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                                ELISA(雙抗體夾心法)—檢測(cè)HBsAg

                                瀏覽次數(shù):2524 發(fā)布日期:2009-11-30 
                                以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入,共同孵育后,抗原結(jié)合于包被抗體上,再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs),酶標(biāo)抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據(jù)顏色反應(yīng)來判定抗原含量。

                                【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含:

                                1、包被抗-HBs反應(yīng)條

                                1

                                2、酶結(jié)合物

                                1

                                3、HBsAg陽性對(duì)照

                                1

                                4、HBsAg陰性對(duì)照

                                1

                                5、洗滌液:用前每瓶作120稀釋

                                1

                                6、顯色劑(TMBA

                                1

                                7、顯色劑(TMBB

                                1

                                8、終止液

                                1

                                【方法】
                                1、加入待測(cè)標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽性對(duì)照2孔,HBsAg陰性對(duì)照2孔,空白對(duì)照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對(duì)照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
                                2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。
                                3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
                                4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
                                【結(jié)果】
                                比色法:波長450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然后讀取各孔光密度值。
                                樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。
                                備注:陰性對(duì)照平均OD值低于0.05作0.05計(jì)算,高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽性對(duì)照OD值≥0.8,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。
                                【注意事項(xiàng)】
                                1、試劑盒置2℃~8℃保存。
                                2、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。
                                3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測(cè)標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測(cè)試,余者應(yīng)及時(shí)封存于冰箱中以備后用。
                                4、待測(cè)標(biāo)本不可用NaN3防腐。
                                5、不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。
                                6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。
                                7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時(shí),請(qǐng)置37℃至溶解。
                                來源:上?婆d生物科技有限公司
                                聯(lián)系電話:021-60510070,60541896
                                E-mail:shkxsw@163.com

                                標(biāo)簽: 檢測(cè)HBsAg
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