德國(guó)伯托多功能酶標(biāo)儀LB940和LB942助力GPCR研究

瀏覽次數(shù)：8220　發(fā)布日期：2013-1-15　來(lái)源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

北京時(shí)間2012年10月10日，瑞典皇家科學(xué)院諾貝爾獎(jiǎng)評(píng)審委員會(huì)宣布，兩位美國(guó)科學(xué)家羅伯特·萊夫科維茨（Robert J. Lefkowitz）和布萊恩·克比爾卡（Brian K. Kobilka）因“G蛋白偶聯(lián)受體研究”獲得2012年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。羅伯特·萊夫科維茨和布萊恩·克比爾卡，及他們的研究對(duì)象“G蛋白偶聯(lián)受體”立即成為萬(wàn)眾矚目的焦點(diǎn)。

眾所周知，GPCR（G蛋白偶聯(lián)受體，G-protein coupled receptors）作為人類(lèi)基因組編碼的最大類(lèi)別膜蛋白超家族，有800多個(gè)家族成員，與人體生理代謝幾乎各個(gè)方面都密切關(guān)聯(lián)。大約一千個(gè)基因編碼這類(lèi)受體，適用于光、味道、氣味、腎上腺素、組胺、多巴胺以及復(fù)合胺等。大約一半的藥物通過(guò)G蛋白偶聯(lián)受體起作用�？梢灶A(yù)見(jiàn)，GPCR作為近年來(lái)的明星分子，肯定會(huì)繼續(xù)保持熱度并讓許多研究者投身于這個(gè)領(lǐng)域。

BRET（bioluminescence resonance energy transfer，生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移）技術(shù)是近幾年來(lái)出現(xiàn)的一種新的檢測(cè)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)，在GPCR研究中得到了廣泛應(yīng)用。它克服了傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)相互作用檢測(cè)方法對(duì)蛋白具有損害性的缺陷，并能在活細(xì)胞內(nèi)實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)開(kāi)展試驗(yàn)，大大提高了信息的準(zhǔn)確性及獲取量，可驗(yàn)證新的假說(shuō)和理論。BRET技術(shù)的原理是建立在非輻射能量轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)上，能量供體（發(fā)光酶，如海腎熒光素酶Rluc）的發(fā)射光譜和和能量受體（熒光基團(tuán)，如綠色熒光蛋白的突變體eYFP）激發(fā)光譜重疊；當(dāng)與目的蛋白融合的供體和受體的空間距離接近（d＜10nm）發(fā)生生理性相互作用時(shí)，供體和受體之間會(huì)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，即可檢測(cè)到BRET信號(hào)。BRET種類(lèi)很多，研究者可根據(jù)幾種BRET的特點(diǎn)選擇適合研究特定蛋白質(zhì)之間相互作用的BRET方法。

德國(guó)Berthold Technologies（伯托）公司生產(chǎn)的Mithras和TriStar2 LB 942微孔板式多功能分析系統(tǒng)內(nèi)置超靈敏的發(fā)光檢測(cè)模塊----配備極高靈敏度的單光子計(jì)數(shù)模式(single photon counting)光電倍增管（檢出限＜3zmol luciferase/well），專(zhuān)門(mén)優(yōu)化的光路設(shè)計(jì)，最多4個(gè)專(zhuān)利JET技術(shù)的自動(dòng)加樣器，使兩款設(shè)備特別適用于BRET實(shí)驗(yàn)分析，可使您獲得最佳的實(shí)驗(yàn)效果。目前Berthold Mithras也是全球利用BRET檢測(cè)技術(shù)發(fā)表高水平文章使用最多的設(shè)備，Mithras 和TriStar2 LB 942必將會(huì)成為您從事GPCR方面研究的得力助手。

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