1. 實驗目的:
采用德國IBL的EB病毒不同抗原的抗體檢測試劑盒對不同感染階段的病人樣本進行檢測,統(tǒng)計出,不同階段各種抗體的陽性率。為臨床EB病毒的診斷,特別是EB病毒的免疫學診斷提供方法和策略依據(jù)。
2. 材料與方法
為了確定IBL EBV ELISA試劑盒的臨床靈敏度和特異性,我們總共做了242個樣品。其中的樣品都取自EBV感染的不同階段。采用德國IBL的EB病毒不同抗原的抗體檢測試劑盒的名稱和目錄號為:
(1)BE病毒殼抗原IgM抗體ELISA檢測試劑盒(EBV VCA IgM ELISA;貨號:RE57361)。
(2)BE病毒殼抗原IgG抗體ELISA檢測試劑盒(EBV VCA IgG ELISA;貨號:RE56281)。
(3)BE病毒殼抗原IgA抗體ELISA檢測試劑盒(EBV VCA IgA ELISA;貨號:RE56271)。
(4)(3)BE病毒早期抗原IgA抗體ELISA檢測試劑盒(EBV EA IgA ELISA;貨號:RE56211)。
(5)BE病毒早期抗原IgG抗體ELISA檢測試劑盒(EBV VCA IgG ELISA;貨號:RE56221)。
(6)BE病毒核抗原IgG抗體ELISA檢測試劑盒(EBV VCA IgG ELISA;貨號:RE56251)。
抗原血清反應陰性的樣品(包括取自小孩的樣品):n=64;急性感染階段的樣品:n=48;再激活感染:n=55;既往感染:n=75。所有的樣品都用IF(免疫熒光)分類鑒定的,特別是再激活感染的樣品。方法比較,所有樣品都已用FDA公認的參考ELSIA試劑盒(EBNA IgG,VCA IgG,VCA IgM和EA IgG)檢測過。而EA IgA和VCA IgA還沒有FDA公認的參考ELISA試劑盒。
3.結(jié)果:結(jié)果見下表:不同感染階段
用IBL-ELISA試劑盒確定的陽性樣品(包括臨界值的樣品) |
N=242 |
VCA IgM |
VCA IgG |
VCA IgA |
EA IgA |
EA IgG |
EBNA IgG |
急性感染樣品48 |
96% |
90% |
75% |
65% |
90% |
0% |
在激活感染樣品n=55 |
0% |
100% |
96% |
76% |
93% |
100% |
既往感染樣品n=75 |
1% |
89% |
47% |
05 |
10% |
100% |
血清反應陰性樣品n=22 |
5% |
14%* |
18%* |
0% |
0% |
0% |
0-12月的小孩n=42 |
2% |
36%** |
25 |
0% |
2% |
14%** |
*在EBV血清反應陰性組中,可能包含那種早期無癥狀的EBV感染人群,因而導致VCA IgM,IgA和IgG結(jié)果陽性。
**母體抗體僅代表VCA IgG,EBNA IgG的濃度是非常低的。
4.結(jié)論:關于EBV感染不同階段,IBL EBV-ELISAs試劑盒的靈敏度和特異性
急性EBV感染:如上面的表格所示,我們可以檢測三個參數(shù)(VCA IgM,VCA IgG和EA IgG,一般檢測結(jié)果為陽性)和EBNA IgG(一般檢測結(jié)果為陰性)來確定是否為急性EBV感染。
再激活的EBV感染:與急性感染相比,伴隨有或無腫瘤的再激活EBV感染病例的VCA IgM檢測幾乎100%為陰性,但VCA IgG,VCA IgA,EA IgG和EBNA IgG卻明顯的表現(xiàn)為陽性,如上表格所示。
既往感染:既往感染有兩個明顯的陽性參數(shù),分別是VCA IgG和EBNA IgG。除VCA IgA外,幾乎其他所有的參數(shù)都應該為陰性,在既往感染中,VCA IgA的濃度最長可持續(xù)一年。
血清反應陰性病人:血清反應陰性病人的六個參數(shù)都應該為陰性。即使VCA IgG, VCA IgA or VCA IgM中的一個參數(shù)為陽性,病人也應當是無癥狀EBV感染。另外,這種單一陽性結(jié)果也表明實驗稍微有一點非特異性,因為試劑盒有很高的靈敏度,所以它可以識別多克隆刺激所產(chǎn)生的抗體。為了清楚的鑒別出是否為血清反應陰性,我們建議您在7到10天后在重復檢測一次。
母體抗體:在出生后6到9個月內(nèi),我們可以檢測到濃度非常低的母體抗體,如果為既往感染,則VCA IgG和EBNA IgG這兩個參數(shù)應當為陽性。如上面的表格所示,其他所有的抗體應當為陰性。能檢測到母體抗體的事實表明:IBL公司這兩個參數(shù)的ELISA試劑盒有很高的靈敏度。