超敏人活化素A(ACV-A)ELISA檢測試劑盒實驗原理及參數(shù)
瀏覽次數(shù):2690 發(fā)布日期:2021-4-12
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RENJIEBIO超敏C系列ELISA試劑盒通過嚴格的性能檢測,以滿足客戶對精確性,特異性,準確度和靈敏度的要求。
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人ACV-A單克隆抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的ACV-A與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中 ADP 的濃度成正比。加入終止液終止反應,在 450 nm 波長測定吸光度值。
1. 96孔讀板儀器。
2. 自動洗板機.
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。
5. 額外洗板緩沖液 (neutral PBS 。試劑盒內(nèi)提供足量。如需額外緩沖液可參考如下配方)。
0.01M PBS:氯化鈉(NaCl),8g 氯化鉀(KCl), 0.2g 磷酸氫二鈉(Na2HPO4),1.44g 磷酸二氫鉀(KH2PO4), 0.24g 加800ml ddH2O!∮1M的HCI或NaOH調(diào)pH, 定容1L!∪缓蟾邏赫羝麥缇覝乇4。
*樣品準備的相關試劑不含在試劑盒中。
生物安全1、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定,嚴格防止交叉污染,所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應按照傳染物進行處置。
2、試劑盒的液體組分中,含有proclin-300防腐劑,可能引起皮膚過敏反應,避免吸入煙霧與皮膚接觸。
3、底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入煙霧。戴上防護手套,實驗完成后徹底洗手。
技術(shù)提示
1、混合蛋白溶液時,避免起泡。
2、加校準品與樣本時,每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結(jié)果準確性的必要條件。
4、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍色底物產(chǎn)物,會瞬間變?yōu)辄S色。
6、實驗中,用剩的板條,應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
7、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。
廢物處理
所有使用或未使用的試劑,所有污染性的一次性材料,應當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序,每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別,進行廢物和污物的處理,同時要嚴格依照有關規(guī)定對待所有的廢物和污物。