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說說凝膠電泳

瀏覽次數(shù):5168 發(fā)布日期:2021-5-2  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

                                                            《說說凝膠電泳》
 1807年莫斯科大學(xué)教授F. F. Reuss觀察到黏土懸浮顆粒在兩個(gè)電極間緩慢遷移的現(xiàn)象;100年后該現(xiàn)象被稱為Electrophoresis 即電泳*。1937年瑞典化學(xué)家Arne Tiselius用他發(fā)明的自由電泳裝置對(duì)動(dòng)物血清進(jìn)行了一系列電泳實(shí)驗(yàn);依據(jù)不同區(qū)段折射率的差異,他判斷出馬血清里含有幾種遷移率不同的蛋白質(zhì)成分。上述成就使得他獲得了1948年的的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。后來人們意識(shí)到,只有在某種支持介質(zhì)中進(jìn)行電泳,才能夠得到被電泳分離開的不同成分。早先人們采用濾紙和土豆泥等來作為電泳分離的載體。后來才找到了從海藻里提取的“瓊脂糖凝膠”和化學(xué)合成的“聚丙烯酰胺凝膠”來作為生物大分子電泳分離的載體。前者是一種熱容性凝膠,只要將其熱溶液平鋪在水平電泳池(槽)的平床上,待冷卻到室溫后它自然就形成瓊脂糖凝膠片了。由于水平電泳池毫無設(shè)計(jì)難點(diǎn);所以本文只討論垂直片式凝膠電泳裝置。

聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺的單/雙體聚合而形成的一種網(wǎng)格狀的凝膠。氧氣阻礙丙烯酰胺類的聚合反應(yīng),因此該凝膠必須在密閉的腔體中才能夠形成。早先人們只能夠讓它在玻璃管中形成柱狀凝膠,并且進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn);后來人們才學(xué)會(huì)了讓它在垂直的玻璃灌膠夾“vertical glass gel clips”里形成凝膠片,和進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)。于是,如何才能作到不漏地往玻璃灌膠夾中灌膠?以及如何才能夠讓灌了凝膠的玻璃灌膠夾的上開口與上緩沖液容器(UBC)不漏地連通?這兩個(gè)問題就成為貫穿在垂直片式凝膠電泳術(shù)中的兩個(gè)大難題了。

大型垂直片式凝膠電泳是英國(guó)生物化學(xué)家Frederick Sanger團(tuán)隊(duì)開發(fā)出來的一種電泳技術(shù)。其灌膠夾和X光胸透底片一樣大小,由兩片超平的玻璃板和兩條極薄的側(cè)位墊條(spacer)構(gòu)成。由于很難封堵其下開口,因此它往往是斜躺著進(jìn)行灌膠,靠液體的表面張力來把凝膠形成液維系在兩片玻璃板之間而聚合成聚丙烯酰胺凝膠片的。跑電泳時(shí)它無需冷卻,反而要提高電壓產(chǎn)生熱量好讓DNA的片段們?cè)跓嶙冃誀顟B(tài)中進(jìn)行電泳分離。由于大凝膠片的中部散熱不良,而使得“電泳分離的等高線”出現(xiàn)微笑形彎曲的現(xiàn)象,嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致堿基順序的誤讀。后來的解決辦法是:在大灌膠夾的后面襯上一塊導(dǎo)熱性極佳的鎂板來拉近各處的溫度(請(qǐng)參閱US 5885433)。既由于大型者的電泳距離相當(dāng)長(zhǎng),也由于其放射性標(biāo)記的樣品的加樣量極少,而使得大型電泳能夠達(dá)到很高的電泳分辨率;表現(xiàn)為電泳后放射顯影的底片上一次可以讀出DNA中上百位的堿基順序來。這種大型垂直片式凝膠電泳技術(shù)是Sanger博士的“雙脫氧核苷酸終止法測(cè)定DNA堿基順序技術(shù)”的最后、最關(guān)鍵的一步;它在它的主人于1980年獲得第二個(gè)諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)中作出了重要的貢獻(xiàn)。不過十多年后,這種大型垂直片式凝膠電泳裝置和技術(shù),就逐漸被一些“自動(dòng)化的毛細(xì)管凝膠電泳儀”所取代了。

