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關(guān)于Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺的答疑

瀏覽次數(shù):4833 發(fā)布日期:2017-6-6  來源:上海鈺森生物技術(shù)有限公司

Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺

多功能的MAGPIX 只需一臺即可達到多臺儀器共同作用才能完成的效果,具有更大的靈活性和更多的選擇性。無論是單一指標還是多重指標,檢測核酸還是蛋白,MAGPIX均可為您簡化實驗,提供高超的分析性能。

蛋白研究

分子研究

細胞因子和趨化因子

傳染性疾病

基因表達

細胞信號傳導

轉(zhuǎn)錄因子

SNP分型

炎癥介質(zhì)

細胞凋亡

MicroRNA

癌癥標志物

受體-配體分析

…….

心臟標志物

神經(jīng)生物學

 

蛋白表達

…….

 

【Luminex常見問題及解答】

LUMINEX應用于哪些領(lǐng)域?  

生物醫(yī)學研究,生物標記物開發(fā),臨床檢測等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測分析。   

LUMINEX敏感性如何?

靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對于同樣的抗體對,Luminex檢測的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測靈敏度在pg級。   

對不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?  

血清、血漿是常用的樣本,每次檢測需要10ul, 每次可以檢測多個蛋白。 從各種細胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測,制備方法與ELISA、Western Blot完全一樣。   

一般可以檢測到多少基因或蛋白的表達信息?  

檢測蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。 蛋白質(zhì)檢測目前最高可以達到50個左右,基因檢測最高達500個。

如何保證檢測結(jié)果的特異性?

檢測的特異性取決于抗體高特異性。 試劑幾乎全部來源于知名度高的進口品牌,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴格的質(zhì)量控制。同時,我們的操作嚴格按照SOP進行。

客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測?

事實上,我們建議客戶自己提供試劑盒。唯一需要保證的是,客戶需要從正規(guī)渠道購買。

除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標的檢測?

可以用于基因表達,基因多態(tài)性和HLA配型分析。   

檢測周期多久?  

視待測蛋白的種類、數(shù)量和標本數(shù)量定。一般來說,檢測一組蛋白(1-50個,視蛋白種類定)和一組標本(多達360個標)需要3-4小時的操作時間及基本數(shù)據(jù)分析。但是,檢測周期也取決于公司當時的工作量。一般來說,從標本收到起,檢測應在1-2周完成;但是部分蛋白試劑盒需要收到訂單后從美國進口,檢測周期可能會延長到4-5周。  

如何判定 LUMINEX數(shù)據(jù)表達水平差異有無意義?

表達差異主要取決于標本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務。  

 LUMINEX實驗和流式細胞儀的優(yōu)劣比較?   

Luminex技術(shù)是流式細胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù), 檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內(nèi)的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。 由此可見,兩種方法應用方向有很大差別。   

報告的格式如何?  

報告以excel表格形式,包括每種蛋白在每個標本中的表達量。公司也可以為客戶提供數(shù)理統(tǒng)計分析結(jié)果。   

完成一個LUMINEX的實驗,需要的細胞的量是多少?  

至少10ul的血清、血漿,蛋白提取物, 或50-100萬細胞。  

如何控制LUMINEX檢測的質(zhì)量?

我們對每一次檢測都設定標準曲線,并設定內(nèi)參進行校正。我們會定期做儀器校正,檢測精密度和重復性實驗以確保檢測結(jié)果的可靠性。  

實驗失敗有幾種原因?  

從實驗室角度看,成敗原因包括試劑盒的質(zhì)量,待測樣品稀釋倍數(shù);待測蛋白質(zhì)低于儀器檢測底限,實驗操作程序。從客戶角度看,成敗取決于樣品制備,保存和運輸是否恰當。我們公司可以提供規(guī)范操作程序,供客戶參考。   

得到實驗的結(jié)果后, 可以進行那些研究的工作?   

可進行多方面的研究,例如:觀察不同實驗條件對待測蛋白含量的影響,可進行藥物作用靶點研究,不同人群血樣生物標記物的研究,健康評估,疾病診斷,指導治療等。   

經(jīng)過分析后,若得到幾百個感興趣的基因或蛋白,如何對這些基因做功能分類或者Pathway相關(guān)分析呢?

分析方法與其它技術(shù)平臺一樣,我們公司可以提供全套有償服務。   

如何考慮LUMINEX重復實驗的問題?

我們每次都會對使用的標準品和內(nèi)參做重復性測定,同時也建議對每份樣本進行重復2次測定。   

在進行LUMINEX實驗時,由于經(jīng)費的限制,是否可以把多個樣品進行混合以消除樣品的個體差異后再上LUMINEX檢測?  

不建議這么做。多個樣品做檢測,計算平均值和誤差才有統(tǒng)計學意義。如果多個樣品混合后測定只能算1份樣品。   

客戶是組織的樣品,準備自己提取樣品,請問樣品提取方面有沒什么技術(shù)要求?

需要采用對抗原抗體反應,或者蛋白質(zhì)抗原性沒有抑制作用的提取液進行提取,避免采用會造成蛋白質(zhì)變性的試劑,如高濃度的尿素或者鹽酸胍等。 需要能完全提取待測蛋白質(zhì),否則對結(jié)果會造成誤判。   

提取以后需要怎么保存,怎么運輸?  

建議保存于-80度。避免反復凍融?捎酶杀蛘咧辽儆帽\輸。   

LUMINEX的假陽性率是多少?   

技術(shù)性的假陽性率非常低,小于1%。生物假陽性率取決于每個蛋白的生物學特征。   

是否可以將同一癥狀的病例混合后抽提,看共性表達?

可以。混合后的樣品將被視作單一樣品進行檢測。

 

相關(guān)鏈接:

  • Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平臺簡介(多功能液相芯片檢測系統(tǒng))
  • 如何挑選luminex配套試劑盒?
  • 蛋白檢測技術(shù)(免疫印跡、免疫共沉淀、二維電泳)

來源:上海鈺森生物技術(shù)有限公司
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E-mail:zhuangxy@fudanbio.com

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