一、背景：溶解度測試的樣品收集

典型的溶解設(shè)備由6到14個容器組成，可安裝或不安裝自動取樣器。在溶解度測試期間，會在預(yù)定的時間間隔內(nèi)提取樣品，并將收集到的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較評估。這種評估使用適當(dāng)?shù)姆治黾夹g(shù)進(jìn)行，如高效液相色譜法或紫外光譜法。

最常見的取樣技術(shù)涉及移除固定體積的樣品，可能會用等量的溶液替換，也可能不替換。取樣程序可以由自動取樣器執(zhí)行，在這種情況下，非常重要的是在收集樣品進(jìn)行分析之前清洗取樣管。一些自動取樣器設(shè)計為在收集樣品前短暫保存已清洗的溶液。一旦樣品被移除，已清洗的溶液會返回到容器中。

二、實(shí)驗

在位于紐約切斯特努特嶺的Teledyne Hanson分析研究中心，進(jìn)行了多項實(shí)驗以評估不同的取樣技術(shù)及其對結(jié)果的影響。這些測試是在2022年2月到2022年3月期間進(jìn)行的，使用了從美國一家零售藥店購買的市售對乙酰氨基酚片劑，USP，批號# P119534，有效期至2022年3月。

溶解度測試是使用當(dāng)前批準(zhǔn)的USP專論進(jìn)行的。次級參考標(biāo)準(zhǔn)購自美國的Sigma-Aldrich^®品牌。根據(jù)當(dāng)前USP專論中的描述，制備了pH值為5.8的磷酸鹽緩沖液作為溶解介質(zhì)，并使用了從Sigma-Aldrich購買的化學(xué)品。

將900毫升的溶解介質(zhì)轉(zhuǎn)移到六個溶解容器中。一旦溶解介質(zhì)的溫度達(dá)到所需的37.0° ± 0.5 °C，測試就以50 RPM的速度使用裝置II（槳葉）開始。每個容器中使用一片藥片，并且多次重復(fù)實(shí)驗以檢查下面展示的四種取樣技術(shù)。

 

圖片1：帶有自動取樣器的Hanson溶解度測試儀的圖片

測試的技術(shù)

1. 手動取樣，不替換，在5、10、15、20和30時間點(diǎn)。

2. 自動取樣，不替換，在5、10、15、20和30時間點(diǎn)。

3. 自動取樣，替換，在5、10、15、20和30時間點(diǎn)。

4. 使用回收儲存器組件*，不替換，在5、10、15、20和30時間點(diǎn)。

*回收儲存器組件用于在取樣過程中暫時保存樣品。

 

圖片2：回收儲存器組件

回收儲存器是Teledyne Hanson AutoPlus™ Maximizer™ 的可選配件，它使得在多浴應(yīng)用中能夠?qū)�樣品和清洗體積返回到溶解容器中。這種方法適用于兩個帶介質(zhì)替換的溶解浴或三個不帶介質(zhì)替換的溶解浴。從溶解容器中收集的清洗體積通過樣品路徑被收集并分配到回收儲存器中，在那里暫時保存。在從溶解容器中收集預(yù)定的樣品體積后，對其進(jìn)行檢測并或分配到多填充收集架中，回收儲存器中的樣品和清洗體積（加上空氣清洗）被分配回溶解容器中。

對于這項研究，采用了以下協(xié)議：

• 在分析前，使用45 µm、25 mm尼龍注射器過濾器對收集的溶液進(jìn)行過濾。

• 在相同的溶解介質(zhì)中制備了已知濃度為0.01 mg/mL的參考標(biāo)準(zhǔn)溶液。

• 樣品溶液被稀釋了10倍，以使用10 mm光程的石英細(xì)胞在243 nm波長下獲得適當(dāng)?shù)奈�光度讀數(shù)。

• 所有樣品均使用Shimadzu UV-1800分光光度計進(jìn)行分析。

三、結(jié)果

表1：取樣技術(shù)#1結(jié)果

表2：取樣技術(shù)#2結(jié)果

表3：取樣技術(shù)#3結(jié)果

表4：取樣技術(shù)#4結(jié)果

圖片3：通過使用四種不同的取樣技術(shù)，對溶解的對乙酰氨基酚平均百分比進(jìn)行了圖形比較。

四、討論

這項研究的結(jié)果表明，測試的取樣技術(shù)對溶解的對乙酰氨基酚百分比結(jié)果沒有顯著影響。此外，是否取出并替換溶液或不替換溶液也對最終結(jié)果沒有影響。當(dāng)在采樣前從容器中暫時移除4 mL的溶解介質(zhì)，然后在采樣后將其返回到容器中時，未觀察到對最終結(jié)果的顯著影響。應(yīng)注意以下觀察：

• 用戶應(yīng)確保使用正確的計算方法（根據(jù)樣品技術(shù)）來獲得溶解百分比數(shù)據(jù)。具體來說，當(dāng)從溶解容器中移除一定量然后替換時，應(yīng)考慮稀釋效應(yīng)。

• 當(dāng)配置使用自動取樣器的取樣技術(shù)時，應(yīng)考慮管長和替換管內(nèi)溶液所需的體積。這項研究中使用了4 mL的回收體積。

• 根據(jù)USP專論，每片溶解的對乙酰氨基酚百分比的限制是不少于（NLT）Q=80%。本研究中的所有樣品都滿足這一要求。

五、結(jié)論

基于本研究獲取的數(shù)據(jù)，可以得出結(jié)論：依照美國藥典專論的規(guī)定，所測試的溶解裝置能夠產(chǎn)生準(zhǔn)確且穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)。在本研究中評估的任一樣品采集技術(shù)均可在溶解度分布測試（或單一時間點(diǎn)測試）中采用。通過適當(dāng)?shù)娜�樣技術(shù)公式，本研究獲得的數(shù)據(jù)與Teledyne Hanson自動取樣器平臺保持一致。

相較于單一時間點(diǎn)或延長釋放藥物產(chǎn)品在較長時間點(diǎn)的采樣，即時釋放藥物產(chǎn)品在早期時間點(diǎn)的樣品采集更易受變異性影響。因此，日復(fù)一日、批次之間以及分析師之間的差異均可能對即時釋放藥物產(chǎn)品的分析結(jié)果產(chǎn)生影響。本研究中評估的任一取樣技術(shù)均可便捷地應(yīng)用于當(dāng)前獲批準(zhǔn)的任何溶解度測試方法中。需要注意的是，在對現(xiàn)有取樣技術(shù)進(jìn)行修訂前，應(yīng)開展包括兩種方法的交叉研究。

本研究是在Teledyne Hanson分析研究中心進(jìn)行的，嚴(yán)格遵守了所有相關(guān)的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)操作程序，并按照美國食品和藥物管理局制定的良好生產(chǎn)規(guī)范要求進(jìn)行準(zhǔn)備。這些設(shè)施可供協(xié)助開發(fā)客戶協(xié)議。