Moxi Go II快速流式細胞儀應用于類風濕性關節(jié)炎療法的研究
瀏覽次數(shù):677 發(fā)布日期:2024-6-5
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Moxi Go II快速流式細胞儀應用于類風濕性關節(jié)炎療法的研究
類風濕性關節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種全身性的自身免疫性疾病,以炎癥細胞浸潤和滑膜細胞增生為特征。該疾病導致軟骨和骨骼損傷、關節(jié)畸形甚至殘疾,但現(xiàn)有治療藥物的毒性高、傳遞效率低,無法有效阻止其發(fā)展,因此仍以控制病情、減少致殘率和改善患者的生活質(zhì)量為主。
鐵死亡是一種鐵依賴性的新型細胞程序性死亡方式。在腫瘤、RA等炎癥微環(huán)境中,過氧化氫(H2O2)富集,可通過Fe2+介導的費托反應催化生成高毒性的•OH。•OH誘導細胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化,繼而損傷浸潤的炎癥細胞和增殖的成纖維細胞樣滑膜細胞,因此在RA治療中鐵死亡具有很大的研究潛力。
2023年12月來自江蘇大學藥學院及附屬醫(yī)院的研究團隊在《Materials Today Bio》上發(fā)表一種治療RA的新方法:用工程巨噬細胞作為載體,遞送Fe3O4和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine,SSZ),用于RA的鐵死亡和光熱療法。Fe3O4是一種磁性納米材料,可以通過外加磁場實現(xiàn)對巨噬細胞的定向操控。SSZ是一種常用的抗風濕藥物,具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用。研究者利用巨噬細胞固有的炎癥趨化性和對納米顆粒的保護作用,將Fe3O4和SSZ有效運送到RA組織中,在近紅外光(NIR)照射下產(chǎn)生熱量,破壞巨噬細胞,釋放Fe3O4納米顆粒和SSZ,誘導細胞鐵死亡。鐵死亡和光熱效應有效地破壞了駐留的炎癥細胞和增殖的滑膜,對RA有明顯的治療作用(如Fig 1所示)。
Fig 1. 巨噬細胞介導的RA鐵死亡和光熱治療藥物遞送示意圖
文章中使用熒光染料FITC和DOX標記Fe3O4納米顆粒(NPs)與巨噬細胞共孵育,使用Orflo Technologies公司的快速流式細胞儀Moxi Go II,定量分析巨噬細胞對FITC標記Fe3O4的攝取時間和濃度摸索(Fig 2),在4h和40μg/mL為最佳孵育時間和濃度;定量分析DOX標記Fe3O4 NPs的細胞攝取情況(Fig 3)。結(jié)果顯示,DOX標記的Fe3O4 NPs在巨噬細胞中的攝取能力強于對游離DOX的攝取。
Fig 2. (c) Fe3O4-FITC孵育不同時間(0.5、1、2、4 h)后巨噬細胞的流式分析
(d) FITC濃度為10、20、40、80μg/mL時,F(xiàn)e3O4-FITC孵育后巨噬細胞的流式分析
Fig 3 (a)培養(yǎng)4小時后,巨噬細胞內(nèi)化游離DOX或Fe3O4-DOX NPs的流式檢測
(b)流式細胞術定量分析游離DOX和Fe3O4-DOX的平均熒光強度
綜上所述,本文開發(fā)了一種新的基于巨噬細胞的靶向納米顆粒遞送平臺,F(xiàn)e3O4-SZZ能被巨噬細胞有效吸收,增加SZZ負載能力,為炎癥藥物遞送提供了一種策略,也證明了鐵死亡和光熱治療聯(lián)合治療在RA治療方面的巨大潛力。
Moxi GO II快速流式細胞儀
Moxi GO II快速流式細胞儀,采用庫爾特原理進行細胞計數(shù)和粒徑測量,同時采用488nm激光光源,結(jié)合兩個PMT通道,525/45nm通道和561nm/LP(或者646nm/LP,可根據(jù)需要更換),進行細胞活率、細胞凋亡、轉(zhuǎn)染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規(guī)流式檢測。儀器設計小巧輕便,無需預熱,開機即用,預設程序,觸屏操控,運行后10秒即可給出測試結(jié)果,使用后也無需清潔維護。無論是經(jīng)驗豐富的流式專家,還是初試身手的實驗小白,Moxi Go II都可以助您輕松完成實驗。
美國Orflo Technologies公司是一家非常專業(yè)的細胞分析儀器研發(fā)和制造企業(yè),擁有多項專利技術,產(chǎn)品以庫爾特原理的高精細胞計數(shù)儀和超快流式細胞儀為主。
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https://doi.org/10.1016/j.mtbio.2023.100925
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