至今還在阿里巴巴上熱賣的那種“夾芯式垂直片式凝膠電泳池”是40多年前本人在中國(guó)科學(xué)院北京動(dòng)物研究所時(shí)的發(fā)明。它是世界上三種流行開來的中型凝膠電泳裝置中最早、也是最好的一種。它達(dá)到的指標(biāo)包括:灌膠夾16 cm平方,其凝膠片的兩側(cè)都能夠得到冷卻;其全部拆裝只需擰動(dòng)4條螺栓;而且它是第一種能夠在電泳池中進(jìn)行“原位灌膠”的電泳裝置。直到2002年美國(guó)的Owl公司才把咱們中國(guó)人使用了20多年的“用瓊脂糖凝膠在電泳池中原位封堵灌膠夾下開口的技術(shù)”寫進(jìn)了他們的US 6924775專利里;請(qǐng)參看該專利的摘要部分。
 

夾心式電泳池


可惜,那年頭中國(guó)還沒有專利法。動(dòng)物研究所拖到1979年才為我的該項(xiàng)發(fā)明開了一次成果鑒定會(huì);我留有一臺(tái)樣機(jī)作為紀(jì)念品至今。該發(fā)明流出後,使得近水樓臺(tái)的北京某儀器廠很快就因?yàn)閷⒅客懂a(chǎn)的獲利,而把他們自己給做大了。擴(kuò)大的產(chǎn)量滿足了中國(guó)科研方面40多年來的需要?上S家把心思用在省工減料上了;至今也沒有見到有一臺(tái)“夾芯式電泳池”被銷售到其它國(guó)家去。
美國(guó)Hoefer公司在1980獲得了他們的US 4224134中型凝膠電泳池專利。雖然該電泳池使用起來很不方便(每次拆裝都要擰24個(gè)螺栓和8次偏心旋扭)但是它卻相當(dāng)可靠;因而滿足了美、歐各國(guó)幾十年來需求的大部分。而另外一種流行開來的中型電泳裝置就是Bio-Rad 公司的US 4574040專利的中型電泳池了。

1984年 Peter Hoefer 老先生在他的US 4560459專利里設(shè)計(jì)了一種 “一個(gè)側(cè)壁上開有U-形上缺口的小型玻璃灌膠夾”(簡(jiǎn)稱Hoeffer式的灌膠夾)。該小小的發(fā)明一下子就解決了灌膠夾的上開口和上緩沖液容器(UBC)連通的難題(后來在買到了該公司的專利產(chǎn)品后,我們才知道Hoefer式灌膠夾里的那片帶U-形上缺口的側(cè)壁原來是用陶瓷片做的)。自從Peter發(fā)明了那種帶有U形上缺口的小型灌膠夾以后,人們只要能夠想出辦法來用兩只那樣的灌膠夾去充當(dāng)某個(gè)上緩沖液槽(UBC)所缺失的那一對(duì)側(cè)壁,于是一個(gè)“UBC/灌膠夾的復(fù)合體”就形成了;而且同時(shí)也就解決了“灌膠夾的上開口與UBC不漏地連通的難題”了。可以說,至今所有傳統(tǒng)式小型垂直片式電泳池的“主體構(gòu)件”都是以這樣的方式構(gòu)成的;當(dāng)然,其中還需要有“U形橡膠密封條”和某種驅(qū)使機(jī)構(gòu)(Urging mechanism)的參與才行。Hoefer公司早期出品,至今還在出售的ES250小型電泳池是用4個(gè)彈簧夾子來把兩個(gè)灌膠夾安裝到UBC上去的。該安裝方式的優(yōu)點(diǎn)是:彈簧夾子可以把不同厚度的灌膠夾安裝到UBC上去(行話叫作“有兼容性”)。但是那樣的夾子是沒有法子夾到灌膠夾的底邊上去,于是那里就會(huì)漏(記得當(dāng)年我們往往要用吸管來吸取一兩次下緩沖液,把它補(bǔ)充到UBC里去,否則電泳就會(huì)中途停止)。由此可見,灌膠夾的左、右、底3個(gè)邊都必須直接受到驅(qū)使機(jī)構(gòu)的擠壓,才能夠做到不漏地與UBC的靠接。

