降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用

〔摘 要〕 目的 考察降糖解郁茶飲防治糖尿病抑郁癥作用。方法 雄性昆明小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、陽(yáng)性藥〔鹽酸二甲雙胍( DMBG，100 mg / kg) 、鹽酸氟西汀( FH，10 mg / kg) 聯(lián)合用藥〕和降糖解郁茶飲低、中、高劑量組( 1、2、4 g / kg) ，連續(xù)灌胃( ig) 給藥 21 d，1 次 / d，末次給藥后 1 h進(jìn)行糖水消耗實(shí)驗(yàn)( SCT) 、開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)( OFT) 、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)( FST) 和血糖測(cè)試。結(jié)果 與正常組比較，模型組小鼠血糖顯著升高、糖水偏愛顯著降低、游泳不動(dòng)時(shí)間顯著增加、OFT 運(yùn)動(dòng)時(shí)間和站立次數(shù)顯著降低( P＜0. 05 或 P＜0. 01) ; 與模型組比較，降糖解郁茶飲和 DMBG+FH 均可使以上異常指標(biāo)顯著改善，二者相比無顯著差異。結(jié)論 降糖解郁茶飲具有防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用，且與陽(yáng)性藥 DMBG+FH 作用相當(dāng)。

〔關(guān)鍵詞〕 降糖解郁茶飲; 糖尿病并發(fā)抑郁癥; 糖水偏愛; 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn); 開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

抑郁癥是糖尿病常見并發(fā)癥之一，糖尿病患者抑郁癥發(fā)病率是正常人的 3 倍。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道，糖尿病病人中 60% ～ 75%伴有抑郁情緒，其中 10% ～ 35% 為重度抑郁。就糖尿病而言，沉重的精神壓力、不良情緒不僅會(huì)使血糖升高，降低治療的依從性，還會(huì)加速心、腎等并發(fā)癥的發(fā)生，對(duì)病情的預(yù)后不利。反之，血糖控制不好，病情加重，又會(huì)導(dǎo)致病人精神痛苦、悲觀等，加重他們的抑郁癥狀。此外，重度抑郁還會(huì)引起悲觀和絕望，甚至出現(xiàn)自殘和自殺行為。本研究旨在考察降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的藥理作用，為其開發(fā)奠定前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1. 1 動(dòng)物 昆明( KM) 小鼠，雄性，SPF 級(jí)，體質(zhì)量 18 ～ 22 g，由河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供〔SCXK( 豫) 2010-0002〕。

1. 2 試藥 鹽酸二甲雙胍片( DMBG) : 上海信宜藥廠有限公司，批號(hào)48140908; 鹽酸氟西汀( FH) : 常州四藥制藥有限公司，批號(hào) 20130701; 鏈脲佐菌素( STZ) : Sigma，批號(hào) 20150225; 蔗糖( 分析純) : 天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào) 2014111061; 枸櫞酸( 分析純) : 天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào): 20150201; 氫氧化鈉( 分析純) : 天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司，批號(hào)20140723; 生 理 鹽 水: 河 南 太 龍 藥 業(yè) 股 份 有 限 公 司，批 號(hào)13012152; 血糖試紙: 江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司，魚躍;毛冬青: 經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為冬青科植物毛冬青 Ilex pubescens Hook. et Arn. 的干燥根; 合歡花: 經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為豆科植物合歡 Albizzia julibris-sin Durazz. 的干燥花序; 梔子: 經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為茜草科植物梔子 Gardenia jasminoides Ellis 的干燥成熟果實(shí); 牡丹皮: 經(jīng)本校藥學(xué)院生藥學(xué)科陳隨清教授鑒定為毛茛科植物牡丹 Paeonia suffruticosa Andr. 的干燥根皮。

