琛航C18色譜柱及C18色譜柱選柱技巧

液相色譜中使用C18柱的反相色譜法以生物體相關(guān)物質(zhì)為分析對象，能夠滿足主要研究領(lǐng)域的需要，使用釵�广泛。诊勶将对手C∩掀放品倍嗟?lt;/SPAN>C18柱和本公司的C18柱作下簡單介紹，以及選柱的一些小技巧。

如下圖所示，這是C18柱總體的鍵合思路。將具有烷基鏈的硅烷化劑與硅膠表面的硅醇基反應(yīng)，因?yàn)槭褂昧斯矁r(jià)鍵和的方式將烷基鏈緊緊固定在硅膠表面，所以烷基鏈不會(huì)被流動(dòng)相沖洗掉，作為色譜固定相穩(wěn)定發(fā)揮著作用。

使用硅烷偶聯(lián)劑（Silane Coupler）導(dǎo)入C18基團(tuán)

這張圖描述的C18填料的合成過程看似簡單，但實(shí)際上固相與液相之間的反應(yīng)比液相之間的反應(yīng)更難控制。與一般化學(xué)品相比，對色譜填料再現(xiàn)性的要求也會(huì)高很多。如果實(shí)際使用的原料和反應(yīng)條件稍有差別，最終產(chǎn)品的分離特性將會(huì)有很大改變。這種變化，隨目的不同或者成為缺點(diǎn)，或者也可能成為優(yōu)點(diǎn)。但是，如果不具有良好再現(xiàn)性，在實(shí)際應(yīng)用中就不能被采用。這樣，在市場上就出現(xiàn)了數(shù)百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱。

下圖為關(guān)于填料的合成進(jìn)一步詳細(xì)說明，市場上的商品大多分為如下兩個(gè)步驟進(jìn)行合成。

填料的合成 

首先，如剛才介紹的，將C18基團(tuán)導(dǎo)入到硅膠表面。接下來進(jìn)行第二步反應(yīng)，將小分子試劑導(dǎo)入到第一步殘留的硅醇基上，此過程被稱為封尾。通過封尾，盡可能地減少原料硅膠的影響，確保與硅膠表面有較強(qiáng)相互作用的化合物的分離效果。另外，通過此步驟，能夠比較容易的確保產(chǎn)品性能的再現(xiàn)性。不受原料硅膠自身特性影響，提供性能穩(wěn)定的商品是廠家永恒的課題。另外，最近作為硅膠的替代物，含有機(jī)物的原料也在商品化并在出售，但是，這樣的原料還沒有超過硅膠，大半的商品仍然是以硅膠為原料。

到這里我們可以簡單猜測出造成C18鍵合型填料差別化的主要原因：

1、原料硅膠不僅在細(xì)孔徑、粒徑、表面積等幾何學(xué)性質(zhì)上有差別，而且其化學(xué)性質(zhì)也有不同。

2、與烷基反應(yīng)的硅醇基也有一官能性，二官能性和三官能性之分。并且，隨反應(yīng)條件不同，產(chǎn)品的最終性質(zhì)也會(huì)有顯著差別，如下：

殘留硅醇基的種類和性質(zhì) 

3、各公司色譜柱封尾反應(yīng)的差異也是造成色譜柱性能差異的重大因素，而封尾方法也是作為各公司機(jī)密的存在。

以上這三點(diǎn)原因所造成色譜柱性能結(jié)果可以概括為以下七點(diǎn)：

a. 色譜柱理論塔板數(shù)，使用壽命；

b. 同批柱子重現(xiàn)性；

c. 使用LC-MS觀察到的色譜柱流失；

d. 對化合物的保留能力；

e. 對酸中性化合物的峰形；

f. 對極性（堿性）化合物的峰形；

g. 對配位化合物的峰形。

結(jié)合以上7點(diǎn)，這里我對琛航公司主要的幾款C18柱作下簡單評價(jià)（一般來說a至e這5點(diǎn)是我們公司對色譜柱的基本要求，基本構(gòu)不成問題）。

Comasil C18

超高的載碳量，超低的金屬離子含量是其突出優(yōu)點(diǎn)，前者保證了色譜柱較強(qiáng)的保留能力與分離能力，后者保證了對配位化合物的良好峰形，同時(shí)金屬離子含量低也使得殘余硅羥基的pH較一般色譜柱大，因而有更好的惰性，其衍生產(chǎn)品Comasil BDS C18更是檢測極性（堿性）化合物的首選。

Comatex C18

與Comasil類似的分離分析能力，但較低的柱壓，超長的使用壽命是其突出優(yōu)點(diǎn)，其衍生產(chǎn)品Comatex C18-AQ對親水型的化合物有較好的保留能力和特殊的選擇性。

Inertex C18

較Comasil，Comatex僅僅略低的載碳量，卻大大降低了化合物的保留時(shí)間，非常適合用于強(qiáng)保留化合物的分析，例如人參皂苷，黃芪甲苷之類疏水性非常好的中藥分析。同時(shí)Inertex使用的硅膠顆粒大小分布范圍非常小，因而較一般色譜柱有更低的柱壓，大大保證了其使用壽命，這是其突出優(yōu)點(diǎn)。

本公司主要的3款色譜柱就介紹到這，一句話總結(jié)就是市場上沒有任何一根色譜柱可以涵蓋所有的應(yīng)用，具體應(yīng)用還得具體分析，實(shí)事求是是化學(xué)分析工作的基本要求。