不知道是不是為了要繞開Hoefer公司上述專利里的發(fā)明點(diǎn)?或者也是為了要降低造價(jià)(在那個(gè)年代都是要用鉆石刀具來在玻璃片上挖出所需要的U形上缺口的,且其廢品率高達(dá)80%以上)而使得Bio-Rad公司沒有采用“Hoeffer式的灌膠夾”,而是采用“一高一矮的兩片玻璃壁”來構(gòu)成他們的玻璃灌膠夾(簡(jiǎn)稱Bio-Radr式的灌膠夾)的。可惜那樣一來,在Bio-Rad公司出品的所有的垂直片式電泳池里,其灌膠夾和UBC的靠接面上就都出現(xiàn)了一個(gè)臺(tái)階了;其情況請(qǐng)參見Bio-Rad的US 4574040;US 4954236 和US 5632877等專利。而常識(shí)告訴我們,帶有臺(tái)階的靠接面往往會(huì)漏;而且漏緩沖液的地方也就會(huì)漏電。

Hoefer公司所開創(chuàng)的Mini gel cassettes是4英寸寬,也就是10厘米寬。后來各公司都約定成俗,大家都采用了這同一的寬度。而小型灌膠夾的高度則通常是8至9厘米高;并且通常在其某個(gè)側(cè)壁上是開有一個(gè)U形上缺口的。由于多數(shù)公司都采用兩片1.5毫米厚的玻璃壁來構(gòu)成他們的灌膠夾,因此Mini glass gel clip的典型厚度是4毫米厚(1.5 + 1 + 1.5 = 4)。與后來興起的塑料灌膠夾相比,玻璃灌膠夾的優(yōu)點(diǎn)包括:它們和凝膠的親和性好,它們的剛性、透明度和導(dǎo)熱性也都好;而且玻璃管膠夾是可以反復(fù)使用的。不過,采用玻璃灌膠夾的最大的缺點(diǎn)是:誰要是想作到不漏地往玻璃灌膠夾中灌膠,那可是一件大費(fèi)周章的事。

由于小型電泳池們能夠承擔(dān)原來由中型電泳池所承擔(dān)的大部分實(shí)驗(yàn),所以小型池就逐漸取代了中型電泳池的地位,早已經(jīng)成為此類儀器中的主角了。此外,小型電泳池之所以能夠流行起來,那是和“不連續(xù)系統(tǒng)凝膠電泳技術(shù)”的發(fā)明分不開的。該技術(shù)早在“玻璃管凝膠電泳術(shù)”的時(shí)期就有了。其大體情況是:在分離凝膠上面鋪設(shè)一層大網(wǎng)孔的堆積凝膠“stacking gel”;樣品加在堆積凝膠上面;通電后,由于那6~7毫米高的樣品層受到上緩沖液電泳行為的推擠,而被逐步向下壓縮,最終堆積在堆積凝膠的底部而形成薄薄的一層,然后才進(jìn)入分離凝膠開始進(jìn)行電泳分離的(由于樣品緩沖液是染色的,所以其樣品層被壓縮和堆積的全過程是可見的)。請(qǐng)?jiān)O(shè)想:如果沒有不連續(xù)凝膠電泳技術(shù)的采用,而是讓6~7毫米高的樣品層中的各種成分拖拖拉拉地先后進(jìn)入分離凝膠進(jìn)行電泳的話;那么又怎么能夠指望在僅僅只有6~7厘米高的分離凝膠層中,樣品中的不同成分就能夠彼此分離開來呢?關(guān)于不連續(xù)凝膠電泳技術(shù)的原理,請(qǐng)參見有關(guān)的文獻(xiàn)。