1. 3 儀器 血糖儀: 江蘇魚躍醫(yī)療設(shè)備股份有限公司，魚躍710，悅準(zhǔn) TMI 型; 大小鼠開場(chǎng)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng): 上海欣軟信息科技有限公司，XR-XZ301，SuperFST強(qiáng)迫游泳視頻分析系統(tǒng)：上海欣軟信息科技有限公司，XR-XQ202; 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀: 上海愛朗儀器有限公司，EYE-LA，N-1100; TDL-40B 臺(tái) 式 離 心 機(jī): 上 海 安 亭 科 學(xué) 儀 器 廠;BS210S 型電子天平: 北京塞多利斯天平有限公司; XK96-B 快速混勻器: 姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司; FW-100 高速萬能粉碎機(jī): 北京中興偉業(yè)儀器有限公司。

1. 4 方法

1. 4. 1 降糖解郁茶飲制備 將降糖解郁茶用 50 倍( W / V = 1 ∶50) 開水浸泡 6 次，每次 5 min，合并每次浸泡液( 用離心機(jī)分離上清液，4 000 r/min，離心 10 min) ，減壓回收水，使藥液濃度以生藥計(jì)含降糖解郁茶 1 g/ml。

1. 4. 2 動(dòng)物處理及血糖測(cè)試 用 0. 1 mol / L 枸櫞酸鈉緩沖液( p H4. 2) 配制 STZ 注射液，小鼠在禁食 16 h 后( 不禁水) 一次性腹腔注射( ip) STZ( 150 mg/kg) 造糖尿病模型; 造模后的小鼠經(jīng)過 72 h 的自由飲食后，于尾靜脈取血用血糖儀測(cè)定血糖值( 血糖＞11. 1 mmol/L 為糖尿病模型制作成功) 。篩選血糖＞11. 1 mmol / L 的小鼠再予慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激( CUMS)，每天隨機(jī)給予一種應(yīng)激。CUMS主要包括夾尾 3 min( 距尾尖1 cm) 、禁水 24 h( 8 ∶00 ～ 8 ∶00) 、潮濕飼養(yǎng) 24 h( 將 200 ml 水加入有鋸 末 的 籠 底，24 h) 、禁 食 24 h ( 8 ∶ 00 ～ 8 ∶ 00) 、束 縛( 5 min) 、搖晃( 1次/s，15 min) 和冷水( 8℃ ) 游泳 7 min; 陽(yáng)性藥( DMBG-FH) 組采用 DMBG 100 mg/kg 和 FH 10 mg/kg 聯(lián)合用藥連續(xù)灌胃( ig) ，降糖解郁茶低、中、高劑量分別為 1、2、4 g/kg。模型組和正常組只 ig 給予等量溶媒( 0. 5% CMC-Na) ，其中正常組不給予造模。每天 CUMS 的同時(shí)，給予各受試藥物或溶媒，連續(xù) 21 d，末次給藥后 1 h 進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試; 行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后立即尾靜脈取血，測(cè)試血糖值。陽(yáng)性藥及各受試保健茶均用0. 5% CMC-Na 溶解或混懸至所需給藥濃度。

1. 4. 3 糖水消耗試驗(yàn)( SCT) 小鼠于實(shí)驗(yàn)前 24 h 訓(xùn)練適應(yīng)含糖飲水，在禁食禁水 12 h 后進(jìn)行 SCT。測(cè)試時(shí)，所有小鼠單籠飼養(yǎng)，在安靜的房間進(jìn)行，每籠即每只小鼠放兩個(gè)水瓶( 內(nèi)分別裝入清水和 1% 蔗糖水，體積均為 100 ml，兩水瓶位置隨機(jī)放置) ，2 h 后取走水瓶并測(cè)量體積( 測(cè)試前后瓶中水量之差) ，測(cè)定 2 h 內(nèi)小鼠 1% 蔗糖水?dāng)z入體積及清水?dāng)z入體積，按公式計(jì)算每只動(dòng)物的糖水偏愛。計(jì)算公式: 糖水偏愛 =〔糖水?dāng)z入體積/( 糖水?dāng)z入體積+清水?dāng)z入體積) ×100% 〕。

1. 4. 4 開場(chǎng)試驗(yàn)( OFT) 采用大小鼠開場(chǎng)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) XR-XZ301 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠放入中心方格內(nèi)，記錄小鼠在5 min內(nèi)的運(yùn)動(dòng)距離和站立次數(shù)。

