MD講座:自動化高通量平臺蛋白表達體系中優(yōu)化及篩選
瀏覽次數(shù):4884 發(fā)布日期:2016-9-12
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在酶的定向進化 、組合合成生物學(xué)、微生物表面展示技術(shù)及高通量克隆構(gòu)建等技術(shù)領(lǐng)域中,如何能做到高通量快速挑選克隆以提高工作效率?QPix微生物自動化高通量篩選平臺可幫助實現(xiàn)省時省力。
本講座將介紹其在蛋白質(zhì)科學(xué)方面一種新的應(yīng)用----高通量快速篩選蛋白質(zhì)的可溶性表達條件,為進一步的生物化學(xué)、結(jié)構(gòu)學(xué)研究打下基礎(chǔ)。
工作流程:
1、運用C端融合表達二氫葉酸還原酶(DHFR)的載體系統(tǒng)高通量的篩選具有正確讀碼框的隨機PCR克隆質(zhì)粒
2、運用分段式的GFP熒光活性篩選系統(tǒng)快速分選出細(xì)胞內(nèi)有目標(biāo)蛋白可溶性表達的克隆
3、運用體外熒光篩選技術(shù)區(qū)分出可溶性蛋白表達量的高低。
圖1 運用QPix進行高通量蛋白可溶性篩選整體流程示意圖
圖2 結(jié)合CloneSelect Imager觀察熒光強弱
運用這種方法可以快速高通量判斷蛋白可溶性的強弱
日期:2016年9月22日,周四
時間:10:00-11:00(北京時間)
主講人:鄧瑋博士 國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心 規(guī);鞍踪|(zhì)制備系統(tǒng)運維主任
1999-2003年 武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院 本科
2003-2008年 中科院上海有機化學(xué)研究所 生命有機化學(xué)博士,從事天然產(chǎn)物生物合成研究
2008-2012年 美國密西根大學(xué)生化系雷鳴教授課題組從事DNA損傷修復(fù)途徑中重要復(fù)合物SOSS的功能及結(jié)構(gòu)研究,成功解析了多個重要復(fù)合物結(jié)構(gòu)并進行相關(guān)功能研究獲得重要發(fā)現(xiàn)。
2012年-至今 國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心,擔(dān)任規(guī);鞍踪|(zhì)制備系統(tǒng)主任,從事自動化高通量生物科學(xué)實驗研究工作,參與設(shè)計了多套自動化生物科研系統(tǒng),并進行相關(guān)科研應(yīng)用開發(fā)。