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新冠病毒研究用水系列三:如何獲得完美的核酸電泳條帶

瀏覽次數(shù):3468 發(fā)布日期:2020-5-12  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
在新冠病毒2019-nCoV的分子生物學(xué)研究中,電泳技術(shù)是一個(gè)重要的方法,主要用于核酸、蛋白質(zhì)的分離與鑒定,使用的實(shí)驗(yàn)儀器主要是電泳儀。本文,樂(lè)楓純水為大家總結(jié)了實(shí)驗(yàn)中常出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法。
 
核酸電泳用水方案

什么是核酸電泳?
核酸電泳是基因操作的核心技術(shù)之一,用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA片段。
核酸電泳最讓大家頭疼的問(wèn)題 - 異常條帶
核酸電泳實(shí)驗(yàn)中,常常會(huì)遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現(xiàn)象,究其原因,除了操作不當(dāng),電泳條件未優(yōu)化,電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強(qiáng)度影響DNA的電泳遷移率。
核酸電泳用水方案
 
  • 緩沖液離子強(qiáng)度低,電導(dǎo)率小,導(dǎo)致DNA遷移緩慢;如果多次使用,離子強(qiáng)度降低,PH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果。
  • 緩沖液離子強(qiáng)度高,則電導(dǎo)率高并明顯產(chǎn)熱,嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起凝膠熔化或DNA變性。
 
表1 核酸電泳條帶異常原因匯總及建議的解決方法
 
常見(jiàn)問(wèn)題 原因 解決方法
條帶模糊 核酸降解 使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
電泳緩沖液陳舊 建議經(jīng)常更換緩沖液
有蛋白污染 使用低有機(jī)物的超純水配置緩沖液
核酸變性 使用超純水或者緩沖液稀釋樣品
條帶黯淡 核酸濃度過(guò)低 增加上樣量
核酸降解  使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液
條帶被示蹤染料掩蓋 提高上樣量;避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料 
拖帶或涂抹帶 PCR體系或PCR程序不合適 優(yōu)化PCR體系和PCR程序
條帶扭曲 配膠的緩沖液和電泳緩沖液不同 配膠和電泳中使用同一批緩沖液
電泳時(shí)電壓過(guò)高 控制電泳時(shí)電壓不超過(guò)6V/CM
 

核酸電泳用純水要求
為了防止水中雜質(zhì)(如:核酸酶、蛋白質(zhì)、離子等)對(duì)電泳結(jié)果的影響,核酸電泳實(shí)驗(yàn)配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水:
  • 電阻率 18.2 MΩ·cm
  • TOC < 10 ppb
  • 無(wú)核酸酶和蛋白酶
  • 細(xì)菌總數(shù)< 1 CFU/mL
  • 熱原< 0.005 EU/mL
  • 0.22μm 或更低的顆粒過(guò)濾


核酸電泳用純水機(jī)推薦 

樂(lè)楓生物新一代Genie系列智能純水系統(tǒng)是一款專(zhuān)注于解決用戶(hù)需求的實(shí)驗(yàn)室純水機(jī)。Genie系列智能純水系統(tǒng)采用樂(lè)楓獨(dú)創(chuàng)的理念——無(wú)線(xiàn)連接、“1+N”模式,具有系統(tǒng)智能化、設(shè)計(jì)人性化、水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化三大特色。

 
廣州某疾控中心安裝的Genie G
廣州某疾控中心安裝的Genie G
以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)EDI純水和超純水 
荷蘭安裝的Genie U
以自來(lái)水為進(jìn)水產(chǎn)RO純水和超純水


穩(wěn)定可靠的水質(zhì)
  • 集合優(yōu)化的流路設(shè)計(jì)、技術(shù)領(lǐng)先的 EDI 模塊和樂(lè)楓獨(dú)創(chuàng)LeFil 和OrganeFil 配方填料的超純化柱,純水和超純水水質(zhì)達(dá)到或超過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室用水標(biāo)準(zhǔn);
  • 配備RephiBio 終端過(guò)濾器,可有效去除水中的熱原(內(nèi)毒素)、核酸酶、細(xì)菌等雜質(zhì),滿(mǎn)足核酸電泳實(shí)驗(yàn)用水要求。


極佳的用戶(hù)體驗(yàn)
 
可帶乳膠手套操作的純水機(jī)
 
  • 觸控屏采用高靈敏度防水屏幕,可帶乳膠手套操作
  • 采用智能IT技術(shù),取水手柄與主機(jī)可無(wú)線(xiàn)連接,取水點(diǎn)與主機(jī)的距離不受電線(xiàn)長(zhǎng)度的限制,讓您享受“無(wú)線(xiàn) · 自由”的用水體驗(yàn); 
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關(guān)于樂(lè)楓生物
    樂(lè)楓生物(Rephile Bioscience,Ltd.) 是一家專(zhuān)業(yè)從事高端水純化和實(shí)驗(yàn)室分離純化產(chǎn)品研發(fā)、設(shè)計(jì)和制造的企業(yè),為高科技生物技術(shù)和生命科學(xué)領(lǐng)域的用戶(hù)服務(wù)。樂(lè)楓公司著眼于全球發(fā)展,在中國(guó)、美國(guó)、法國(guó)、印度、南非等近20個(gè)國(guó)家建立了銷(xiāo)售機(jī)構(gòu),同時(shí)也為國(guó)際大型公司提供OEM和ODM,產(chǎn)品銷(xiāo)往包括歐美的近100個(gè)國(guó)家。成立十余年,樂(lè)楓持續(xù)投入研發(fā),創(chuàng)立出了自己的產(chǎn)品品牌RephiLe(瑞楓),推出了多個(gè)新概念產(chǎn)品- 無(wú)線(xiàn)連接的Genie系列純水系統(tǒng)和智能型大流量純水工作站Super-Genie等。目前樂(lè)楓純化柱填料配方齊全,也提供多款密理博純水系統(tǒng)的兼容耗材。 
關(guān)鍵詞:純水,超純水,實(shí)驗(yàn)室,Genie純水機(jī),核酸檢測(cè),電泳條帶,樂(lè)楓
 
關(guān)注RephiLe 企業(yè)微信:樂(lè)楓純水,關(guān)注樂(lè)楓動(dòng)態(tài)!
 
來(lái)源:上海樂(lè)楓生物科技有限公司
聯(lián)系電話(huà):021-24284200,4006 900 090
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