陽(yáng)離子脂質(zhì)濃度(即N的濃度):6.25 mmol/L
有機(jī)相體積(含陽(yáng)離子脂質(zhì)):1 mL
核酸濃度:0.17 mg/mL
水相體積(含核酸):3 mL
堿基的平均分子量:330 g/mol
在以上條件下,N的物質(zhì)的量為:
而P的物質(zhì)的量為:
因此N/P比為:
以上即為N/P比的計(jì)算過程,不過在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中,也可以先定下N/P比,再確定有機(jī)相或水相的濃度,此時(shí)只需要逆向計(jì)算即可。例如我們將N/P比改為6:1,在其他濃度不變的情況下,核酸的濃度就需要降到原有的2/3,即0.113 mg/mL。
細(xì)心的讀者可能也發(fā)現(xiàn)了,在計(jì)算的過程中并沒有明確的核酸長(zhǎng)度,這是因?yàn)楹怂岬拈L(zhǎng)度并不會(huì)影響使用到的質(zhì)量濃度。以單鏈RNA和上方計(jì)算得到的數(shù)值為例,在保持N/P比和N的物質(zhì)的量不變的情況下,所需的P的物質(zhì)的量也固定為1.545×10-6mol,而核酸的質(zhì)量濃度與P的物質(zhì)的量關(guān)系為:
n核酸為核酸的物質(zhì)的量(摩爾數(shù)),M核酸為核酸的摩爾質(zhì)量對(duì)于1000 nt的mRNA,一個(gè)mRNA分子就有1000個(gè)陰離子;而對(duì)于2000 nt的mRNA來說,一個(gè)mRNA分子則有2000個(gè)陰離子,所需的物質(zhì)的量(摩爾數(shù))只需1000 nt的一半,但相對(duì)應(yīng)的,其核酸的摩爾質(zhì)量則會(huì)提升一倍(不考慮不同堿基的重量差異)。所以兩者相乘,最終的數(shù)值并沒有變化。因此,在使用mRNA的時(shí)候,換算成質(zhì)量濃度對(duì)于計(jì)算更為方便。
納米藥物制備系統(tǒng)
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