透析的原理是什么?一般需要多長時間才能完成?
透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下,選擇性擴(kuò)散通過半透膜,從而達(dá)到大/小分子分離,膜兩側(cè)濃度平衡,即小顆粒的溶質(zhì)通過膜,而大分子物質(zhì)不能通過,被截留在膜另一邊。
如果將樣品置于透析膜管內(nèi),通過置換膜管外部的透析緩沖液,可將小顆粒物質(zhì)清除,從而達(dá)到純化大分子物質(zhì)的目的。
一般來說,一天之內(nèi)置換3-5次緩沖液,然后在室溫條件下,放在攪拌臺上隔夜透析,即可達(dá)到高效的透析結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)的透析操作一般需要16-24小時。
許多因素會影響透析效率,包括:擴(kuò)散系數(shù)、pH值、溫度、時間、物質(zhì)濃度、樣品體積、透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速率。
下圖是透析簡易圖示:
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