早先,凡是要跑電泳的人,都必須首先自己往灌膠夾里灌膠;而玻璃灌膠夾的底部和兩側(cè)則處處會(huì)漏。1997年美國(guó)Novex公司開始采用機(jī)器來成批地進(jìn)行灌膠了。他們讓不同參數(shù)的聚丙烯酰胺凝膠片在一個(gè)個(gè)Disposable plastic gel clip**里形成;然后再把他們的Precast gel“預(yù)灌膠”們出售給用戶們?nèi)ヅ茈娪。其一次性灌膠夾的寬、高都是4英寸,內(nèi)腔間隔1毫米,外部輪廓7毫米厚;其下開口開在其U形上缺口對(duì)面離底邊1厘米處,而且貼有封條。Novex 公司明白:他們開創(chuàng)的預(yù)灌膠片是不可能安裝到當(dāng)時(shí)任何品牌的電泳池里去跑電泳的。所以他們同時(shí)配套出品了自己的US 6001233專利電泳池;而且為之大打廣告。經(jīng)過幾年艱苦的營(yíng)銷以后,Novex的預(yù)灌膠片在美國(guó)開始流行起來成為一種“電泳耗材”了。于是 Bio-Rad 等其他公司就坐不住了,他們也要出品他們自己系列的預(yù)灌膠了(老資格的Hoefer公司例外,該公司是由一些機(jī)械工程師組成的,他們不太精通化學(xué))。而所有其它跟進(jìn)的公司所出品的預(yù)灌膠,其塑料外殼的總厚度都必須盡可能地向4毫米厚的玻璃灌膠夾的厚度靠攏;否則豈不是就不可能安裝到他們自己的電泳池里去了嗎?那樣一來,在美國(guó)市場(chǎng)上就形成了:外殼厚度是7毫米,或者是4點(diǎn)幾毫米的兩大系列塑料殼的預(yù)灌膠片了。它們和對(duì)方所出品的電泳池是不兼容的。

后來不太久,Novex公司就開始把他們的那種次性的塑料灌膠夾的空殼也出售給用戶們,由他們自己去灌膠了。如今美國(guó)的情況大體上是:購買現(xiàn)成的預(yù)灌膠者和購買其空殼者,各占一半吧。但凡是要用梯度凝膠片來跑電泳者,還是一律要向公司去購買現(xiàn)成的梯度凝膠片的,因?yàn)樽约汗嘧⑻荻饶z十分困難(請(qǐng)參見US 5597480)。

近年來在Novex 公司出品的那類7毫米厚的塑料灌膠夾上,都采用了一種“楔形齒的加樣梳”了(請(qǐng)參見US D719277)。那樣一來,在凝膠片上端形成的那一排“楔形的加樣穴”里就能夠容納較大體積的電泳樣品了(中國(guó)南京金斯瑞生物科技公司的US 9061236專利里的那種“上厚下薄的加樣梳”也有類似的效果)。此情況對(duì)于那些濃度偏低的樣品進(jìn)行電泳,十分有利。否則無論是電泳前去一一濃縮樣品,或是電泳后采用“銀染”來補(bǔ)救;兩者都十分麻煩。

我以為在中國(guó),只有當(dāng)廠家先出品了某種有兼容能力的電泳池以后,才會(huì)有公司愿意另外也出品一種較厚的、配有楔形齒加樣梳的預(yù)灌膠以及它們的空殼。然后用戶們才有機(jī)會(huì)有:采用塑料灌膠夾來方便進(jìn)行灌膠并且跑電泳,或者干脆購買不同厚度的預(yù)灌膠來跑電泳等,4種選擇。

退休以后我設(shè)計(jì)了三種不同的小型垂直薄片凝膠電泳池,它們是US 7749367;US 8808520;US 10145817以及CN 106404872。在我設(shè)計(jì)它們時(shí),美國(guó)市場(chǎng)上已經(jīng)有了厚度不同的小型垂直片式預(yù)灌膠了。我既不想自成體系,也不自戀,更沒有閉門造車;所以我設(shè)計(jì)出來的那3種小型電泳池,它們和美國(guó)市場(chǎng)上所有那些厚度不同的小型垂直片式灌膠夾或預(yù)灌膠們都是能夠兼容的。

大體上說,中國(guó)Lab里至今所使用的小型電泳池,還是以所謂的“仿伯樂電泳池”為主。當(dāng)然采用的但是Bio-Rad式的玻璃灌膠夾。可是各個(gè)出品仿伯樂電泳池的公司如果愿意,大概只要花上¥10元/一片的代價(jià),就可以外包請(qǐng)廠家用他們的“高壓水刀”在你們小小的玻璃片上來各自切出一個(gè)漂亮的U形上缺口了。此外,只要用“擠出法”來生產(chǎn)出一批“剖面為8字形的硅橡膠軟管”就可以把那些“帶有臺(tái)階的U-形橡膠密封條”替換掉l。然后你們庫房里的那些仿Bio-Rad US 5632877專利的電泳池就變成了“超伯樂型電泳池”了。

