嘔吐毒素其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏,其主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物。嘔吐毒素具有雌激素作用,主要作用于生殖系統(tǒng),可使家畜,家禽等產(chǎn)生雌性激素亢進(jìn)癥。食用含嘔吐毒素的面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀,如惡心、發(fā)冷、頭痛、神智抑郁和共濟(jì)失調(diào)等。妊娠期的動(dòng)物(包括人)食用含嘔吐毒素的食物可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎,因此建立快速、靈敏、準(zhǔn)確的嘔吐毒素檢測技術(shù)對人類健康具有重要意義。
目前,嘔吐毒素的檢測方法有液相色譜法,酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法,
(1)嘔吐毒素半抗原合成(合成技術(shù)路線見下圖)
20-100mg嘔吐毒素,與1-3mol馬來酸酐,在2-5ml甲苯中,于80℃攪拌反應(yīng),8-20h后,蒸干溶劑,酸化,萃取,重結(jié)晶后得到嘔吐毒素半抗原。
(2)嘔吐毒素全抗原合成
將嘔吐毒素半抗原與牛血清白蛋白歐聯(lián)得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg嘔吐毒素半抗原,室溫?cái)嚢?/FONT>1h,再加6mg EDC,暗處攪拌反應(yīng)并過夜,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到嘔吐毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。