南開大學(xué)教您用鼎昊源TL1000自動研磨儀研磨小鼠皮膚提取RNA
實驗地點:南開大學(xué)
試驗樣品:小鼠皮膚(RNA提。
實驗步驟:
1、在2ml圓底離心管單管放入小鼠皮膚樣品40-50mg;
2、在離心管中加入5mm硬質(zhì)不銹鋼研磨珠1顆,蓋好管蓋,裝入鼎昊源TL1000自動研磨儀適配器中;
3、將裝有樣品的適配器浸入液氮中;
4、待液氮不沸騰后取出,迅速安裝上機(jī),采用間歇研磨方法;
5、間歇研磨參數(shù)設(shè)置為轉(zhuǎn)速2000rpm,每次自動研磨1分鐘,間歇10s,循環(huán)4-5次效果最好,從膠圖看RNA濃度較高;
6、研磨結(jié)束后,將離心管取出,每管加入裂解液(Trizol)0.5ml,之后進(jìn)行離心、純化等,做后續(xù)RNA提取實驗。
實驗經(jīng)驗談:
根據(jù)該用戶的試驗經(jīng)驗,使用鼎昊源TL1000自動研磨儀研磨小鼠皮膚,參數(shù)設(shè)置轉(zhuǎn)速大于1600rpm,其他設(shè)置均采用以上案例中設(shè)定不變,都可以成功研磨并提取RNA。不過采用案例中的方法自動研磨效果最好。