經(jīng)過近30年的發(fā)展革新，電轉(zhuǎn)染已成為基因的功能研究領(lǐng)域中不可或缺的技術(shù)手段。下文不僅是一篇新上市的轉(zhuǎn)染儀器的介紹，更是電轉(zhuǎn)染儀技術(shù)革新的介紹，因為：                                 

 

 

     NEPA GENE公司專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)細(xì)胞電轉(zhuǎn)染儀及電融合儀等，其生產(chǎn)CUY21系列（）電轉(zhuǎn)染儀在研究領(lǐng)域中久負(fù)盛名，已被數(shù)百篇文獻(xiàn)引用，其中不乏高水平雜志的文章，如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。

 

 

           2011年，NEPA GENE推出新一代全能型的NEPA21高效基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。

          傳統(tǒng)的電轉(zhuǎn)儀多采用指數(shù)衰減波或方波波形，對細(xì)胞膜進(jìn)行電穿孔。NEPA21采用專利設(shè)計的三步法電轉(zhuǎn)染程序，在對細(xì)胞膜進(jìn)行穿孔的同時，利用“電泳效應(yīng)”將外源基因高效的導(dǎo)入到細(xì)胞當(dāng)中。并且配合獨有的反向?qū)�入（Reverse Transfer）及電壓衰減（Voltage Decay）設(shè)計，可在提高轉(zhuǎn)染效率的同時，大大提高細(xì)胞存活率。

 

          目前普遍使用的的轉(zhuǎn)染方法都需要化學(xué)試劑的幫助，通常每個樣品需要花費$8、$12、甚至$16不等。這些輔助試劑可能會有副作用，影響細(xì)胞的生長速度、凋亡或藥物敏感性等。此外，雖然電穿孔轉(zhuǎn)染法已經(jīng)發(fā)展了近30年，但針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞時，沒有任何一個廠家的電轉(zhuǎn)染設(shè)備是不需要化學(xué)試劑輔助的

          NEPA21的出現(xiàn)，情況發(fā)生了改變。 NEPA GENE公司的設(shè)計理念是，堅持開發(fā)最精密的DNA、RNA轉(zhuǎn)染設(shè)備，改變傳統(tǒng)的需要特殊試劑輔助的轉(zhuǎn)染方式。NEPA21的電脈沖芯片、程序設(shè)計等多方面的技術(shù)革新是全球領(lǐng)先的，例如，它能產(chǎn)生高精度低壓脈沖、能精確的控制脈沖時間、其電容設(shè)計還能瞬間電極反向放電等。由于上述原因，NEPA21實現(xiàn)了不需特殊試劑輔助，也能高效的轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞、組織、甚至是活體動物。

 

      細(xì)胞可在懸浮（In Suspension）、或貼壁（In Adherent） 狀態(tài)下進(jìn)行轉(zhuǎn)染。適用于各種細(xì)胞，包括各種難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、血液細(xì)胞、免疫細(xì)胞等。

     細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下進(jìn)行電轉(zhuǎn)染時，可與外源基因360度的接觸，穿孔效率和基因?qū)�入效率最好。NEPA21設(shè)計了多種規(guī)格的電轉(zhuǎn)杯，以適應(yīng)不同細(xì)胞數(shù)量的轉(zhuǎn)染需要。（）

     但有些原代細(xì)胞是終末分化的，如原代神經(jīng)元細(xì)胞、乳鼠心肌細(xì)胞等。這些細(xì)胞一旦從活體組織中分離出來貼壁培養(yǎng)，便不可消化傳代，也就無法實現(xiàn)懸浮狀態(tài)的轉(zhuǎn)染。針對這種情況，NEPA GENE開發(fā)了適用于普通細(xì)胞培養(yǎng)板的貼壁轉(zhuǎn)染電極——這樣，實驗者只需把細(xì)胞鋪板在普通的24孔板或6孔板中，就可以直接實現(xiàn)電轉(zhuǎn)染啦！

     此外，NEPA21的專利設(shè)計的電穿孔程序，不僅能在細(xì)胞膜上形成通道，還能作用于核膜（nuclear envelope），從而將DNA直接運輸?shù)郊?xì)胞核中。因此，即使是終末分化的細(xì)胞，DNA也能在不依賴于細(xì)胞分裂的情況下進(jìn)入到細(xì)胞核中。

 

          配合多達(dá)250多種活體轉(zhuǎn)染電極，NEPA21可覆蓋幾乎所有的組織、器官、動物轉(zhuǎn)染需求。例如，大鼠或小鼠的肌肉、皮膚、肝臟、腎臟、睪丸、卵巢、腦部、視網(wǎng)膜、角膜等組織，還可用于轉(zhuǎn)染魚、蜜蜂等動物，以及轉(zhuǎn)染植物種子、獲得轉(zhuǎn)基因植株。 這些電極可以讓您嘗試許多以前很難實現(xiàn)的轉(zhuǎn)染實驗，如果您有新的idea，NEPA GENE公司還可以根據(jù)客戶的天才設(shè)想，定制特殊的電極以滿足特殊部位的轉(zhuǎn)染需要。點擊此處了解NEPA21的電極選擇方法，開始自由的進(jìn)行活體轉(zhuǎn)染試驗（）

         無論您是需要進(jìn)行特異部位的轉(zhuǎn)染，例如鼠胚的腦組織、雞胚的大腦皮層或胃部等，還是需要對整個胚胎進(jìn)行轉(zhuǎn)染，NEPA GENE都能提供個性化的咨詢、建議和服務(wù)。

 

 

1. Tabata H, Nakajima K. Efficient in utero gene transfer system to the developing mouse brain using electroporation: visualization of neuronal migration in the developing cortex. Neuroscience. 2001;103(4):865-72.

 2. Hidenori Tabata and Kazunori Nakajima. Chapter 14 In Utero Electroporation: Assay System for   Migration  of Cerebral Cortical Neurons. 《Electroporation And Sonoporation in Developmental Biology》  

注：日本NEPA GENE公司的CEO兼首席技術(shù)設(shè)計師 Mr Hayakawa（早川先生）是CUY21的設(shè)計者和制造者，BEX公司是曾受NEPA GENE委托生產(chǎn)CUY21的OEM廠家�，F(xiàn)NEPA GENE已更換其OEM制作商，并開發(fā)出新一代的NEPA21全能型高效基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。

關(guān)于早川先生對電轉(zhuǎn)染技術(shù)的貢獻(xiàn)，請參看 《Electroporation And Sonoporation in Developmental Biology》——圖書的主編暨雞胚活體轉(zhuǎn)染的先驅(qū)Mr Nakamura在第一章明確的肯定了早川先生的貢獻(xiàn)。點擊閱讀圖書全文（）。