(cè)性能（圖1），真正意義上為食品衛(wèi)生行業(yè)大腸桿菌單細(xì)胞檢測(cè)建立了省時(shí)，省力，靈敏，精確的檢測(cè)新方案。

參考文獻(xiàn)：

Williams A J, Cooper W M, Ramsaroop S, et al. Rapid Flow Cytometry Detection of a Single Viable Escherichia coli O157: H7 Cell in Raw Spinach Using a Simplified Sample Preparation Technique[J]. Frontiers in Microbiology, 2017, 8: 1493