關(guān)鍵詞:HS-GC,乙醇,血液
引言
近幾年來,隨著我國機(jī)動(dòng)車的保有量越來越大,駕駛機(jī)動(dòng)車所引起的交通事故逐年增多,其中酒后或醉酒駕駛引起的交通事故占了很大一部分,且多為惡性事故,為公共安全帶來隱患。為此,我國《道路交通安全法》第九十一條規(guī)定,飲酒后駕駛機(jī)動(dòng)車的,追究民事責(zé)任,而醉酒駕駛機(jī)動(dòng)車的,由公安機(jī)關(guān)交通管理部門約束至酒醒,吊銷機(jī)動(dòng)車駕駛證,依法追究刑事責(zé)任。按照標(biāo)準(zhǔn),對于認(rèn)定酒后駕駛、醉酒駕駛,并不是根據(jù)行為人的意識狀態(tài),而是根據(jù)血液中的酒精含量來確定:車輛駕駛?cè)藛T血液酒精含量大于或等于20mg/100mL,小于80mg/100m1的,屬于酒駕;血液酒精含量大于或等于80mg/100m1的,屬醉駕。目前,人體血液中酒精含量的準(zhǔn)確檢測,國際上采用頂空色譜法。隨著新《交通法》的實(shí)施,駕車者血醇含量的檢測日趨普遍,氣相色譜法定性及定量檢測血醇含量是唯一司法認(rèn)定的檢測手段。本文是基于《中華人民共和國公共安全行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》(GA/T849-2009)而開發(fā)的頂空氣相色譜法進(jìn)行的血液中的乙醇含量的檢測[1]。本方案檢測方法先進(jìn),儀器配置合理,操作簡單,結(jié)果可靠,可供各級公安部門及司法鑒定中心參考。
實(shí)驗(yàn)部分
主要儀器設(shè)備與試劑
儀器:Trace GC 1310 氣相色譜儀(ThermoFisher),Triplus300頂空自動(dòng)進(jìn)樣器。
試劑:叔丁醇, 乙醇;
樣品:人酒后血液樣品
對照液及供試液的配制
對照液:吸取10.04mL或稱取8.008g無水乙醇標(biāo)準(zhǔn)品置于100mL容量瓶中,添加純凈水至刻度,混勻,得8000mg/100mL乙醇儲(chǔ)備液,將儲(chǔ)備液逐級稀釋得到濃度為400mg/100mL的對照品儲(chǔ)備液。逐級稀釋對照儲(chǔ)備液,獲得系列濃度對照工作液,濃度分別為200mg/100mL、100mg/100mL、80mg/100mL、20mg/100mL、10mg/100mL。內(nèi)標(biāo)工作液:準(zhǔn)確稱取1.050g叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)品(含量不小于99.5%)置于500mL容量瓶中,添加純凈水至刻度,混勻,得200mg/100mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液。
待測樣品及加標(biāo)回收率樣品的制備
吸取0.50mL待測全血兩份,分別加入樣品瓶內(nèi),各加入0.10mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液,密封混勻后,待進(jìn)樣。0.494mL待測全血,平行3份,分別添加6μL濃度為2000mg/100mL的乙醇標(biāo)準(zhǔn)使用液,再分別添加0.10mL叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)使用液,按上述方法平行操作。
樣品的測定
儀器條件見表 1。
結(jié)果
方法的線性關(guān)系
取2.2項(xiàng)下的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mL,分別加入0.1mL的叔丁醇內(nèi)標(biāo)液,密封后混勻進(jìn)樣。由低濃度至高濃度依次進(jìn)樣檢測,以乙醇峰面積和內(nèi)標(biāo)叔丁醇峰面積比為縱坐標(biāo),乙醇濃度為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸。結(jié)果表明,目標(biāo)物乙醇和內(nèi)標(biāo)叔丁醇峰形良好(圖1),在10mg/100mL~200mg/100mL范圍內(nèi)乙醇呈良好線性關(guān)系(R2=0.9993,見圖2)。
方法精密度和回收率的測定
按照2.3項(xiàng)下方法制備3份加標(biāo)樣品,密封后混勻進(jìn)樣,所得樣品圖見圖3,結(jié)果見表2,回收率范圍為91.32~115.40%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD,n=3)為2.55%。回收率和精密度數(shù)據(jù)結(jié)果見表3。
樣品檢測
取2.3項(xiàng)下的兩份樣品,放入頂空中檢測血液中乙醇的含量,兩份平行樣品的結(jié)果分別為98.79mg/100mL和102.18mg/100mL,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)取平均值,則在該樣品中,其酒精含量為100.49mg/100mL,可定為醉駕。
結(jié)論
本方法根據(jù)GA/T842-2009的步驟,結(jié)合Thermofisher的Triplus 300和Trace 1310氣相色譜儀,對血液中的酒精進(jìn)行檢測,且經(jīng)過驗(yàn)證,該方法簡便、快速、準(zhǔn)確;可供各級公安部門及司法鑒定中心參考。
參考文獻(xiàn)
[1] GA/T842-2009 中華人民共和國公共行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 血液酒精含量的檢驗(yàn)方法