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YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒使用說明

瀏覽次數(shù):2262 發(fā)布日期:2017-8-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒

主要用途

YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑是一種旨在通過脂多糖親和樹脂過濾和吸附,達(dá)到去除樣品中細(xì)菌內(nèi)毒素的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌蛋白純化樣品的制備。產(chǎn)物可用于各種后續(xù)動(dòng)物和細(xì)胞生物學(xué)操作。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作方便,清除效率滿意。

 

技術(shù)背景

內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞膜的組成成分。在細(xì)菌蛋白包括融和蛋白純化過程中,細(xì)菌裂解釋放出內(nèi)毒素,伴隨著蛋白,嚴(yán)重干擾后續(xù)敏感的動(dòng)物和真核細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。YIJI蛋白樣品樹脂法去內(nèi)毒素技術(shù)融入了脂多糖特異親和樹脂,即多聚賴氨酸覆蓋(polylysine coated)和陽離子交換基團(tuán)官能化(functionalized cation exchange groups)超高交聯(lián)聚苯乙烯聚合物(hyper-crosslinked polystyrene polymers),充分有效地使樣品中的內(nèi)毒素過濾和清除達(dá)10微克/毫升,即2500至5000 EU/毫升。避免層析法的非特異性蛋白結(jié)合、免疫活性損失、和部分去內(nèi)毒素失效以及昂貴的缺點(diǎn)。

 

產(chǎn)品內(nèi)容

YIJI親和液(Reagent A)   3毫升

產(chǎn)品說明書                  1份

 

保存方式

保存在4℃冰箱里,有效保證6月

 

用戶自備

1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器

微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀親和樹脂

渦旋震蕩儀:用于混勻反應(yīng)物

平式搖蕩儀:用于混勻反應(yīng)物

 

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開始前,從-70℃冰箱里取出待測(cè)蛋白樣品,置于冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。

  • 加入1毫升蛋白懸液(1至5毫克蛋白總量)到1.5毫升離心管 
  • 小心移取150微升YIJI親和液(Reagent A)到1.5毫升離心管 
  • 蓋上蓋子,渦旋震蕩15秒
  • 平放在平式搖蕩儀上,在4℃下孵育3小時(shí)至16小時(shí),速度為100RPM
  • 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為500g(或2000RPM,例如eppendorf 5415D)
  • 小心移取上清液到新的1.5毫升離心管,避免黑色小粒
  • 即刻放進(jìn)-70℃冰箱里保存

注意事項(xiàng)

  • 本產(chǎn)品為20次操作
  • 本產(chǎn)品采用特殊樹脂法
  • 使用1毫升槍頭,將槍頭尖端部分剪去,用于移取YIJI親和液(Reagent A)
  • YIJI親和液(Reagent A)不能重復(fù)使用
  • 100毫升菌液的平均內(nèi)毒素含量可高達(dá)15000 EU(30微克),介于5000至50000 EU
  • 去內(nèi)毒素程度取決于樣品中內(nèi)毒素含量、樣品性質(zhì)(細(xì)菌來源、融合蛋白特性)和溶液狀況(pH、鹽離子強(qiáng)度等),可以通過多次處理,達(dá)到徹底清除的效果;如果效果不甚理想,建議使用YIJI蛋白樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒-YIJI30046.2
  • 經(jīng)過本產(chǎn)品處理后的產(chǎn)物含有90%的蛋白成分以及100%的免疫源性
  • 本公司提供系列內(nèi)毒素處理試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去內(nèi)毒素顯著
來源:上海一基實(shí)業(yè)有限公司
聯(lián)系電話:021-60536261
E-mail:2851717098@qq.com

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