對(duì)二代測(cè)序來(lái)說(shuō)，裝載的樣本質(zhì)量（核酸的質(zhì)量和數(shù)量）非常重要。測(cè)序結(jié)果的成敗往往取決于你是否知道你的樣本有多少DNA（通常為ng級(jí)）。在NGS的工作流程中，從樣品中抽提核酸到開(kāi)始進(jìn)行文庫(kù)構(gòu)建；文庫(kù)構(gòu)建后期——構(gòu)建條碼庫(kù)用于擴(kuò)增；在裝載樣品到測(cè)序系統(tǒng)上測(cè)序前的所構(gòu)建文庫(kù)的定量的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)上，對(duì)擴(kuò)增后的文庫(kù)中的分子進(jìn)行精確的定量檢測(cè)，對(duì)于確保片段的質(zhì)量和高效的獲得數(shù)據(jù)是非常重要的。低估擴(kuò)增文庫(kù)中的分子數(shù)量，會(huì)導(dǎo)致混雜的信號(hào)以及難以解析的數(shù)據(jù)；相反地，高估分子的數(shù)量會(huì)降低結(jié)合模板的珠子或者DNA簇的產(chǎn)量，并且沒(méi)有充分利用測(cè)序能力。因此準(zhǔn)確對(duì)樣本定量和評(píng)價(jià)質(zhì)量決定了測(cè)序工作能否正常進(jìn)行。

    核酸的定量通常有兩種常用方法：紫外分光光度法和熒光法。這兩種方法在檢測(cè)原理、檢測(cè)靈敏度和操作方法上的大不相同，在實(shí)際運(yùn)用中需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求選擇最佳的方法來(lái)進(jìn)行核酸定量。

    此次講座將著重介紹幾種基于多功能酶標(biāo)儀系統(tǒng)的紫外分光光度法和熒光法核酸定量方案，為二代測(cè)序的樣品前處理中的高通量核酸/文庫(kù)定量提供更好的解決方案。

    近年來(lái)，二代測(cè)序（NGS）技術(shù)迅猛發(fā)展，除DNA靶向捕獲測(cè)序，RNA測(cè)序，外顯子測(cè)序，全基因組測(cè)序外，NGS的臨床應(yīng)用也拓展至產(chǎn)前診斷，腫瘤早篩及用藥指導(dǎo)等方面。鑒于這些應(yīng)用與人類(lèi)健康疾病息息相關(guān)，NGS流程中的任意步驟都不容忽視，因此，文庫(kù)的質(zhì)控至關(guān)重要。

    Qsep100全自動(dòng)核酸蛋白分析系統(tǒng)是光鼎生物科技有限公司自行研發(fā)的高通量毛細(xì)管電泳儀。Qsep100采用拋棄式預(yù)制膠卡夾，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需傳統(tǒng)的制膠，染色，點(diǎn)樣和拍照等繁瑣的步驟，具備通量靈活（1-96個(gè)樣本，任意個(gè)數(shù)），分辨率高（500bp以?xún)?nèi)，可達(dá)1-2bp），靈敏度高（pg級(jí)別），成本低的特點(diǎn)，可完美取代之前的微流控芯片原理的儀器，目前在NGS文庫(kù)質(zhì)控和提取核酸（gDNA,cf/ctDNA,RNA）質(zhì)檢中得到了廣泛的應(yīng)用，并獲得了良好的口碑和一致的認(rèn)可。

    此外，Qsep100具備其他質(zhì)控儀器所沒(méi)有的高分辨率的應(yīng)用，如SSR,AFLP等分子標(biāo)記的篩選。Qsep100是一個(gè)開(kāi)放平臺(tái)，多重試劑盒擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物均可以通過(guò)其進(jìn)行檢測(cè)分析，因此，疾控系統(tǒng)中所涉及的多重食源性致病菌檢測(cè)，致謝性大腸桿菌的檢測(cè)，也是一個(gè)非常簡(jiǎn)便，高效的應(yīng)用方向。

    本講座講座將分享Qsep100全自動(dòng)核酸蛋白分析系統(tǒng)在核酸質(zhì)控方面的應(yīng)用及優(yōu)勢(shì)。

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