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核酸脂質(zhì)納米粒解析——氮磷比計(jì)算

瀏覽次數(shù):1609 發(fā)布日期:2021-7-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
​在使用帶電荷的原料進(jìn)行納米粒子合成時(shí),正電荷與負(fù)電荷的數(shù)量比將影響到納米粒子的穩(wěn)定性、電位等性能。而在核酸脂質(zhì)納米粒中,正電荷通常為具有可電離銨根(N)的陽(yáng)離子脂質(zhì),而負(fù)電荷則為帶有大量磷酸根(P)的核酸分子,兩者可通過靜電吸附的方式結(jié)合在一起。因此,不合理的比例可能會(huì)導(dǎo)致粒徑過大、穩(wěn)定性差等缺陷,正確計(jì)算正電荷與負(fù)電荷的比——N/P比——就顯得尤為重要。
 
作為計(jì)算舉例,我們挑選一個(gè)常見的配方,計(jì)算的關(guān)鍵數(shù)值如下:
  •  陽(yáng)離子脂質(zhì)濃度(即N的濃度):6.25 mmol/L

  • 有機(jī)相體積(含陽(yáng)離子脂質(zhì)):1 mL

  • 核酸濃度:0.17 mg/mL

  • 水相體積(含核酸):3 mL

  •  堿基的平均分子量:330 g/mol

其中堿基的平均摩爾濃度為經(jīng)驗(yàn)的平均值,如果使用的核酸序列已知,則能夠計(jì)算得到精確的摩爾濃度。
 

在以上條件下,N的物質(zhì)的量為:

而P的物質(zhì)的量為:


因此N/P比為:


以上即為N/P比的計(jì)算過程,不過在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中,也可以先定下N/P比,再確定有機(jī)相或水相的濃度,此時(shí)只需要逆向計(jì)算即可。例如我們將N/P比改為6:1,在其他濃度不變的情況下,核酸的濃度就需要降到原有的2/3,即0.113 mg/mL。

細(xì)心的讀者可能也發(fā)現(xiàn)了,在計(jì)算的過程中并沒有明確的核酸長(zhǎng)度,這是因?yàn)楹怂岬拈L(zhǎng)度并不會(huì)影響使用到的質(zhì)量濃度。以單鏈RNA和上方計(jì)算得到的數(shù)值為例,在保持N/P比和N的物質(zhì)的量不變的情況下,所需的P的物質(zhì)的量也固定為1.545×10
-6mol,而核酸的質(zhì)量濃度與P的物質(zhì)的量關(guān)系為:



n核酸為核酸的物質(zhì)的量(摩爾數(shù)),M核酸為核酸的摩爾質(zhì)量對(duì)于1000 nt的mRNA,一個(gè)mRNA分子就有1000個(gè)陰離子;而對(duì)于2000 nt的mRNA來說,一個(gè)mRNA分子則有2000個(gè)陰離子,所需的物質(zhì)的量(摩爾數(shù))只需1000 nt的一半,但相對(duì)應(yīng)的,其核酸的摩爾質(zhì)量則會(huì)提升一倍(不考慮不同堿基的重量差異)。所以兩者相乘,最終的數(shù)值并沒有變化。因此,在使用mRNA的時(shí)候,換算成質(zhì)量濃度對(duì)于計(jì)算更為方便。

納米藥物制備系統(tǒng)


應(yīng)用范圍:


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