但是,如果你們當(dāng)中有哪幾家公司是抄襲了Bio-Rad的US 6436262專利的;那么你們的那種“仿伯樂次品電泳池”里的毛病是改不掉的。因?yàn)槟抢锔揪蜎]有任何真正的擠壓機(jī)構(gòu);而是兩個(gè)“卡子”去把兩個(gè)灌膠夾“硬卡在UBC上的”。那兩個(gè)灌膠夾的底部沒有受到擠壓力,那里當(dāng)然就會(huì)漏。特別是當(dāng)用戶們采用剛性很差的塑料殼的預(yù)灌膠來跑電泳時(shí),更是如此。其檢測(cè)的辦法是:把兩兩只買來的塑料殼的預(yù)灌膠片,反向地安裝在你們的那種仿伯樂次品的電泳池的UBC上;再向所形成的“UBC/灌膠夾的復(fù)合體”中灌滿電泳緩沖液;然后把它們坐放在濾紙上;一分鐘就見分曉了。毛病出在它的主體部件上;那是改不掉的。

如今中國(guó)已經(jīng)有十來家公司在出品不同參數(shù)全套的小型垂直片式預(yù)灌膠了。而且預(yù)灌膠在中國(guó)也開始成為“電泳耗材”了。我以為中國(guó)的有關(guān)公司們應(yīng)該把心思用在開發(fā)出幾種“具有兼容能力的小型垂直片式凝膠電泳池”上。撇開上述本人設(shè)計(jì)的那三種電泳池不談;咱們是不是可以考慮把臺(tái)灣同胞設(shè)計(jì)的US 7276143專利的電泳池拿來改造一番?其本來的設(shè)計(jì)既是可以進(jìn)行原位灌膠的,也是可以采用不同厚度的灌膠夾的。但是,它那里的夾緊機(jī)構(gòu)根本就夾不緊!至于如何才能改掉其夾不緊的毛病?歡迎彼此隔空討論。

一旦有了能夠采用不同厚度灌膠夾的電泳池,咱們?cè)傧虺銎奉A(yù)灌膠的公司去訂購一批那種類似Novex較厚的預(yù)灌膠的空殼,并且配上那種楔形齒的加樣梳;作為附件或贈(zèng)品與咱們的新型電泳池一起出售給用戶們?nèi)ピ囉。我看這樣一來一下子就能夠在中國(guó)打開局面了。于是今后中國(guó)的情景將是:用戶們不忙時(shí)可以繼續(xù)使用玻璃灌膠夾自行灌膠并且跑電泳,比較忙時(shí)可以改用灌膠方便的塑料灌膠夾來灌膠和跑電泳;更忙時(shí)干脆安裝上現(xiàn)成的預(yù)灌膠片來跑電泳。(連美國(guó)都沒有出現(xiàn)過具有兼容能力的電泳池。那里所流行的電泳池只能夠采用Novex公司那種厚殼的預(yù)灌膠來跑電泳。因此美國(guó)用戶們已經(jīng)把手里的玻璃灌膠夾都丟棄了)。

往往會(huì)因?yàn)楸舜藢?duì)電泳裝置各方面的稱呼不同,而帶來討論上的困難。那么請(qǐng)看:咱們所說的電泳是不是在“垂直片式灌膠夾”里所形成的“凝膠片”中進(jìn)行的?與該灌膠夾上開口連通的那個(gè)容器是不是應(yīng)該稱之為“上緩沖液槽”?其中的電極是不是應(yīng)該稱之為“上電極”?是不是反之亦然?而那些用來在凝膠片上端形成一排“加樣穴”的小器具,是不是應(yīng)該稱之為“加樣梳”?是不是只有當(dāng)咱們把“電泳槽”和“電泳電源”相提并論時(shí),才能夠?qū)⑺鼈円黄鸱Q為“電泳儀”?否則它們兩者應(yīng)該分別稱為“電泳槽”或者“電泳電源”而已。
 

小型垂直片式凝膠電泳池的升級(jí)換代

小型垂直片式凝膠電泳池(以下簡(jiǎn)稱電泳池)的升級(jí)換代在美國(guó)的Lab里已經(jīng)進(jìn)行了十來年了。絕大多數(shù)的那些流行了二、三十年的名牌“傳統(tǒng)式的電泳池”(其中兩個(gè)灌膠夾是面對(duì)面安排的;請(qǐng)參見US 5632877 和US 6001233等)已經(jīng)被一種“非傳統(tǒng)式的凝膠電泳池”(其中兩個(gè)灌膠夾是肩并肩安排的;請(qǐng)參見US D698037 和 US D794823)所取代了。(但是我猜想,那是Novex公司擺弄出來的,所以Novex公司沒有出局;而Bio-Rad 公司則好像出局了?)

