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                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 正確凍存細(xì)胞--使細(xì)胞不易被污染

                                                              正確凍存細(xì)胞--使細(xì)胞不易被污染

                                                              瀏覽次數(shù):1303 發(fā)布日期:2022-6-15  來源:尚恩生物
                                                              圖片

                                                              隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,還將建立開發(fā)或獲得眾多的細(xì)胞系。每一個(gè)細(xì)胞系均擴(kuò)大了其起源細(xì)胞的應(yīng)用,成為有價(jià)值的資源。若該細(xì)胞系頗為獨(dú)特,則其可能是不可替換的;替換至少也是昂貴與耗時(shí)的。因此,必須通過保存細(xì)胞系來保證這種重要投資。

                                                              由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇,有限細(xì)胞系的衰老以及連續(xù)細(xì)胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性,使細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)時(shí)有變異傾向。

                                                              此外,即使在管理最好的實(shí)驗(yàn)室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯誤辨識的發(fā)生率也很高。因此,存在諸多理由進(jìn)行冷凍儲存細(xì)胞,總體概述有10大不得不凍存細(xì)胞的理由:

                                                              ①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移;
                                                              ②衰老,最后導(dǎo)致細(xì)胞系消失;
                                                              ③生長特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得;
                                                              ④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性;
                                                              ⑤微生物污染;
                                                              ⑥其他細(xì)胞系的交叉污染;
                                                              ⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯誤鑒別;
                                                              ⑧孵育箱故障;
                                                              ⑨對于保存那些不立即使用的細(xì)胞系,可節(jié)省時(shí)間和材料;
                                                              ⑩需要將細(xì)胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

                                                              在考慮凍存細(xì)胞之前,需滿足以下特定條件:

                                                              01
                                                              確認(rèn)凍存前需證實(shí)細(xì)胞系未受污染,且確為該細(xì)胞系。盡管對于新獲得的細(xì)胞系,可以在完全確認(rèn)前凍存幾支,但在大量凍存前應(yīng)進(jìn)行徹底確認(rèn)。

                                                              02
                                                              凍存時(shí)間,如果是有限細(xì)胞系,這些細(xì)胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長,獲得足夠量的細(xì)胞再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系應(yīng)將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長至足夠數(shù)量再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系有其優(yōu)勢:它們可無限生長,生長比較迅速,容易克隆,但是它們?nèi)狈z傳穩(wěn)定性。有限細(xì)胞系通常或接近二倍體。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的,但是,它們很難克隆,生長緩慢,最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

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                                                              公司介紹

                                                              武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖高新區(qū)光谷生物城,專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù),公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動物房,已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證,獲得高新技術(shù)企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)。

                                                              公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購;細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種,同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類;公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。

                                                              公司細(xì)胞業(yè)務(wù)覆蓋國內(nèi)各大高校生物實(shí)驗(yàn)室、生物研究機(jī)構(gòu)及一些生物科研、診斷、制藥公司,不斷為廣大科研工作者提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)!尚恩生物—您專業(yè)的細(xì)胞供應(yīng)商!
                                                               
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