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禽甲型流感病毒的分離和采集

瀏覽次數(shù):1747 發(fā)布日期:2013-4-8  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

       最近幾天,H7N9的案例讓人們不禁發(fā)出“禽流感又來(lái)了!”的感嘆。

       其實(shí),禽流感跟人流感一樣,它一直都沒走,并時(shí)常在禽群里發(fā)生。而它的可怕之處不在于它一直的存在,而在于它“不斷的變異”和“從不傳染人,到禽傳人、人傳人”。

       流感病毒可分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。其中,甲型流感依據(jù)流感病毒特征可分為H×N×共135種亞型,H7N9亞型禽流感病毒是其中的一種。禽甲型流感病毒除感染禽外,還可感染人、豬、馬、水貂和海洋哺乳動(dòng)物?筛腥救说那萘鞲胁《緛喰蜑镠5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3,此次報(bào)道的為人感染H7N9禽流感病毒。

       禽甲型流感病毒顆粒呈多形性,其中球形直徑80~120nm,有囊膜;蚪M為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素(H)和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白抗原性不同,目前可分為16個(gè)H亞型(H1~H16)和9個(gè)N亞型(N1~N9)。該病毒為新型重配病毒,其內(nèi)部?jī)蓚(gè)基因片段來(lái)自禽間H7N9病毒,還有6個(gè)來(lái)源于禽間的H9N2病毒,沒有豬的基因片段。

 

       如何在人群中預(yù)防和檢測(cè)H7N9病毒不是本文目的,本文主要說(shuō)明如何借用實(shí)驗(yàn)室設(shè)備從病禽組織樣品分離毒株以及從禽舍空氣采集禽甲型流感病毒。

從病禽組織樣品分離禽甲型流感病毒:
1. 取病禽肺組織200mg,放入CK28研磨管中
2. 加入TE緩沖液1ml
3. 在Precellys24生物樣品均質(zhì)器上按照參數(shù)“6500rpm,30s, 2cycles”處理
4. 5000rpm離心取上清(禽甲型流感病毒即存在于上清中,可用于PCR檢測(cè))

precellys 24 樣品均質(zhì)器

從禽舍空氣采集禽甲型流感病毒:
1. 準(zhǔn)備Coriolis μ空氣生物采樣器及LTM套件
2. 在進(jìn)樣瓶里添加TE緩沖液并連接采樣杯
3. 設(shè)置200 L/min采樣速率采集1hr
4. H7N9病毒即存在于采樣杯液體中,可用于PCR檢測(cè)

 

Coriolis μ 空氣生物采樣器

 注:Coriolis μ空氣生物采樣器須選配LTM套件才能有效用于禽甲型流感病毒采集;采集時(shí)間不少于1hr;因病毒在溶液里超過(guò)30分鐘就會(huì)失活,建議盡快進(jìn)行下游PCR實(shí)驗(yàn);

相關(guān)公司:奧然科技有限公司
聯(lián)系電話:工作日8:50 -17:20:021-64516293,64516297,64516299;其余時(shí)段4009670570
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