植物蔗糖轉(zhuǎn)化酶(INV)ELISA試劑盒
植物蔗糖轉(zhuǎn)化酶(INV)ELISA試劑盒 自備物品 ①.酶標儀(450nm) ②.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL ③.37℃恒溫箱 操作步驟 ①.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 ②.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; ③.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 ④.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 ⑤.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次 (也可用洗板機洗板)。 ⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 ⑦.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。 結(jié)果判斷植物蔗糖轉(zhuǎn)化酶(INV)ELISA試劑盒 繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。 |