采訪Penelope Zorzi
病理學(xué)家使用顯微鏡檢查樣本以發(fā)現(xiàn)組織和體液中存在的異常。他們的檢查發(fā)現(xiàn)或推論對(duì)治療決策有非常大的影響。Penelope Zorzi博士擁有免疫學(xué)、病理學(xué)和基因組學(xué)專業(yè)背景,是徠卡顯微系統(tǒng)健康與臨床顯微鏡術(shù)產(chǎn)品工作流經(jīng)理。她了解病理學(xué)家的工作職責(zé)并介紹了醫(yī)生、科學(xué)家和病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)員的工作。
Penelope Zorzi博士是徠卡顯微系統(tǒng)健康與臨床顯微鏡術(shù)產(chǎn)品工作流程經(jīng)理。她擁有意大利維羅納大學(xué)的生物醫(yī)藥科學(xué)博士學(xué)位,并在美國(guó)西雅圖華盛頓大學(xué)完成了博士后學(xué)習(xí)。她作為研究科學(xué)家和項(xiàng)目經(jīng)理在免疫學(xué)、病理學(xué)和基因組學(xué)領(lǐng)域擁有長(zhǎng)達(dá)十年的專業(yè)經(jīng)驗(yàn)。首次接觸腫瘤免疫治療藥物領(lǐng)域以后,她決定進(jìn)入營(yíng)銷和銷售領(lǐng)域,并在意大利米蘭接受了數(shù)字化營(yíng)銷方面的培訓(xùn),還在美國(guó)加利福尼亞州斯坦福大學(xué)學(xué)習(xí)了數(shù)據(jù)驅(qū)動(dòng)營(yíng)銷。最近幾年,她獲得了西雅圖產(chǎn)品學(xué)院的產(chǎn)品管理認(rèn)證,參加了數(shù)據(jù)科學(xué)訓(xùn)練營(yíng),并擔(dān)任了設(shè)計(jì)和建筑材料產(chǎn)品管理方面的職位。目前,Zorzi博士任職于徠卡顯微系統(tǒng)應(yīng)用業(yè)務(wù)單元,提供產(chǎn)品開(kāi)發(fā)協(xié)作,并負(fù)責(zé)就內(nèi)外部目標(biāo)群體痛點(diǎn)和需求提供市場(chǎng)洞察和行業(yè)知識(shí)。
病理學(xué)家面對(duì)的最大挑戰(zhàn)是什么?
Zorzi博士:診斷時(shí)間在臨床病理學(xué)檢查中至關(guān)重要。你可以想象下手術(shù)過(guò)程中的組織學(xué)分析。手術(shù)期間,醫(yī)生會(huì)從患者身上采集活組織切片,然后病理學(xué)家會(huì)檢查由此制作的冷凍組織切片。病理學(xué)家的診斷結(jié)果會(huì)直接影響外科醫(yī)生下一步的操作。

圖1:多頭顯微鏡
這是一項(xiàng)重大的責(zé)任。
Zorzi博士:確實(shí)如此!診斷結(jié)果一定要準(zhǔn)確無(wú)誤。根據(jù)我以往的經(jīng)驗(yàn),病理學(xué)家在工作中對(duì)自己的診斷結(jié)果極其謹(jǐn)慎,如果有任何疑慮,總是會(huì)和同事一起討論。一些實(shí)驗(yàn)室還為此配置了多頭顯微鏡,以便于兩個(gè)或更多人一起觀察樣本或攝像頭拍攝的圖片,這種顯微鏡在教學(xué)中也非常實(shí)用。
您能為我們?cè)敿?xì)介紹下病理學(xué)家使用顯微鏡進(jìn)行工作的情況嗎?
Zorzi博士:病理學(xué)家需要觀察組織切片和體液,具體視專業(yè)情況而定。觀察樣本時(shí),實(shí)驗(yàn)室化驗(yàn)員或病理學(xué)家會(huì)冷凍或固定樣本,例如使用福爾馬林,并用冰凍切片機(jī)或普通切片機(jī)將樣本切割為薄片。如果是在顯微鏡下觀察,需要將切片放在載玻片上,染色并蓋片。對(duì)于體液,大多數(shù)情況是涂抹在蓋玻片上,然后用蓋片蓋到載玻片上以防止污染并提高成像質(zhì)量。
樣本取自哪里?
