{ 顯微鏡載物臺(tái)振動(dòng)問(wèn)題 }
在組織切片中膜片鉗制細(xì)胞時(shí),在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中能夠看到樣品的不同部分非常重要。這是找到要修補(bǔ)的細(xì)胞、重新定位刺激電極或藥物應(yīng)用移液器以及對(duì)正在記錄的細(xì)胞的遠(yuǎn)端部分進(jìn)行成像所必需的。這種移動(dòng)可以通過(guò)在保持樣品固定的同時(shí)移動(dòng)顯微鏡來(lái)實(shí)現(xiàn),也可以通過(guò)移動(dòng)樣品同時(shí)保持顯微鏡固定來(lái)實(shí)現(xiàn)。
從歷史上看,保持樣品固定并移動(dòng)顯微鏡是很常見(jiàn)的。這是由于“針對(duì)切片電生理學(xué)優(yōu)化”的顯微鏡中樣品臺(tái)的移動(dòng)通常遠(yuǎn)非平穩(wěn),并且有振動(dòng)的趨勢(shì)。這種振動(dòng)會(huì)導(dǎo)致現(xiàn)有的 高阻封接破裂并丟失記錄。因此,過(guò)去通常為膜片鉗裝置選擇第一個(gè)選項(xiàng)(移動(dòng)顯微鏡、固定樣品)。這確實(shí)是避免載物臺(tái)振動(dòng)的好方法,只要顯微鏡保持簡(jiǎn)單輕便即可。
隨著顯微鏡的成像功能增加,移動(dòng)顯微鏡變得越來(lái)越復(fù)雜。連接的相機(jī)、光源、液體光導(dǎo)等需要隨顯微鏡移動(dòng),這可能會(huì)影響成像系統(tǒng)的性能。而且,移動(dòng)重型顯微鏡往往會(huì)引起整個(gè)減振臺(tái)的振動(dòng),包括固定的樣品臺(tái)。因此,顯微鏡固定且樣品移動(dòng)的膜片鉗系統(tǒng)變得越來(lái)越普遍。為了確保與機(jī)械手一起移動(dòng)樣本不會(huì)干擾記錄,平臺(tái)移動(dòng)平穩(wěn)且無(wú)振動(dòng)變得越來(lái)越重要。這種穩(wěn)定的載物臺(tái)是高效可靠的膜片鉗裝置的核心組成部分,將對(duì)實(shí)驗(yàn)的成功率產(chǎn)生重大影響。
{ 是什么讓平臺(tái)移動(dòng)順暢? }
使用校準(zhǔn)的 3D 加速度計(jì)測(cè)量的 Sensapex uMs-MXY 平臺(tái)(藍(lán)色)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)參考產(chǎn)品(紅色)測(cè)量的 5 mm/s 移動(dòng)(黑色)的垂直振動(dòng)比較。
防止載物臺(tái)移動(dòng)過(guò)程中的振動(dòng)從載物臺(tái)的中心開(kāi)始: 運(yùn)動(dòng)生成本身必須平穩(wěn)。電機(jī)、流道和軸承必須按照非常高的標(biāo)準(zhǔn)制造并適當(dāng)張緊。甚至平臺(tái)的驅(qū)動(dòng)信號(hào)也有所貢獻(xiàn)——平穩(wěn)的加速和減速(而不是猛烈運(yùn)動(dòng)和猛烈停止)是關(guān)鍵。歸根結(jié)底,如果不完全描述平臺(tái)特征,這些方面幾乎是不可能判斷的。也就是說(shuō),大多數(shù)(如果不是全部)顯微鏡載物臺(tái)制造商可能會(huì)認(rèn)真完成這部分設(shè)計(jì)。
但是,即使載物臺(tái)的核心運(yùn)動(dòng)是最佳的,振動(dòng)仍然是可能的。這歸結(jié)為基本物理學(xué):膜片鉗平臺(tái)是一個(gè)倒擺:牢固地固定在光學(xué)平臺(tái)上,頂板由相對(duì)較長(zhǎng)的腿支撐,頂板上有相當(dāng)大的重量。任何加速和減速都會(huì)導(dǎo)致該鐘擺出現(xiàn)一些 “搖擺”(即振動(dòng))。擺錘還將拾取并可能增強(qiáng)電機(jī)線性運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生的剩余振動(dòng)。雖然這無(wú)法完全避免,但可以簡(jiǎn)化為完全可以忽略不計(jì),并且對(duì)錄制或成像沒(méi)有影響。
{ 使載物臺(tái)不易振動(dòng)}
減少樣品臺(tái)在移動(dòng)過(guò)程中的振動(dòng)趨勢(shì)建立在基本物理概念的基礎(chǔ)上。首先要考慮的是,整個(gè)物臺(tái)組件越硬,尤其是頂板和固定頂板的柱子或腿,物臺(tái)頂部在移動(dòng)過(guò)程中就越不容易受到振動(dòng)。堅(jiān)固的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵。
將 uMs FXY 載物臺(tái)頂板的剛度與鐵軌進(jìn)行比較。請(qǐng)注意不同的顏色縮放。
第二點(diǎn)同樣明顯:質(zhì)心越低越好。因此,將所有沉重的核心部件,尤其是電機(jī)和導(dǎo)軌,保持在盡可能低的位置將是一個(gè)主要因素。這是物臺(tái)設(shè)計(jì)中常見(jiàn)的妥協(xié)點(diǎn)。電機(jī)通常位于靠近頂板的位置,不必要地將質(zhì)心向上移動(dòng)。但是,平臺(tái)質(zhì)心的高度不僅僅由平臺(tái)本身決定。安裝在平臺(tái)上的設(shè)備也將有所貢獻(xiàn)。平臺(tái)上最重的物體將是顯微操縱器。理想情況下,這些應(yīng)該很輕(每個(gè) >1 kg 就好了),但也不應(yīng)該不必要地高,以免進(jìn)一步提高質(zhì)心(距離載物臺(tái)表面小于 100 毫米是一個(gè)很好的目標(biāo)值)。
Time-domain”ring-down”comparision of uMs FXY VS.competitor
{ 總結(jié) }
切片膜片鉗實(shí)驗(yàn)越高級(jí),在記錄過(guò)程中移動(dòng)樣本就越有用。為了能夠在不危及實(shí)驗(yàn)成功的情況下可靠地做到這一點(diǎn),樣品臺(tái)的設(shè)計(jì)必須能夠平穩(wěn)移動(dòng),振動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)很小。這是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的:
1、線性運(yùn)動(dòng)部件的良好設(shè)計(jì)和制造;
2、確保載物臺(tái),尤其是頂板安裝,盡可能堅(jiān)硬;
3、保持載物臺(tái)的質(zhì)心較低。