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Apogee納米流式細胞儀打造腎結(jié)石高通量無創(chuàng)檢測

瀏覽次數(shù):3706 發(fā)布日期:2016-3-4  來源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請注明出處
腎結(jié)石是泌尿外科最常見的的疾病之一,是一種全球性疾病。中國是世界上腎結(jié)石患者最多的國家之一。近年來,腎結(jié)石在我國的發(fā)病率有逐漸上升趨勢,大約5%-15%的人群一生中會罹患腎結(jié)石。腎結(jié)石嚴重影響患者的身體健康,如果腎結(jié)石得不到及時診斷和治療,可能會造成尿路阻塞,排尿疼痛和腎積水,嚴重者甚至可能造成尿毒癥或腫瘤。雖然現(xiàn)代醫(yī)學對腎結(jié)石的治療已經(jīng)取得了很大的進步,但是腎結(jié)石的復發(fā)率仍居高不下,10年復發(fā)率可達50%。因此,亟需新的技術(shù)能夠在腎結(jié)石早期及時準確地做出診斷,辨別腎結(jié)石的發(fā)病階段和腎結(jié)石的類型,為徹底治愈腎結(jié)石鋪墊下堅實的基礎。目前還沒有準確的無創(chuàng)檢測方法來判斷病人腎結(jié)石的類型,盡管螺旋CT掃描可以對腎結(jié)石準確定位,但是仍然無法分析出腎結(jié)石的組成成分并準確判斷腎結(jié)石的類型。
 
日前,加拿大的科學家Carson T Gavin等人利用英國超靈敏納米流式分析儀Apogee A50 micro開發(fā)出了一種無創(chuàng)傷,價格低廉,高通量的腎結(jié)石分型檢測方法,對于腎結(jié)石新生患者或者復發(fā)患者的檢查治療將有顯著的改善。Carson T Gavin等人證實,由于腎結(jié)石是在整個泌尿系統(tǒng)的湍流條件下形成的,這些腎結(jié)石會釋放出納米級的結(jié)石碎片進入尿液中。這些碎片可以利用Apogee A50 micro納米流式分析儀進行檢測。同時,用Apogee A50 micro分析鑒定的腎結(jié)石成分,也得到了巖相顯微鏡薄片分析法(腎結(jié)石組成成分檢測的高準確度分析法)的證實。在Carson T Gavin等人的研究工作中, 研究人員利用Alendronate(阿侖膦酸鈉)對羥基磷灰石具有高親和力的特性,對Alendronate標記上熒光染料(FITC或Cy5),然后對不同類型結(jié)石中的羥基磷灰石進行定量分析(圖1)。研究發(fā)現(xiàn),在這些納米結(jié)石碎片(100-1000nm)中(圖1),羥基磷灰石的含量會因結(jié)石類型的不同而不同。研究人員利用這種方法,對術(shù)前不同腎結(jié)石患者的尿液進行納米結(jié)石碎片流式計數(shù)分析,同樣明顯的區(qū)分出了不同的結(jié)石類型(圖2)。并且,這種納米流式分析法判斷腎結(jié)石類型的準確性也得到了巖相顯微鏡薄片分析法的證實(圖3)。 因此,這種無創(chuàng)傷,價格低廉,高通量的腎結(jié)石組成成分納米流式分析法,將為臨床診斷和治療提供更多無可替代的參考信息和應用價值。
 
圖1 健康人尿液添加不同類型結(jié)石碎片后的納米流式分析
Alendronate(阿侖膦酸鈉)是一種對羥基磷灰石具有高親和力的雙膦酸鹽。對 Alendronate標記上熒光染料(FITC或Cy5),可以對不同結(jié)石中羥基磷灰石進行分析。不同類型的腎結(jié)石,羥基磷灰石含量不同。圖中數(shù)據(jù)為,向健康人尿液中加入不同類型的結(jié)石碎片和Alendronate-FITC/Cy5熒光探針,超聲破碎后進行納米流式分析的結(jié)果。
 
圖2 納米流式分析腎結(jié)石患者不同類型的結(jié)石
用Alendronate-FITC標記不同類型腎結(jié)石患者的尿液,然后進行納米流式分析,計數(shù)分析不同患者尿液中羥基磷灰石納米顆粒,進而判斷結(jié)石的類型。

圖3 巖相顯微鏡薄片分析腎結(jié)石患者不同類型的結(jié)石
 
Apogee超靈敏納米流式細胞儀簡介:
超靈敏納米流式細胞儀是英國Apogee Flow廠家研發(fā),它獨有的專行光學設計使其可檢測最小80nm的小顆粒,并擁有10nm的分辨率,使其成為市場上唯一可檢測小于100nm大小顆粒的流式細胞儀。英國Apogee Flow的技術(shù)早前廣泛為美國軍方用于戰(zhàn)場上的快速微生物檢測。繼之前北京中科院微生物所和北京計量研究所引入了Apogee流式細胞儀為微生物作快速流式檢測和定量,最近上海第二軍醫(yī)大學轉(zhuǎn)化醫(yī)學中心的老師也選購了Apogee最新的A50-Micro Plus型號來進行外泌體等微顆粒研究的科研工作。而每年在美國舉行的國際胞外囊泡大會上,更有不少的科學家的研究中采用了Apogee超靈敏納米流式細胞儀來作胞外囊泡研究。由此可見這種新技術(shù)在小顆粒檢測中確是帶來不少優(yōu)勢。
 
 
參考文獻:

1.Gavin C T, Ali S N, Tailly T, et al. Novel Methods of Determining Urinary Calculi Composition:
Petrographic Thin Sectioning of Calculi and Nanoscale Flow Cytometry Urinalysis[J]. Scientific Reports,
2016, 6: 19328.

2. 田愛民, 安瑞華, 楊磊,等. 草酸鈣腎結(jié)石成因的研究現(xiàn)狀[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展, 2014, 14(27):5394-5396.

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