Zorzi博士:樣本可以是來(lái)自人體的各個(gè)部位。組織一般是通過(guò)外科手術(shù)或活檢采集。舉例來(lái)說(shuō),在組織病理學(xué)中,會(huì)切除痣進(jìn)行黑色素瘤皮膚癌檢查,開(kāi)展乳房活檢進(jìn)行癌癥檢查,甚至還可能在術(shù)后進(jìn)行器官活檢,例如子宮切除術(shù)、結(jié)腸切除術(shù)或扁桃體切除術(shù)。還可能會(huì)觀察骨頭診斷癌癥或骨質(zhì)疏松癥等其他骨科疾病。在細(xì)胞病理學(xué)中,主要是觀察細(xì)胞。一般是通過(guò)組織剝離、刮除或使用細(xì)針抽吸。婦科醫(yī)生還可以通過(guò)體液、子宮頸抹片檢查獲取細(xì)胞,肺科專家在診斷癌癥或感染時(shí)還會(huì)提取痰樣本。血液病理學(xué)家在診斷感染、貧血、凝血障礙和白血病時(shí),會(huì)觀察全血、淋巴液或骨髓。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)家會(huì)觀察微生物診斷感染。
Zorzi博士:樣本可以是來(lái)自人體的各個(gè)部位。組織一般是通過(guò)外科手術(shù)或活檢采集。舉例來(lái)說(shuō),在組織病理學(xué)中,會(huì)切除痣進(jìn)行黑色素瘤皮膚癌檢查,開(kāi)展乳房活檢進(jìn)行癌癥檢查,甚至還可能在術(shù)后進(jìn)行器官活檢,例如子宮切除術(shù)、結(jié)腸切除術(shù)或扁桃體切除術(shù)。還可能會(huì)觀察骨頭診斷癌癥或骨質(zhì)疏松癥等其他骨科疾病。在細(xì)胞病理學(xué)中,主要是觀察細(xì)胞。一般是通過(guò)組織剝離、刮除或使用細(xì)針抽吸。婦科醫(yī)生還可以通過(guò)體液、子宮頸抹片檢查獲取細(xì)胞,肺科專家在診斷癌癥或感染時(shí)還會(huì)提取痰樣本。血液病理學(xué)家在診斷感染、貧血、凝血障礙和白血病時(shí),會(huì)觀察全血、淋巴液或骨髓。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)家會(huì)觀察微生物診斷感染。
病理學(xué)家在觀察樣本時(shí)主要在尋找什么?
Zorzi博士:一般來(lái)說(shuō),他們會(huì)觀察與正常組織存在哪些不同。結(jié)構(gòu)、形狀、顏色以及細(xì)胞數(shù)量都可以反映出樣本是否存在異常和疾病。
能為我們列舉些例子嗎?
Zorzi博士:為發(fā)現(xiàn)病理變化,通常會(huì)使用蘇木素(Hematoxylin)-伊紅(Eosin)染色法(簡(jiǎn)稱HE染色法)對(duì)組織樣本進(jìn)行染色,細(xì)胞病理學(xué)樣本則主要使用巴氏法進(jìn)行染色。病理學(xué)家可以通過(guò)觀察染色的吸收和強(qiáng)度情況判斷癌癥的類型和嚴(yán)重程度,因?yàn)榻M織或細(xì)胞的不同部分吸收的顏色也不同。在全血樣本中,可以通過(guò)觀察白細(xì)胞數(shù)量和它們的形態(tài)診斷白血病。

圖2:HE染色樣本

圖3:巴氏法染色(200倍放大倍數(shù))
顯微鏡如何幫助他們觀察到想觀察的目標(biāo)?
Zorzi博士:第一是放大。顯微鏡可以讓人看到肉眼無(wú)法看到的更多細(xì)節(jié)。病理學(xué)家一般會(huì)使用低倍率快速瀏覽整個(gè)樣本,確定目標(biāo)區(qū)域,把載物臺(tái)移動(dòng)到那里,然后提高放大倍數(shù)進(jìn)行更詳細(xì)的觀察。
第二個(gè)方面是色彩再現(xiàn)和圖像清晰度。樣本中染色劑的吸收和顏色強(qiáng)度對(duì)診斷至關(guān)重要,真實(shí)的色彩再現(xiàn)和對(duì)細(xì)胞形態(tài)細(xì)致入微的成像可以幫助病理學(xué)家有效地通過(guò)觀察得出正確的結(jié)論。
第三個(gè)方面是使用不同的對(duì)比方法觀察樣本。例如,使用明場(chǎng)觀察不同的染色切片。而相差則可以觀察到未染色樣本的細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)。還有其它幾種應(yīng)用于特定分析的對(duì)比方法,例如利用偏光可以檢測(cè)晶體和淀粉樣纖維,熒光原位雜交法(FISH)則可用于視覺(jué)評(píng)估某些DNA改變。
攝像頭在病理學(xué)中有哪些作用?
