為什么需要另一種新的C18相?
使用超純、超惰性硅膠具有許多公認(rèn)的優(yōu)點(diǎn),包括改善可重現(xiàn)性、壽命和色譜性能(特別是堿性分子)。
然而,由于超惰性硅膠表面不再有效促進(jìn)分離,所以用高純度硅膠制造的C18柱可以顯示出接近相同的選擇性。
因此,通過(guò)改用替代制造商的同等產(chǎn)品,一個(gè)帶頭品牌的問(wèn)題分離很可能不會(huì)得到顯著改善。
多年來(lái),經(jīng)驗(yàn)豐富的色譜學(xué)家們一直在尋求由這樣帶頭的C18色譜柱品牌展示的、具有可靠性能和可重現(xiàn)性優(yōu)點(diǎn)的相,但另外也為他們的挑戰(zhàn)性應(yīng)用提供了所需的替代選擇性。
ACE C18-AR有何不同?
C18鍵合相目前主導(dǎo)著HPLC市場(chǎng),最近的調(diào)查顯示,它們?nèi)匀徽紦?jù)了所有HPLC色譜柱銷售量的50-60%。
然而,近年來(lái),由于它們提供的替代選擇性,苯基鍵合相的使用顯著增長(zhǎng)。
據(jù)估計(jì),苯基相目前占HPLC色譜柱銷售量的10-15%,其它成為C18相之后的最大子類別。
ACE C18-AR色譜柱采用了特殊開(kāi)發(fā)的配體,將C18鏈與完整苯基官能團(tuán)結(jié)合在一起,從而將C18和苯基特征的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合到單個(gè)相中。
基于與ACE C18相同的超惰性、超純、超可重現(xiàn)性的硅膠平臺(tái),獨(dú)特的ACE C18-AR色譜柱為C18柱提供了替代選擇性。
ACE C18-AR顯示出對(duì)C18鍵合色譜柱的替代選擇性
化合物:1)4-乙酰氨基苯酚2)4-氨基苯甲酸3)4-羥基苯甲酸4)咖啡因 色譜柱:150 x 4.6mm, 3μm 流速:1.00ml/min 溫度:40°C 檢測(cè):UV, 240nm A. 0.1% v/v甲酸(溶于水中) B. 0.1% v/v甲酸(溶于乙腈中) 梯度: 時(shí)間(分鐘) %B |
“我們需要一個(gè)C18相來(lái)提供不同的色譜分析和改善的分離度- 所提供的ACE C18-AR” 某制藥公司的高級(jí)分析師
何時(shí)應(yīng)用ACE C18-AR?
由于其相似的疏水特性,ACE C18-AR色譜柱可用于通常會(huì)考慮“標(biāo)準(zhǔn)”C18色譜柱的應(yīng)用中。
然而,由于其完整的苯基官能團(tuán),ACE C18-AR還被推薦用于涉及含有芳香族官能團(tuán)的化合物的分離。
本手冊(cè)中包含的應(yīng)用證實(shí),ACE C18-AR可用于改善C18色譜柱上存在問(wèn)題的分離。
獨(dú)特的ACE C18-AR相為C18色譜柱提供了替代選擇性,但對(duì)規(guī)定為C18鍵合色譜柱的方法,保留了有效的選擇。
在許多情況下,證實(shí)不適合C18色譜柱的相同評(píng)估條件被證實(shí)適用于C18-AR色譜柱,這就避免了冗長(zhǎng)的方法再開(kāi)發(fā)。
應(yīng)用#1 - 水溶性維生素
樣品:1)吡哆醇2)對(duì)氨基苯甲酸3)泛酸4)葉酸5)氰鈷胺素6)d-生物素7)核黃素 色譜柱尺寸:150 x 4.6mm 流速:1.50ml/min 線性梯度:在15分鐘內(nèi)20%-70% B 溫度:40°C 檢測(cè):UV, 205nm |
含有水溶性維生素的該測(cè)試闡明,帶頭的C18色譜柱品牌可以提供類似的選擇性。
優(yōu)化溫度和梯度后,在ACE C18上實(shí)現(xiàn)了可接受的分離,關(guān)鍵對(duì)2,3僅基線分離。
為了提高方法的耐用性,最好嘗試并進(jìn)一步改善分離度。由于評(píng)估條件已經(jīng)最佳,我們現(xiàn)在研究改用另一種C18色譜柱品牌是否可以改善我們的關(guān)鍵對(duì)(峰2、3和5、6)的分離。
這種方法代表了目前在許多實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展的方法開(kāi)發(fā)策略。
如上述結(jié)果所示,Zorbax XDB C18和Sunfire C18色譜柱不再分離關(guān)鍵對(duì)2、3,而Luna C18(2)色譜柱顯示關(guān)鍵對(duì)2、3的分離度略有改善,但當(dāng)前關(guān)鍵對(duì)5、6 僅得到了部分分離。
然而,獨(dú)特的ACE C18-AR相可以提供與帶頭的C18色譜柱品牌完全不同的分離度。
兩個(gè)關(guān)鍵對(duì)的分離度得到顯著改善,方法的耐用性也不再是問(wèn)題。
實(shí)際上,現(xiàn)在可以進(jìn)一步優(yōu)化色譜柱尺寸和評(píng)估條件(以減少分析時(shí)間)。