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2426
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脾臟、胸腺和淋巴結(jié)中單個核細(xì)胞分離和培養(yǎng)
2017-3-16
基本方案從小鼠脾臟、胸腺和淋巴結(jié)制備單個核細(xì)胞分離和培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)材料1.RPMI-5或DMEM-5完全培養(yǎng)基。2.新鮮分離的小鼠器官:≤6周齡的小鼠胸腺;6周至6個月齡的小鼠脾臟和淋巴結(jié)。3.60mm&time
2088
次
FITC標(biāo)記抗體-Marsshall氏法
2010-10-13
FITC標(biāo)記抗體-Marsshall氏法材料:抗體球蛋白溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水、異硫氰酸熒光素、1%硫柳汞水溶液、三角燒瓶(25—50ml)、冰及冰槽(或1000ml燒杯)、電磁攪拌器
2916
次
原代細(xì)胞骨架的染色方法
2010-10-11
原代細(xì)胞骨架的染色方法微絲的顯示方法步驟:1. 用PBS液漂洗蓋片培養(yǎng)的原代細(xì)胞3次,每次30s;2. 用2%的甲醛/PBS液固定原代細(xì)胞3min;3. 用0.5%的三硝基甲苯/PBS處理3次,每次10min;4. PBS漂洗
2776
次
原代細(xì)胞富爾根(Feulgen)反應(yīng)顯示DNA
2010-10-11
原代細(xì)胞富爾根(Feulgen)反應(yīng)顯示DNA基本原理:顯示DNA的傳統(tǒng)方法是富爾根(Feulgen)反應(yīng),切片先用稀鹽酸處理,DNA經(jīng)弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間
2510
次
原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法
2010-10-9
原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法基本原理:吖啶橙(acridine orange,AO)是一種常用熒光染料,吖啶橙與原代細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA都有親和力,但有一定的特異性,即結(jié)合后發(fā)不同顏色的熒光,DNA
2194
次
原代細(xì)胞甲基綠-哌咯寧法顯示DNA和RNA
2010-10-9
原代細(xì)胞甲基綠-哌咯寧法顯示DNA和RNA基本原理:甲基綠(methyl green)和哌咯寧(pyronin)均為堿性染料,因此可與帶負(fù)電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個正電荷,易與雙鏈DNA分子結(jié)合使原代
3215
次
原代細(xì)胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法
2010-9-26
原代細(xì)胞的脂類染色方法蘇丹紅Ⅲ染色法原理: 蘇丹紅染料在脂類物質(zhì)中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,如果染料與含有脂類的試樣接觸,便有大量染料進(jìn)入脂類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)內(nèi),使這些結(jié)構(gòu)呈紅色。多
4116
次
蘇木精-伊紅(HE)染色
2010-9-26
蘇木精-伊紅(HE)染色染液制備:1. 蘇木精染液(1) 稱取0.5g蘇木精、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液;(3) 母液可長
3284
次
原代貼壁細(xì)胞吉姆薩染色法
2010-9-15
原代貼壁細(xì)胞吉姆薩染色法染液制備:1.稱取0.5g吉姆薩粉和22ml甘油;2.取少量甘油與吉姆薩粉在研缽內(nèi)充分混合,研磨至無顆粒;3.將剩余的甘油倒入研缽,于56℃保溫2h;4.加入33ml純甲醇混勻,即
3837
次
原代懸浮細(xì)胞吉姆薩染色法
2010-9-15
原代懸浮細(xì)胞吉姆薩染色法涂片法:1. 用含有5%—10%血清的等滲液將培養(yǎng)的細(xì)胞調(diào)制成密度為106個/ml的細(xì)胞懸液;2. 將1滴細(xì)胞懸液滴于一張載玻片的一端,用另一塊干凈的載玻片,按照血液涂片法將
2425
次
正常人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的長期培養(yǎng)
2010-9-13
正常人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的長期培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1. 軟骨細(xì)胞來源:20—24周自然流產(chǎn)胎兒的股骨和脛骨;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 消化液Ⅰ:
1761
次
正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的短期培養(yǎng)
2010-9-13
正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的短期培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1. 軟骨細(xì)胞來源:動物材料可選用未成年兔的膝關(guān)節(jié)、雞胚胸軟骨。人體材料可取自引產(chǎn)胎兒或成年人手術(shù)切除的軟骨標(biāo)本;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS
2570
次
正;ぜ(xì)胞原代培養(yǎng)
2010-9-8
正;ぜ(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.實(shí)驗(yàn)動物:大鼠、兔,人手術(shù)切除的關(guān)節(jié)等;2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.培養(yǎng)液:RPMI1640培養(yǎng)基,補(bǔ)加
2718
次
正常成熟破骨細(xì)胞原代培養(yǎng)
2010-9-8
正常成熟破骨細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.細(xì)胞來源:新生大鼠或兔,妊娠6個月以內(nèi)的引產(chǎn)胎兒等;2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.細(xì)胞支持物:薄
2179
次
正常人骨膜內(nèi)成骨細(xì)胞原代培養(yǎng)
2010-9-2
正常人骨膜內(nèi)成骨細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1.骨組織來源:手術(shù)切除之骨組織;2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.消化液:0.25%胰蛋白酶溶液,1mg
1742
次
正常小梁細(xì)胞原代培養(yǎng)
2010-8-25
正常小梁細(xì)胞原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1. 材料來源:人眼、兔眼或者豬眼等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 器械:小梁剪與無齒鑷等;4. 消毒液
3144
次
動物胸腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)
2010-8-11
正常動物胸腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)材料:1. 胸腺上皮細(xì)胞來源;一般取材小鼠或手術(shù)切取的兒童之胸腺;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3. 有血清培養(yǎng)液:
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