高效液體相色譜法（HPLC）“瘦肉精”檢測(cè)的液體處理
孟文峰 李海洋 2012.10.24
（RXS-200標(biāo)樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀—實(shí)現(xiàn)精確稀釋）（附操作視頻）
簡(jiǎn)介
“瘦肉精”是一類動(dòng)物用藥，有數(shù)種藥物被稱為“瘦肉精”，例如萊克多巴胺（Ractopamine）及克倫特羅（Clenbuterol）等�！笆萑饩蹦苁关i提高生長(zhǎng)速度、增加瘦肉率、豬毛色光亮，賣(mài)相好、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。但對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生副作用，輕則導(dǎo)致心律不齊，嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致心臟病。
目前檢測(cè)瘦肉精的方法有：氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）、高效液相色譜法（HPLC）、霉聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)等。
現(xiàn)以高效液相色譜法為例，分別介紹RXS-200標(biāo)樣稀釋儀、EL系列多功能液體操作儀—在液體處理方面的應(yīng)用。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/B>
定量檢測(cè)樣品中豬肉鹽酸克倫特羅的含量
應(yīng)用行業(yè)：食品檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)步驟：
第一步：進(jìn)行樣品處理，設(shè)定色譜條件，使用高效液相色譜儀進(jìn)樣10ul分析。
第二步：按照下表制備標(biāo)準(zhǔn)序列液
|
樣品杯號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 | |
|
母液 |
鹽酸克倫特羅試劑
（100ug/ml） |
200ul |
400ul |
600ul |
800ul |
1000ul |
2000ul |
|
稀釋液 |
蒸餾水 |
9800ul |
9600ul |
9400ul |
9200ul |
9000ul |
8000ul |
|
濃度(100ug/ml) |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
20 | |
|
稀釋比 |
2% |
4% |
6% |
8% |
10% |
20% | |
一：使用EL-211(雙通道)多功能液體操作儀制備標(biāo)準(zhǔn)序列液
1. 執(zhí)行充液任務(wù)，使稀釋液充滿整個(gè)管路
2. 按照軟件向?qū)Ы⑾♂屓蝿?wù)，稀釋模式選擇“自定義”將各序列液的稀釋比設(shè)置界面，稀釋后的總體積設(shè)置為10ml
3．點(diǎn)“執(zhí)行”按鈕，按照提示操作，按手動(dòng)按鈕，先進(jìn)行空氣隔離，然后母液從手柄端口吸入系統(tǒng)：
4. 按“手柄按鈕”或觸摸屏的“確定”按鈕或 “腳踏板”，儀器將第一個(gè)序列液分配到試管1中；
5. 重復(fù)以上操作“2”“3”“4”步驟，序列液分配到試管2中，依次類推制備其他各序列液
二：使用RXS-200標(biāo)樣稀釋儀制備標(biāo)準(zhǔn)序列液
1.將子母液的注射器充滿對(duì)應(yīng)的液體，將出液口空氣排干凈；
2.進(jìn)入“手動(dòng)工作準(zhǔn)備”界面，對(duì)S1和S2進(jìn)行下復(fù)位操作，然后把注射器裝上儀器并且將針管安裝好；
3.返回主界面，點(diǎn)擊“序列稀釋”，進(jìn)入該界面進(jìn)行參數(shù)設(shè)定，選擇“自由單排模式”、稀釋次數(shù)設(shè)為“6”、稀釋比參數(shù)選擇“逐個(gè)”和“比例遞增”、初始%值設(shè)為“2”、體積/母液濃度參數(shù)選中“等總體積”輸入值10ml；
4.點(diǎn)擊“啟動(dòng)任務(wù)”，然后將試管1的口對(duì)準(zhǔn)設(shè)備針管出液口，點(diǎn)擊界面上的“確定”或者面板上的按鍵開(kāi)關(guān)，進(jìn)行取液，完畢后得到1號(hào)稀釋液；按照界面提示操作，依次類推，取出2、3、4、5、6號(hào)稀釋液。
第三步：將各序列液依次進(jìn)樣10ul分析，用鹽酸克倫特羅試劑（100ug/ml）為對(duì)照，用保留時(shí)間進(jìn)行定性，用峰面積定量；
第四步：依照公式進(jìn)行計(jì)算：
X={(m/1000)/1000}/{(M/1000)/V1}×（V2/1000）
X: 樣品中鹽酸克倫特羅含量（mg/kg）;M;樣品取樣量(g)； m:樣品中鹽酸克倫特羅（ng）;V1:樣品定容體積 ; V2:樣品進(jìn)樣體積（ul）
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