PCR試劑盒技術(shù)特點(diǎn)與注意事項(xiàng)

瀏覽次數(shù)：373　發(fā)布日期：2021-9-6　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

PCR試劑盒按方法可以分為普通PCR試劑盒(定性)，熒光定量PCR試劑盒(定量)。熒光定量PCR試劑盒根據(jù)染料又分為SYBEGREEN法，探針?lè)�，等。根�?jù)模板的類(lèi)型分為DNA類(lèi)PCR試劑盒和RNA類(lèi)PCR試劑盒。

PCR試劑盒器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。

PCR試劑盒技術(shù)特點(diǎn)：
1、準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì)，結(jié)果*性大于99%。
2、高靈敏：可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3、快速：整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4、簡(jiǎn)便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5、防污染
6、高特異性：雙重特異性組成，保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需完全配對(duì)，才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì)，在延伸中產(chǎn)生熒光。

PCR試劑盒使用及效果:
在無(wú)內(nèi)毒素試管中,加入100 uL細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液,或待測(cè)樣品。再加入100 uL鱟試劑溶液,混勻,37ºC溫育T1分鐘。溫育結(jié)束,加入100 uL顯色基質(zhì)溶液,混勻,37ºC溫育T2分鐘。溫育結(jié)束,加入500 uL偶氮化試劑1溶液,混勻,加入500uL偶氮化試劑2溶液,混勻加入500 uL偶氮化試劑3溶液,混勻,靜置5分鐘,于545nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值。
內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)范圍(EU/mL)為0.01-0.1,T1為60分鐘,T2為6分鐘；內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)范圍(EU/mL)為0.1-1,T1為10分鐘,T2為6分鐘。

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