非傳統(tǒng)式電泳池之所以受到歡迎,主要是因?yàn)樗褍蓚(gè)灌膠夾的兩個(gè)U形上缺口(加樣口)都改為朝向操作者了,這樣便于加樣操作;而且還把驅(qū)使機(jī)構(gòu)改放到灌膠夾的后面去了,那樣它就不會(huì)再阻擋操作者的視線了。這些都是其優(yōu)點(diǎn)。但是,非傳統(tǒng)式電泳池必須采用兩套驅(qū)使機(jī)構(gòu)和兩套正/負(fù)電極。而且因?yàn)樗抢锊捎昧薔ovex 公司的那種驅(qū)使機(jī)構(gòu),就使得它只能夠采用Novex 式的那種7毫米厚的預(yù)灌膠來跑電泳了;而對(duì)于那些廣泛存在的,可以反復(fù)使用的4毫米厚的玻璃灌膠夾則不能夠兼容。這些缺點(diǎn)就使得非傳統(tǒng)式電泳池十來年都還沒能夠推廣到其它國(guó)家去?磥硎呛腿思夷抢“水土不服”吧。

針對(duì)上述非傳統(tǒng)式電泳池的缺點(diǎn),本人設(shè)計(jì)了一種“反傳統(tǒng)式垂直薄片凝膠電泳池”。它的美國(guó)專利號(hào):US 10145817; 它的發(fā)明名稱:“Anti-traditional vertical slice gel electrophoresis cell and a telescopic urging mechanism”。它的中國(guó)專利號(hào)***:CN 106404872。它的中文發(fā)明名稱:“一種垂直片式凝膠電泳池以及一種可伸縮的驅(qū)使機(jī)構(gòu)”。本反傳統(tǒng)式電泳池的優(yōu)點(diǎn)包括:它的兩個(gè)灌膠夾是背靠背安排的。因此當(dāng)你加樣時(shí),你所面對(duì)的那個(gè)灌膠夾的U形上缺口總是正好朝向你的;它的驅(qū)使機(jī)構(gòu)處在兩個(gè)灌膠夾之間,那就不會(huì)再遮擋操作者的視線了。與上述非傳統(tǒng)式的電泳池相比,它少用了一條白金絲電極,還少用了一套驅(qū)使機(jī)構(gòu)。這樣既降低了成本也簡(jiǎn)化了操作;而使得只需要一步操作,它就能夠讓兩個(gè)灌膠夾安裝就位了。本電泳池的另一個(gè)大優(yōu)點(diǎn)是它能夠采用各種厚度不同的灌膠夾。此優(yōu)點(diǎn)將會(huì)使得本電泳池比較容易推廣到世界各國(guó)去。此外,只要把設(shè)計(jì)的尺寸放大一些,那么制造出來的就是中型電泳池了。
 
行家說:看一個(gè)專利,先讀它的摘要。
摘要:用透明材料做成一個(gè)其內(nèi)部長(zhǎng)有一對(duì)U形門框的矩形容器,并且沿著每個(gè)U形門框都各自鑲有一條U形橡膠密封條鑲邊;于是該透明容器的內(nèi)部就被這樣一對(duì)U形門框劃分為三個(gè)隔間了;居中的那個(gè)隔間是用來安放一個(gè)驅(qū)使機(jī)構(gòu)以及兩個(gè)垂直片式灌膠夾的,當(dāng)那兩個(gè)灌膠夾受到推擠而分別抵靠在那兩條U形橡膠密封條上時(shí),所說的那三個(gè)隔間就變成三個(gè)水密隔間了;其中一左一右的那兩個(gè)水密隔間就成為本電泳池的兩個(gè)上緩沖液槽了。此外,一種可以伸縮的驅(qū)使機(jī)構(gòu)的發(fā)明和采用,就使得本電泳池能夠和市場(chǎng)上所有的那些小型垂直片式灌膠夾,或預(yù)灌膠們?nèi)寄軌蚣嫒萘,無論它們的厚度如何。
 