1. 4. 5 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)( FST)采用SuperFST強(qiáng)迫游泳視頻分析系統(tǒng)XR-XQ202進(jìn)行實(shí)驗(yàn) ，實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠單獨(dú)放入高 20 cm、直徑 14 cm 的圓柱形玻璃缸中，缸內(nèi)水深 10 cm，水溫( 25±2) ℃ ，在SuperFST軟件中設(shè)置總時(shí)間6 min，數(shù)據(jù)分段處理后4 min內(nèi)游泳累計(jì)不動(dòng)時(shí)間( 指小鼠在水中停止掙扎，或顯示漂浮狀態(tài)，僅有微小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面) 。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 各組數(shù)據(jù)以 x±s 表示，采用 SPSS11. 5 軟件，多組間比較用單因素方差分析( one-way ANOVA) ，組間兩兩比較用LSD 法。

3討 論

本研究組在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，將毛冬青、合歡花、牡丹皮和梔子配方組成降糖解郁茶。其中，毛冬青為冬青科植物毛冬青 Ilex pubescens Hook. et Arn. 的干燥根，味甘、微苦，性平，歸肺、肝、大腸經(jīng)，具活血通絡(luò)、清熱解毒、利水滲濕之功效，具有降壓、抗凝、抗腦組織缺血缺氧損傷、抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能等廣泛的藥理作用; 合歡花為豆科植物合歡 Albizzia julibrissin Du-razz. 的干燥花序，具有安神解郁、滋陰補(bǔ)陽(yáng)、活血、消癰腫之功效，適用于忿怒憂郁、虛煩不安、健忘失眠等癥; 梔子為茜草科植物梔子 Gardenia jasminoides Ellis 的干燥成熟果實(shí)，藥性苦、寒，歸心、肺、三焦經(jīng)，具有瀉火除煩、清熱利濕、涼血解毒、外用消腫止痛之功效，用于熱病心煩、濕熱黃疸、淋證澀痛、血熱吐衄、目赤腫痛、火毒瘡瘍、外治扭挫傷痛等癥的治療; 牡丹皮為毛茛科植物牡丹 Paeoniasuffruticosa Andr. 的干燥根皮，藥性苦、辛、微寒，歸心、肝、腎經(jīng)，清熱涼血、活血化瘀，用于熱入營(yíng)血、溫毒發(fā)斑、吐血衄血、夜熱早涼、無汗骨蒸、經(jīng)閉痛經(jīng)、跌撲傷痛、癰腫瘡毒等癥的治療。以上四藥為主要原料組成的降糖解郁茶飲，具有清熱、涼血、活血、利濕、疏肝解郁、瀉火除煩、滋陰等多種功效，有望用于臨床中多種類型的糖尿病并發(fā)抑郁癥的防治。本研究結(jié)果顯示，STZ 引起了小鼠血糖顯著升高，進(jìn)一步通過 CUMS 引起了小鼠的抑郁樣行為，綜合提示小鼠糖尿病抑郁癥模型復(fù)制成功; 給予降糖解郁茶飲和陽(yáng)性藥 DMBG-FH 21 d后，過高血糖被顯著降低、糖水偏愛顯著升高、游泳不動(dòng)時(shí)間顯著減少、OFT 運(yùn)動(dòng)時(shí)間和站立次數(shù)均被顯著升高，且本保健茶飲與 DMBG-FH 各指標(biāo)相比均無明顯差異，綜合提示降糖解郁茶飲具有防治糖尿病并發(fā)抑郁癥作用，且與 DMBG-FH 作用相當(dāng)�，F(xiàn)代研究表明，毛冬青煎劑和毛冬青甲素具有防治糖尿病并發(fā)癥作用，合歡花總黃酮具有抗抑郁作用，梔子中梔子苷具有降糖、京尼平具有抗抑郁作用，牡丹皮中丹皮酚具有降糖、水提物具有抗抑郁作用。降糖解郁茶飲防治糖尿病并發(fā)抑郁癥的作用，可能與其組成藥物毛冬青、合歡花、梔子和牡丹皮中多種活性成分綜合作用有關(guān)。