Zorzi博士:攝像頭正變得越來(lái)越重要,尤其是在加快文檔處理方面。徠卡為臨床病理學(xué)提供的顯微鏡可選配攝像頭(特別是K3系列)和支持軟件LAS X,病理學(xué)家可以借助它拍照并直接在軟件中添加注釋。他們可以將圖像發(fā)送給同事,咨詢他們的看法,如果沒(méi)有多頭顯微鏡,或者需要咨詢另一家醫(yī)院或國(guó)家的同行,這一特性會(huì)非常有用。如果患者有第二個(gè)活組織切片需要檢查,也可以非常方便地返回到當(dāng)前圖像,而無(wú)需取回已經(jīng)存放的切片。
攝像頭是如何與實(shí)驗(yàn)室或醫(yī)院的信息系統(tǒng)協(xié)作的?
Zorzi博士:很多攝像頭都配有TWAIN驅(qū)動(dòng)器,這個(gè)驅(qū)動(dòng)器會(huì)將攝像頭接入現(xiàn)有的任何信息系統(tǒng)。LAS X軟件用于獲取圖像并進(jìn)行注釋,醫(yī)生可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)室或醫(yī)院的信息系統(tǒng)訪問(wèn)圖像。
您提到診斷時(shí)間是一個(gè)至關(guān)重要的因素。時(shí)間壓力和責(zé)任對(duì)病理學(xué)家會(huì)有哪些影響?
Zorzi博士:病理學(xué)家經(jīng)常長(zhǎng)時(shí)間使用顯微鏡,因此他們會(huì)感到疲憊。他們的眼睛、脖子和背部也會(huì)出現(xiàn)酸痛的癥狀,手和胳膊也會(huì)因重復(fù)性的動(dòng)作而酸痛,所以一天的工作結(jié)束后,他們會(huì)有肌肉緊繃的感覺(jué)。高工作負(fù)荷和高難度的樣本觀察也會(huì)讓他們更加疲憊。
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境如何消除這種身體勞損呢?
Zorzi博士:人體工學(xué)顯微鏡會(huì)有很大的幫助。如果顯微鏡能夠根據(jù)用戶的體型進(jìn)行調(diào)整,病理學(xué)家便能夠以更加舒適的姿勢(shì)工作。在我去過(guò)的實(shí)驗(yàn)室中,我看到很多積極的改善。奇怪的是,長(zhǎng)期以來(lái),很多病理學(xué)家都會(huì)選擇忍受并不舒服的工作姿勢(shì)。但是當(dāng)他們開(kāi)始會(huì)用人體工學(xué)設(shè)計(jì)的顯微鏡,可以調(diào)整目鏡的高度和傾斜度,可以通過(guò)對(duì)稱的設(shè)置直起肩膀,可以通過(guò)調(diào)整控制適應(yīng)左手或右手操作后,他們立刻就感受到了顯著的差異,并表示無(wú)法想象之前是怎么堅(jiān)持下來(lái)的。

圖4:使用人體工學(xué)設(shè)計(jì)的顯微鏡,操作員能夠以更加舒適的姿勢(shì)工作。
效率在病理學(xué)中重要嗎?
Zorzi博士:效率非常重要。除了病理學(xué)家自身的經(jīng)驗(yàn),效率主要是受人體工學(xué)和顯微鏡的設(shè)計(jì)的影響。這種關(guān)系并不明顯,但是如果考慮到檢查過(guò)程中所有瑣碎細(xì)小的步驟,關(guān)系就十分清晰了。例如,以調(diào)整放大倍數(shù)為例,每次手部移動(dòng)、每次物鏡轉(zhuǎn)盤移動(dòng)、每次載物臺(tái)移動(dòng)都會(huì)耗費(fèi)時(shí)間。這些動(dòng)作所需的時(shí)間越短,轉(zhuǎn)盤的移動(dòng)越流暢,載物臺(tái)的設(shè)置便可以越精確,最終診斷所需的時(shí)間也便越短。
了解更多:徠卡顯微