美國(guó)的Lab里已經(jīng)完成小型垂直片式凝膠電泳池的一步升級(jí)換代了。美國(guó)的大經(jīng)銷商Fisher等一直想在中國(guó)這個(gè)最大的市場(chǎng)里推行同樣的事情。中國(guó)的生物科技公司們正在與之博弈。我所做的事情是發(fā)明了第三種構(gòu)形的垂直片式凝膠電泳池,并且為之申請(qǐng)了兩個(gè)大國(guó)的專利保護(hù),以便為有志趣彎道超車的公司提供十幾、二十年的獨(dú)家經(jīng)營(yíng)權(quán)。至于簽約的公司有沒有齊全的加工手段并不重要,重要的是要有獨(dú)到的眼光和堅(jiān)定的行動(dòng)。因?yàn)橄耠娪境剡@類由幾個(gè)塑料部件構(gòu)成的小儀器,從其模具制造到其塑料部件的注塑成型,是完全可以外包給乙方去加工的。然后甲方只要及時(shí)地把模具和注塑件收回來鎖在自己的庫房里;每週安裝多少付電極線等,就可以出品多少臺(tái)“反傳統(tǒng)式垂直薄片凝膠電泳池”了。每臺(tái)像塑料飯盒大小的裝置能夠賣到一臺(tái)基本型膝上電腦的價(jià)位;還要怎樣?

雙灌膠夾的電泳池只可能有四種不同的構(gòu)型。它們分別是:“面對(duì)面”,“肩并肩”,“背靠背”和“以前一后”這樣4種不同的排列方式。如果我們這第三種構(gòu)型不比那前兩種好的話,就不會(huì)有人去動(dòng)腦筋把它設(shè)計(jì)出來。而那第四種構(gòu)型的電泳池是不可取的。因?yàn)橐坏┠惆褍蓚(gè)灌膠夾一前一后地排列起來了,那么那兩個(gè)灌膠夾在電流上就變成串聯(lián)的關(guān)系了。
 
發(fā)明人: 周德明       郵箱: deming98@hotmail.com         2021/05/15改稿                       
 *如今電泳在工業(yè)界的應(yīng)用主要是“電泳涂漆”。
**那可不僅僅是換換材料的一件小事。實(shí)踐者們發(fā)現(xiàn):他們采用的透明度較好的那種塑料做成的灌膠夾會(huì)釋放出(吸附的?)氧氣來干擾丙烯酰胺的聚合反應(yīng)。因而使得所形成的凝膠片既網(wǎng)孔大小不一,又不能夠很好地附著在塑料外殼上。Novel公司的解決辦法是:采用真空濺射法在灌膠夾的內(nèi)表面濺射上一層透明、惰性的氧化硅隔離層(請(qǐng)參見US 5685967)。而Bio-Rad公司的解決辦法則是:在凝膠形成液中摻入某種氧氣吸收劑來消耗掉所說的氧氣(請(qǐng)參見US 6846881)。由此可見材料方面也是大有學(xué)問的。有了上述知識(shí)以后,咱們就不難理解:為什么1971年就申請(qǐng)了美國(guó)專利的那種“完全用有機(jī)玻璃粘合而成的小型垂直片式凝膠電泳裝置”始終沒有能夠流行起來的原因了(請(qǐng)參閱US 3719580)。
***本反傳統(tǒng)式電泳池的中國(guó)專利申請(qǐng)人童階平先生已經(jīng)不幸病故。有興趣簽約的公司既可與本發(fā)明人聯(lián)系,也可以與本發(fā)明的中國(guó)專利申請(qǐng)的代理機(jī)構(gòu)《蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所》聯(lián)系。地址: 蘇州市215002; 干將西路93號(hào); 國(guó)濤商務(wù)大廈523室; 法人暨總經(jīng)理: 范晴; 手機(jī): 138 0620 1126; 郵箱: fan@szpat.com .
 


標(biāo)簽: 凝膠電泳
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