血塞通滴丸為血塞通的新劑型，其主要成分為人參皂苷Rg1，三七皂苷R1。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法測定血塞通滴丸中人參皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。

　　1、儀器與試藥

　　SSI公司PC-3000高效液相色譜儀，熱電300紫外分光光度計，人參皂苷Rg1，三七皂苷R1對照品（中國藥品生物制品檢定所），血塞通滴丸（批號：20080409，20080401，20080402）本所自制。甲醇為色譜純，水為純化水。

　　2、方法與結(jié)果

　　2.1檢測波長確定稱取人參皂苷Rg1，三七皂苷R1對照品適量，用甲醇配制成20μg·ml-1的溶液，在200～300nm波長處掃描，結(jié)果人參皂苷Rg1，三七皂苷R1均在203nm波長處有最大吸收。

　　2.2色譜條件色譜柱為島津KromasilC18（4.6mm×25cm）；流動相為甲醇-水（58∶42）；流速為1.0ml·min-1，檢測波長為203nm；理論板數(shù)按人參皂苷Rg1，三七皂苷R1峰計算不低于10000，分離度大于2.0。

　　2.3含量測定

　　2.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

　　人參皂苷Rg1：精密稱定人參皂苷Rg1對照品約60mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1.0，3.0，5.0，7.0，9.0，10.0ml分別置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按上述色譜條件分別取10μl注入色譜儀，測定。結(jié)果表明人參皂苷Rg1在濃度0.116～1.160mg·ml-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，其回歸方程Y=-99466+3257868X，r=0.9992。

　　三七皂苷R1：精密稱定三七皂苷R1對照品約60mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0ml分別置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按上述色譜條件分別取10μl注入色譜儀，測定。結(jié)果表明三七皂苷R1在濃度0.232～0.812mg·ml-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，其回歸方程Y=11772+2495523X，r=0.9987。

　　2.3.2重復(fù)性與穩(wěn)定性試驗(yàn)取標(biāo)準(zhǔn)曲線測定中心濃度點(diǎn)連續(xù)進(jìn)樣6次，量取峰面積計算RSD分別為人參皂苷Rg11.11%，三七皂苷R11.09%，重現(xiàn)性良好，可準(zhǔn)確用于含量測定。該溶液放置6h后重復(fù)進(jìn)樣，峰面積基本不變，RSD分別為1.05%和0.99%。

　　2.3.3精密度測定取樣品6份，精密稱定，按樣品含量測定方法測定RSD為2.5%。

　　2.3.4加樣回收率測定取血塞通滴丸10粒，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲10min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取5.0ml置10ml量瓶中,精密加入人參皂苷Rg1，三七皂苷R1對照品適量,加甲醇至刻度,搖勻。按上述色譜條件分別取10μl注入色譜儀，測定。

　　2.3.5樣品測定取血塞通滴丸10粒，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲10min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。按上述色譜條件分別取10μl注入色譜儀，測定。

　　2.3.6血塞通原料測定精密稱取血塞通原料約100mg，置25ml量瓶中，加甲醇適量，超聲10min使溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻。按上述色譜條件分別取10μl注入色譜儀，測定。

　　3、討論

　　血塞通滴丸的輔料為聚乙二醇6000。經(jīng)測試聚乙二醇6000的甲醇溶液無紫外吸收峰，對樣品的測定無干擾。本方法簡便、準(zhǔn)確，可作為控制血塞通滴丸中人參皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量測定方法。