利用CORTECS UPLC色譜柱改善分離度
瀏覽次數(shù):1921 發(fā)布日期:2013-9-11
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Kenneth Berthelette、Mia Summers和Kenneth J. Fountain
目的
證實CORTECS™ UPLC® 1.6 µm色譜柱的高分離性能。
背景
對于復(fù)雜混合物分離,高分離度是一個重要的質(zhì)量指標,由于減少了相近洗脫峰的干擾,可以提高計算的精確度。分離度是系統(tǒng)柱效(N)、化合物之間的選擇性(α)和保留因子(k)的函數(shù)。由于分離度與柱效的平方根成正比,因此對于柱效較高的色譜柱,其分離度也較高1。使用高效CORTECS UPLC 1.6 µm色譜柱,無需進一步優(yōu)化分析方法,也能取得較好的分析物分離效果。
解決方案
使用親水性相互作用色譜(HILIC)對局部麻醉劑進行分離,展示CORTECS UPLC色譜柱對不同峰的較高分離能力。局部麻醉劑廣泛應(yīng)用于許多醫(yī)藥領(lǐng)域,包括牙科。
本文將展示使用CORTECS UPLC色譜柱分離五種結(jié)構(gòu)相似的局部麻醉劑(圖1),與全多孔色譜柱初始分離相比所產(chǎn)生的改善。
高效CORTECS UPLC色譜柱提高難分離物質(zhì)的分離度,從而可以更為準確地表征和定量分析物。
為了對液相色譜的峰進行精確定量或表征,盡可能降低相近洗脫峰的潛在干擾是非常重要的。色譜柱的理論塔板數(shù)越多,柱效就越高,從而分離度也會得到提高。沃特世(Waters®) CORTECS UPLC高效色譜柱采用了先進的實心核顆粒和色譜柱填充技術(shù),可以獲得較高的分離度。局部麻醉劑的分離(圖2)就是一個例子,其中將全多孔HILIC色譜柱初始分離和CORTECS HILIC UPLC色譜柱分離作了對比,使用的條件完全相同。
在本次研究中,只是使用CORTECS UPLC HILIC色譜柱替換了初始色譜柱,峰2和峰3之間的分離度就提升了51%。在初始分離中,峰2和峰3明顯共洗脫,分離度為1.18。使用CORTECS UPLC HILIC色譜柱時,各峰實現(xiàn)了基線分離,分離度為2.15,從而可以實現(xiàn)對丁卡因(2)和布他卡因(3)的準確表征或定量。由于CORTECS UPLC色譜柱使用的方法條件與初始分離相同,因此無需進一步開發(fā)方法,提高了實驗室資源利用效率。
總結(jié)
在高難度分離物中獲得較高的峰間分離度是非常困難的。為了提高分離度而進行的方法開發(fā)可能需要更多時間,導(dǎo)致工作效率降低;而使用高效CORTECS UPLC色譜柱則能改善難以分離的待測物的分離度,從而更為準確地表征和定量分析物。
參考文獻
1. Neue UD. HPLC Columns: Theory, Technology, and Practice. Wiley-VCH. 1997.