Jonathan P. Danaceau，Erin E. Chambers and Kenneth J. Fountain

沃特世公司（美國馬薩諸塞州米爾福德）

應(yīng)用優(yōu)勢
■ 無需酶水解即可分析葡糖苷酸代謝物
■ 適用于由22種阿片類藥物和阿片類鎮(zhèn)痛化合物構(gòu)成的綜合性藥物組
■ 與傳統(tǒng)的LLE、SPE或蛋白質(zhì)沉淀法相比，樣品制備快速簡單
■ 去除了內(nèi)源性磷脂質(zhì)
■ 對所有分析物和代謝物具有線性響應(yīng)

沃特世解決方案
OstroTM96孔板
ACQUITY UPLC®BEH色譜柱
ACQUITY UPLC系統(tǒng)
Xevo® TQD質(zhì)譜儀

關(guān)鍵詞
阿片類藥物，阿片類，UPLC，法醫(yī)毒理學，全血

簡介
天然和合成阿片類藥物一直是法醫(yī)毒理學研究的一個重要方面。有比例相當高的犯罪和/或死亡事件都是由誤用或濫用麻醉鎮(zhèn)痛藥（如羥考酮和氫可酮），以及非法阿片類藥物海洛因所引起。法醫(yī)實驗室通常需要分析全血樣本中的不同藥物以確定確切的死亡原因，或是判斷是否在藥物作用下駕駛，或者出于其它犯罪或研究目的。過去，通常用酸或酶使樣品水解并釋放出葡糖苷酸代謝物之后再進行GC/MS分析¹。通過酶水解將葡糖苷酸代謝物轉(zhuǎn)化為其游離形式的處理步驟增加了分析時間和成本，而且無法確保水解程度始終如一²。隨著現(xiàn)代UPLC®/MS/MS技術(shù)的出現(xiàn)，如今可直接對葡糖苷酸代謝物進行分析^3-6。

全血分析可采用多種樣品制備方法，包括液液萃取（LLE）和固相萃�。⊿PE）。最簡單的一種方法就是細胞溶解之后進行蛋白質(zhì)沉淀。本研究中介紹了一種快速直接的樣品制備方法，采用Ostro樣品制備板對全血樣品進行預(yù)處理以裂解細胞，然后用乙腈沉淀，再用96孔板洗脫。所有樣品預(yù)處理均在Ostro板孔中進行，無需離心或從各個離心管中轉(zhuǎn)移樣品。

樣品制備完成之后，對22種阿片類藥物及其代謝物進行UPLC/MS/MS分析。葡糖苷酸代謝物可直接進行分析，無需酶水解或化學水解。校準曲線呈線性，并可輕松達到相應(yīng)的檢測限。

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