利用蒸發(fā)光散射檢測器和BEH Amide色譜柱測定果汁中的食用糖
瀏覽次數(shù):2334 發(fā)布日期:2013-8-21
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Mark E. Benvenuti 和 Jennifer Burgess
目的
在較短的分析時(shí)間內(nèi),通過盡可能簡單的樣品制備,以具有成本效益的方式,成功測定多種果汁中的糖含量。
背景
近年來,研究表明:含糖軟飲料與肥胖、冠心病問題和II型糖尿病發(fā)展有關(guān),因此,利用純果汁代替含糖軟飲料的健康選擇備受人們推崇。此外,據(jù)報(bào)道:某些果汁如石榴汁,由于含有抗氧化成分而對健康有益,導(dǎo)致這類產(chǎn)品的價(jià)格偏高。
為確保產(chǎn)品質(zhì)量并符合監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求,果汁行業(yè)必須對產(chǎn)品進(jìn)行檢測使其符合特定標(biāo)準(zhǔn)。其中一項(xiàng)指標(biāo)即為糖含量。果糖、蔗糖和葡萄糖是果汁分析中的重要分析物。它們的含量和相對比率各不相同,可作為識(shí)別不同品種的標(biāo)識(shí)。
HPLC結(jié)合蒸發(fā)光散射(ELS)檢測器,長期以來,一直被公認(rèn)為是進(jìn)行此類分析的有效技術(shù)。氨基柱一直以來被用于糖分離。但是,這可能會(huì)形成希夫堿,導(dǎo)致色譜柱使用壽命縮短和糖定量不準(zhǔn)確。
采用性能可靠的XBridge™ BEH Amide 色譜柱,結(jié)合經(jīng)證實(shí)的Alliance® HPLC系統(tǒng)技術(shù),對五種食用糖進(jìn)行快速分析和定量。
沃特世(Waters®)專利酰胺基色譜柱可防止希夫堿的形成,消除了上述問題。本研究顯示了沃特世XBridge BEH Amide XP色譜柱在糖分析中的通用性。
解決方案
各種果汁購買于當(dāng)?shù)厥袌。樣品制備只需要:將這些果汁樣品通過高速離心,除去果肉及其它不溶性物質(zhì)。取每種果汁的部分上清液,并用1:50水/乙腈混合液進(jìn)行稀釋。
利用配有2424蒸發(fā)光散射檢測器的Alliance HPLC系統(tǒng)進(jìn)行分析。由于目標(biāo)分析物無發(fā)色團(tuán),因而不適合UV和熒光檢測,選用更為合適的ELS檢測?蛇M(jìn)行梯度洗脫,以對相關(guān)化合物如其它糖類、糖醇類(山梨糖醇)以及高碳低聚物進(jìn)行分離。所用色譜柱為XBridge BEH Amide XP 4.6×100 mm,2.5 µm色譜柱。梯度洗脫所用的二元流動(dòng)相由水和乙腈組成,以三乙胺(TEA)為改性劑。用糖混合儲(chǔ)備液的稀釋液,建立六個(gè)點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對樣品進(jìn)行定量。圖2顯示了四種食用糖和山梨糖醇的分離,山梨糖醇是一種糖醇,在某些品種中可作為不合格品標(biāo)志物。各種果汁的分析結(jié)果見圖3。值得注意的是,蘋果汁中含有微量的山梨糖醇。
總結(jié)
使用XBridge BEH Amide色譜柱在不到7.5 min的時(shí)間內(nèi)即可完成果汁中的糖分析。利用性能可靠的XBridge BEH Amide XP色譜柱,參照本方法,可對果汁中的糖進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析經(jīng)證實(shí)的Alliance HPLC系統(tǒng)技術(shù)對果汁中的糖進(jìn)行準(zhǔn)確定量,以實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的溶劑輸送和可重復(fù)的進(jìn)樣性能,并且能夠創(chuàng)建非線性梯度,執(zhí)行簡單的ELS檢測,從而符合了簡化樣品制備,縮短分析時(shí)間和提高成本效益的目標(biāo)。